Il livello di progesterone è alto, la cagna si accoppia. Determinare i tempi dell'accoppiamento

DETERMINAZIONE DEI TEMPI DI ACCOPPIAMENTO PER LE Cagne

Per un allevatore serio che intende allevare “fuori casa” (in un’altra città, o anche in un altro paese), l’efficacia dell’accoppiamento è molto Grande importanza. Nessuno vuole viaggiare bordi distanti passato inutilmente. Per un allevatore principiante, anche se ha trovato un cane adatto letteralmente nella porta accanto, neanche i problemi vuoti porteranno gioia. Secondo le statistiche, il 50-80% degli accoppiamenti falliti è dovuto al fatto che la cagna è stata accoppiata nel momento sbagliato. Quali metodi, tenendo conto di secoli di esperienza e di nuove conquiste scientifiche, possiamo utilizzare per determinare il periodo ottimale di accoppiamento?

Maschio "di prova".

Molti maschi “esperti” sono esperti in questa materia. Se tu e la tua cagna siete arrivati ​​per la riproduzione, e un maschio esperto e solitamente attivo non mostra l'entusiasmo necessario, preferendo solo saltare, giocare e imitare attività vigorose, molto probabilmente non dovreste aspettarvi dei cuccioli, anche se riuscite a " persuadere” i potenziali partner ad adempiere onestamente al proprio dovere. Sulla base di questa “consapevolezza” di un produttore esperto alla vecchia maniera utilizzando il cosiddetto maschio “di prova” per determinare la data di accoppiamento ottimale. Cioè, se un tale maschio mostra l'attività corretta in relazione alla femmina in calore, allora può essere presa per l'accoppiamento con il maschio pianificato.
Svantaggi di questo metodo: Ci sono maschi eccessivamente sexy che sono pronti ad allevare una femmina quasi ogni giorno del suo calore, e alcuni maschi che vivono permanentemente nella stessa casa con la femmina, al contrario, perdono interesse per lei. Quindi, potremmo avere in mente il metodo “test maschio”, ma è consigliabile utilizzarlo solo come ausiliario.

La coda è importante

La posizione della coda della cagna durante il periodo di calore ha un certo significato. All'inizio del calore, la cagna flirta con i maschi, ma al minimo tentativo del maschio di saltarle addosso, scatta e infila la coda. Quando la cagna sarà pronta ad accettare un maschio, inizierà a muovere la coda di lato in un modo molto originale, come se la piegasse formando un arco. Anche le femmine con la coda tagliata provano a eseguire questa procedura.
Per vedere questo spettacolo non è affatto necessario un maschio “di prova”. È sufficiente arruffare il pelo sulla groppa della cagna con la mano o grattare la groppa sopra la coda.
Svantaggio del metodo: Alcune cagne emotive mettono da parte la coda molto prima del periodo appropriato.

Contando i giorni

Nella letteratura canina popolare puoi leggere il metodo di conteggio dei giorni. Secondo questo metodo, la cagna dovrebbe essere riprodotta 11-13 giorni dopo l'inizio dell'estro. Ma dov'è, l'inizio?
Per tenere più facilmente traccia del ciclo sessuale della tua cagna, prenditi il ​​tempo necessario per annotare la data e la durata dei calori precedenti. In questo modo avrai almeno una vaga idea di quando aspettarti la tua prossima manche. In genere l'intervallo è di circa 6 mesi. Tuttavia, alcune cagne perdono il pelo una volta ogni 4 mesi, mentre altre solo una volta all'anno. E anche per la stessa cagna, l’intervallo tra le batterie può essere “spento”. Tuttavia, un po’ di controllo è meglio di niente. Durata media Le femmine sono in calore per 3 settimane (in realtà, da 10 giorni a un mese).
Non ti perderai il classico inizio di calore se monitori attentamente il comportamento della cagna. Circa un paio di settimane prima del calore, spesso inizia a "sedersi" durante le passeggiate, lasciando segni ai maschi vicini (a volte può anche improvvisamente "creare una pozzanghera" in casa, anche se di solito non lo fa mai). D'ora in poi monitoreremo attentamente la cagna per non perdere il primo giorno di apparizione. sanguinamento. Per alcuni proprietari di cagna questo diventa " mal di testa”, se il suo animale domestico è troppo pulito e si lecca attentamente. Puoi superare in astuzia gli "puliti" in questo modo: al mattino, subito dopo il risveglio, prima che la cagna abbia il tempo di leccarsi, fai scorrere un batuffolo di cotone lungo il cappio della cagna. Troverai sicuramente tracce di secrezione sul tampone (se presenti), così come il loro colore (che è anche importante).
Diciamo che oggi la cagna ha una secrezione. Ciò significa che oggi sarà considerato il primo giorno di caldo. Iniziamo il conto alla rovescia.
Svantaggio di questo metodo: in realtà, i tempi della “caccia” (il periodo durante il quale la cagna permette al maschio di avvicinarsi – in termini scientifici, l'ovulazione) varia notevolmente tra le diverse cagne. Una cagna può iniziare ad ovulare il 7° giorno e un'altra il 20. Con l’età, l’inizio dell’ovulazione solitamente si sposta in una data successiva. Quindi il calcolo puramente matematico non ci aiuterà molto. Deve essere combinato con altri metodi.

Monitoriamo lo scarico

Come accennato in precedenza, non è importante solo la presenza di secrezioni in una cagna, ma anche il suo colore. Nell'estro “classico”, le secrezioni saranno prima rosso vivo, poi brunastre e infine rosa o giallastre. Si ritiene che la cagna debba essere riprodotta il giorno successivo o il giorno successivo alla comparsa delle secrezioni rosa.
Ma questo è se tutto va secondo lo scenario “classico”. A volte la sequenza “rosso - brunastro - rosa” è interrotta. Ad esempio, la scarica rossa va e viene, e poi si ferma, senza fasi intermedie.
Peggio di così, alcune cagne hanno un estro cosiddetto “nascosto”, cioè senza alcuna secrezione. Per loro questo metodo completamente inaccettabile.

Test dei vecchi allevatori

Per utilizzare correttamente questo test, devi imparare a determinare le condizioni dell'anello (i genitali esterni della cagna). All'inizio dell'estro, l'anello si gonfia e nei primi giorni dell'estro sembra voluminoso. Ma se lo tocchi, scoprirai che è duro, cioè in forma. Quando si verifica l'ovulazione, l'ansa diventerà morbida e flessibile. E se muovi il bordo inferiore dell'anello con il dito, la cagna tirerà l'anello verso l'alto (è così che di solito aiuta il maschio durante la penetrazione).
Pertanto, una cagna può essere considerata pronta per la riproduzione quando:

• lo scarico dall'ansa diventa rosa pallido o si interrompe del tutto;
• se passi la mano sulla groppa di una cagna contropelo, lei sposterà chiaramente la coda di lato;
• Il ciclo della cagna diventa morbido e lento.

La combinazione di tutti e tre i segni indica che la cagna dovrebbe essere riprodotta entro 48 ore.
Questo test è stato e continua ad essere utilizzato con successo dagli allevatori della vecchia scuola, anche se ora sono comparsi test scientifici più accurati. Ma in alcuni casi, quando un laboratorio e un veterinario con le qualifiche adeguate sono “a cento miglia di distanza”, lui rimane l’unico disponibile.

Esame dello striscio vaginale

Poiché, come già accennato, ce ne sono diversi caratteristiche individuali passando l'estro, per affidabilità, puoi fare un'analisi citologica speciale di uno striscio vaginale (è stato inventato negli anni '80 del secolo scorso, e ora lo fanno molti veterinari nella nostra città). Ciò è particolarmente importante se la tua cagna "mancava" durante il calore precedente, nonostante la presenza di segni di prontezza e un accoppiamento apparentemente riuscito secondo tutte le regole. Non entreremo nei dettagli della tecnologia di analisi, lasciandolo agli specialisti veterinari. E il proprietario della cagna dovrebbe sapere che il risultato dell'analisi è tanto più affidabile quanto più si avvicina al momento dell'ovulazione. Potrebbe essere necessario ripetere l'analisi tra qualche giorno per chiarire il momento ottimale dell'accoppiamento.
Per il 90% delle cagne, il risultato di uno striscio vaginale è affidabile, ma sfortunatamente, nel 10% delle cagne, la citologia vaginale non corrisponde al modello atteso. Se il tuo cane rientra in quel 10%, questa è la tua ultima risorsa.

Test del progesterone

Il progesterone è un ormone prodotto dalle ovaie e garantisce la gravidanza in tutte le specie animali.
Il test del progesterone è simile al progesterone umano, quindi può essere eseguito in un laboratorio medico. (Tieni presente che laboratori medici Di norma, il sangue non viene raccolto dagli animali. Puoi prelevare il sangue per le analisi presso clinica veterinaria, avendo precedentemente appreso come, quando e in che forma consegnarlo al laboratorio medico).
Nella cagna, il progesterone inizia a essere prodotto anche prima dell'ovulazione e al momento dell'ovulazione il suo livello aumenta in modo significativo, il che fornisce informazioni sul momento esatto dell'ovulazione.
Per garantire l'accuratezza del risultato (che è particolarmente importante per l'estro "nascosto"), i livelli di progesterone possono essere esaminati ogni 2-3 giorni, a partire da 3-5 giorni dall'inizio dell'estro.
Certo, è meglio consultare un veterinario, ma ecco comunque i numeri per un controllo indipendente:

• Il livello iniziale di progesterone è inferiore a 3,18 nmol/l (1,0 ng/ml);
• È necessario prepararsi all'accoppiamento (avvisare il proprietario del cane maschio) quando il livello di progesterone raggiunge 7,95 nmol/l (2,5 ng/ml);
• L'ovulazione avviene a un livello di progesterone di 15,9 nmol/l (5 ng/ml). Con questo indicatore, l'accoppiamento dovrebbe essere effettuato entro 24-48 ore

Bene, visto che parliamo di progesterone, teniamo presente che dopo l'ovulazione, il suo livello continuerà a salire per 2-3 settimane, fino a raggiungere 31,8-254,4 nmol/l (10-80 ng/ml). Questo livello è necessario per mantenere la gravidanza e dura 60 giorni nei cani.
48 ore prima della nascita, il progesterone inizia a scendere a un livello di 6,36 nmol/l (2 ng/ml) e 24 ore prima del parto scende a 3,18 nmol/l (1 ng/ml). In questo modo, se lo si desidera, è possibile determinare con precisione l'ora di nascita e, soprattutto, momento ottimale per taglio cesareo (se prescritto per indicazione veterinaria).
Buon allevamento, cari allevatori, e cuccioli sani e belli!

Laetitia Barlerin

Controllando la riproduzione dei cani, per molto tempo si accontentavano di sopprimere l'estro nelle cagne. Lo sviluppo dell'allevamento dei cani di razza ha portato alla nascita di una vera e propria ginecologia canina, sviluppata in modo particolareggiato dal Dr. Foitbonnet, partecipante all'ultimo congresso CNVSPA.

Sono state ricevute consultazioni riguardanti l'infertilità nelle donne l'anno scorso molto diffuso nel trattamento dei cani. Attualmente, una combinazione di metodi per la determinazione radioimmunologica del livello di progesterone nel sangue (che ora è possibile in ambito clinico grazie a piccoli kit diventati commerciali) e il prelievo di strisci vaginali consente di determinare con precisione il momento ottimale dell'accoppiamento e fecondazione. Questo livello di diagnostica ci consente di risolvere maggior parte problemi legati alla fertilità femminile. Infatti, il 50-80% di questi problemi sono il risultato di un momento di accoppiamento determinato in modo errato! Rimangono casi di infertilità, dove il semplice monitoraggio dell'inizio dell'ovulazione non è sufficiente: è necessario effettuare numerosi studi, anche di carattere preventivo (per una risposta più rapida possibile senza attendere il ciclo sessuale successivo) durante l'intero periodo. dell'estro e della gravidanza. Splen Fontbonnet (ENVL* Ecole Nationale Veterinaire a "Lyon) all'ultimo congresso CNVSPA a Lione nel dicembre 1996 ha delineato le principali caratteristiche dell'osservazione approfondita della cagna, il decorso della diagnosi e l'eventuale terapia.

indicazioni per un'osservazione approfondita

infertilità ripetuta.

Se dopo diversi tentativi, nonostante i metodi classici definizione attendibile Quando si verifica il momento ottimale dell'accoppiamento, la cagna è ancora single, è necessario effettuare un ciclo più completo di osservazioni dello stadio di maturazione dei follicoli, nonché dell'eventuale gravidanza.

estro atipico e anomalo

Calore atipico: ricorrente troppo spesso (a volte mensilmente), volume anomalo scarico sanguinante(troppo o troppo poco); scarsa attrazione dei maschi; estro interrotto (osservato in branchi di giovani femmine all'inizio dell'estro nella femmina dominante; l'estro di durata normale riprende dopo circa un mese).

Calore anomalo:

Durata: più di 25 o meno di 7 giorni. Le batterie “brevi”, tuttavia, sono spesso il risultato di un’errata determinazione da parte del proprietario del suo primo giorno; allo stesso modo, alcune cagne sono capaci di fecondare anche dopo il 25° giorno del loro ciclo (Berthe Alleman).

Dall'assenza di ovulazione diagnosticata a seguito dell'osservazione dei precedenti estri.

anomalie dell'interesse

Nel caso di un intervallo molto breve tra estri lunghi successivi, la presenza di iperestesia dovuta a tumore ovarico o cisti follicolari. In caso di interestrus troppo lungo tra un estro prolungato, si può pensare alla sindrome di ipogonadismo (diminuzione dell'attività ormonale delle gonadi), associata ad insufficiente maturazione dei follicoli.

aborto e parto prematuro

Fino al 40-45 giorno di gravidanza, la perdita di embrioni o feti non è sempre evidente a causa del loro riassorbimento intrauterino: il monitoraggio della gravidanza dovrebbe includere studi sierologici per il virus dell'Herpes.

dispiegamento di una sorveglianza approfondita

osservando l'estro

Durante il periodo di osservazione vengono condotti vari studi.

Strisci vaginali

L’analisi è semplice, ma fornisce poco per la prognosi. Condotto per determinare (mediante test multipli e ripetuti) il tasso di cheratinizzazione delle cellule vaginali, che indica l'azione dell'estradiolo prodotto dai follicoli ovarici. Un basso tasso di cheratinizzazione (meno del 50%) durante il proestro e anche l'estro (quando la femmina accetta un maschio) o, al contrario, una rapida crescita dall'inizio del proestro e dopo la fine dell'estro è segno di un'anomalia che richiede studio e, possibilmente, correzione ormonale.

Striscio vaginale

Determinazione quantitativa del contenuto ormonale

Il metodo per determinare la concentrazione di estradiolo (in pratica - estradiolo 17) è originale in relazione a metodi classici monitorare l'ovulazione. Utilizzato nella fase del proestro o durante la maturazione dei follicoli. SU grafico 1: Normalmente, la concentrazione di estradiolo nel plasma progredisce durante il proestro e raggiunge un picco (circa 80-120 pmol/1* secondo i dati dell'autore e di laboratorio) circa 24 ore prima del picco di secrezione dell'ormone luteinizzante LH (Prodan B). Quindi diminuisce gradualmente e si stabilizza a un livello basso durante l'estro. Se la curva è “dentata”, gli esami del sangue vengono ripresi ogni 48 ore a partire dal 3° giorno dell'estro.

L'andamento di alcune curve indica anomalie nella maturazione del follicolo, causando una mancata ovulazione: rapido aumento la secrezione di estradiolo a valori anormalmente elevati (più di 400 pmol/l) indica l'estrogenizzazione del corpo. Al contrario, una curva anormalmente bassa (inferiore a 50-60 pmol/l) è segno di ipoestrogenismo associato ad insufficiente maturazione dei follicoli.

L'estradiolo è un ormone instabile e scarsamente conservato. Un campione di sangue con un anticoagulante (p. es., eparina) deve essere centrifugato entro la mezz'ora successiva; il plasma viene quindi raffreddato; i suoi ulteriori movimenti vengono effettuati solo in contenitori termici. Si consiglia di inviare flaconi di campioni solo a laboratori specializzati nella determinazione degli ormoni nei cani, poiché la loro concentrazione di estradiolo è inferiore a quella umana ed è difficile da rilevare in un laboratorio “classico”. Il test del testosterone viene eseguito durante l’estro perché rileva anomalie occasionali dell’ovulazione. SU grafico 1: A ciclo normale I livelli di progesterone, bassi durante il proestro, aumentano immediatamente dopo che l'LH ha raggiunto il suo picco e si stabilizzano alto livello. Durante il metaestro diminuisce molto lentamente (indipendentemente dalla presenza di “a” o dall'assenza di gravidanza “b”) e raggiunge il livello minimo intorno al 60° giorno dopo l'ovulazione. La determinazione dei livelli di progesterone è un metodo classico per monitorare l'ovulazione per determinare il momento ottimale dell'accoppiamento. Alla fine dell'estro (determinato mediante striscio vaginale) ultima analisi sangue per verificare l'attività del corpo luteo in questa fase. Una diminuzione dei livelli di progesterone è la prova della fine dell'ovulazione o del fallimento prematuro del corpo luteo.

Determinazione del contenuto ormonale ghiandola tiroidea T4 è indicato nei casi di ipertiroidismo che porta ad anomalie dell'ovulazione (probabilmente attraverso iperlattinemia), nascita prematura o nati morti.

Sierologia per il virus dell'Herpes.

È importante condurre ricerche durante il proestro, poiché durante questo periodo le cagne infette da herpes possono sperimentare la riattivazione del virus con sieroconversione. In caso di risultato positivo, è necessario ripetere il test dopo 15 giorni per giudicare la dinamica dello sviluppo degli anticorpi.

Ecografia (ecografia) delle ovaie.

Effettuare alla fine del proestro per individuare le cisti follicolari.

dal punto di vista di un professionista

Per effettuare un monitoraggio approfondito è necessario prelevare una serie di prelievi di sangue a partire dall'inizio del proestro. Il plasma viene refrigerato e inviato al laboratorio solo se la cagna non rimane incinta entro un mese: evitando così l'attesa di un nuovo calore e la necessità di indagare su nuovi problemi casuali. Il regime raccomandato dal Dr. Fontbonne:

Proestro: campioni di sangue prelevati nei giorni 3,5,7,9 e 11, refrigerare e preparare i campioni 7 o 9 per la sierologia per il virus dell'Herpes.

Estro: preparare diversi campioni per il progesterone.

Fine del calore: prelievo del sangue.

monitoraggio della gravidanza

È necessario perché le donne incinte potrebbero non portarlo a termine naturalmente.

Determinazione dei livelli di progesterone

1-2 test a settimana durante il primo mese di gravidanza aiuteranno a identificare la carenza del corpo luteo, che porta al riassorbimento o all'aborto fetale, e forniranno un trattamento tempestivo.

Ecografia addominale

Condotto il 18-20° giorno di gravidanza e ripetuto settimanalmente per l'identificazione varie patologie: morte dei rifiuti senza Segni clinici, dimensioni anormali del feto e delle membrane, iperplasia gladulocistica, ecc.

Cistosi ovarica

Studi sierologici

In caso di riassorbimento o aborto fetale, deve essere verificata la presenza di infezione possibile motivo(Virus dell'Herpes, Brucella).

Nota: Durante l'estro e la gravidanza se ci sono sospetti perdite vaginali svolgere analisi batteriologiche strisci dalla cervice.

trattamento

terapia ormonale

La maturazione insufficiente dei follicoli (ipoestrogenismo) è una conseguenza dell'azione compromessa dell'ormone follicolo-stimolante FSH (Prolan A) dell'ipofisi sullo sviluppo dei follicoli. Questo viene corretto con gonadotropina sierica ottenuta dal sangue di una cavalla gravida (SFG, Folligon n.d.). Per via intramuscolare, 30 mg/kg al giorno dall'inizio del proestro per 3-7 giorni - fino ad ottenere il 60% degli strisci vaginali con segni di cheratinizzazione.

Viene utilizzato un farmaco della medicina “classica” - Menotropina (Humegon ND) o hMG (Induttore ND) - un farmaco con un effetto dominante di FSH e LH residuo. La tendenza attuale è verso l’uso di FSH altamente purificato (come Metrodin ND, non ancora testato sui cani) perché l’FSH puro produce risultati migliori rispetto all’FSH misto nelle donne. Pertanto, il Dr. Fontbonnet sconsiglia l'uso di analoghi del fattore di rilascio ipotalamico (Receptal ND) nelle cagne, poiché stimolano il doppio rilascio di Prolan A e B, che interferisce con la maturazione follicolare. Durante tale trattamento non è necessario stimolare l'ovulazione con hCG, poiché i follicoli normalmente maturi ovulano da soli.

Iperestrogenismo e mancanza di ovulazione, non suscettibili ai metodi di trattamento classici

La secrezione anormalmente precoce ed eccessivamente abbondante di estrogeni da parte dei follicoli provoca un blocco a livello dell'ipotalamo. Nella medicina umana (in questo caso e quando si parla di trattamenti precedentemente infruttuosi), vengono utilizzati antiestrogeni, ad esempio il clomifene (Clomid ND). Il suo effetto, purtroppo, non è stato ancora testato sui cani.

Assenza di ovulazione senza insufficienza follicolare o estro prolungato

L'ovulazione è stimolata dall'uso di farmaci con l'azione dell'LH (Gonadotrophie chorionique Endo nd, Chomlon ND) - tre iniezioni intramuscolari di 50 UI/kg con un intervallo di 48 ore.

Attenzione: L'effetto immunosensibilizzante di questa glicoproteina nelle donne e nelle cavalle è ben noto! È anche in grado di provocare disturbi dell'ovulazione bloccando il picco dei livelli di LH endogeno, quindi, a meno che non sia assolutamente necessario, è meglio non utilizzarlo.

Deficit funzionale del corpo luteo

La violazione della secrezione di progesterone da parte del corpo luteo viene corretta dall'uso di questo ormone:

Orale: Utrogestan nd, efficace per le cagne alla dose di 1-2 capsule mattina e sera fino al 58° giorno di gravidanza

Per via intramuscolare 1-2 volte a settimana Tocogestan nd, Progest 500 nd. Poiché il metabolismo del progesterone varia da una cagna all'altra, si raccomanda il monitoraggio dei livelli di progesterone per 2 settimane.

Nota: In alcune cagne, l'arresto della progesteronemia rende impossibile farlo nascita normale e necessario Taglio cesareo. È utile avvisare il proprietario!

trattamento antibiotico

I chinoloni (Entrofloxacina) sono considerati i più efficaci contro la micoplasmosi.

L'uso degli antibiotici a scopo preventivo non deve essere sistematico, ma va utilizzato nei casi di vera infertilità di origine batterica secondo le indicazioni dell'antibiogramma.

chirurgia

L'ovariectomia di una o entrambe le ovaie nelle cagne riproduttrici è indicata se si sospetta un tumore ovarico o una cisti follicolare.

conclusione

Grazie all'arsenale medicinale che un moderno veterinario ha a sua disposizione, può effettivamente offrire all'allevamento dei cani una ricerca non meno profonda di quella della medicina umana, diagnosi corretta e trattamento delle malattie ginecologiche.

Ginecologia "Veterinario" - N. 0 1997

Oggi, un approccio competente e basato sulla scienza allevamento cani. L'alto valore riproduttivo e l'unicità di alcuni individui sono un prerequisito per un esame approfondito del sistema riproduttivo dei cani, non solo allo scopo di escludere malattie infettive, ma anche per identificare i tempi dell'ovulazione. Questo esame è particolarmente rilevante per gli animali che viaggiano per l'accoppiamento in altre regioni del paese e del mondo.

Molti allevatori comprendono la necessità di diagnosticare l'estro, tuttavia, la mancanza di informazioni, la frammentazione dei dati su questo problema e la mancanza di specialisti in alcuni casi portano alla ricezione di dati inaffidabili o alla loro interpretazione errata. Pertanto, la presenza di una grande richiesta per la diagnostica del ciclo riproduttivo nelle cagne è stata la ragione per lo sviluppo di un algoritmo per il suo studio con la derivazione di indicatori standard e la determinazione dei parametri dell'ovulazione.

Prima di tutto devi dare breve descrizione ciclo riproduttivo femminile. Il cane è un animale monociclico, la frequenza del ciclo varia dai 4 ai 12 mesi. Si distinguono le seguenti fasi: proestro, estro, metestro e anestro. L'inizio dell'estro, o proetrus, si manifesta con corrispondenti cambiamenti nell'apparato riproduttivo: c'è una crescita dei follicoli e un aumento del numero di recettori FSH in essi. Clinicamente, questa fase è caratterizzata da iperemia della mucosa vaginale, gonfiore della vulva e comparsa di perdite sanguinolente. Sotto l'influenza della follitropina insieme a vari fattori la crescita stimola lo sviluppo dei follicoli primordiali, nonché la differenziazione e la proliferazione delle cellule della granulosa. Dei tanti follicoli che iniziano a crescere, solo pochi maturano. La fase dell'estro corrisponde al calore e all'ovulazione, ed è durante questo periodo che dovrebbe essere effettuato l'accoppiamento. È difficile distinguere un confine chiaro tra le fasi, ma durante l’estro si verifica un ammorbidimento della vulva, un cambiamento nella natura delle secrezioni vaginali e la disponibilità dell’animale all’accoppiamento. Quindi, nel sito del follicolo scoppiato, si forma una cavità che viene rapidamente riempita da cellule della granulosa riempite con il pigmento giallo luteina. Lo sviluppo del corpo luteo avviene durante la fase del metestro, indipendentemente dal fatto che sia avvenuta o meno la fecondazione. Come sapete, la gravidanza nei cani dura 58-65 giorni e, dopo la sua risoluzione, inizia la fase di anestro, o riposo sessuale.

Diventa chiaro che la preparazione all'ovulazione avviene sotto l'influenza di un complesso di fattori, ruolo vitale di cui giocano gli ormoni. È noto che gli estrogeni e i gestageni regolano i processi proliferativi nella mucosa vaginale, che è costituita da un multistrato epitelio squamoso. A seconda del grado di maturità, l'epitelio vaginale può essere rappresentato da cellule parabasali, intermedie, superficiali intermedie e superficiali. Morfologicamente differiscono come segue: le cellule parabasali sono le più piccole, di forma rotonda, il nucleo occupa la maggior parte della cellula. Le cellule intermedie sono circa il doppio più grandi a causa del citoplasma, le cellule intermedie superficiali diventano più sottili e acquisiscono una forma alquanto angolare. Le cellule superficiali sono le più grandi, spesso anucleate, contenenti granuli di cheratoialina. Nella fase di anestro l'epitelio vaginale è sottile e pallido, rappresentato principalmente da cellule parabasali. Il picco ovulatorio è caratterizzato dal massimo grado di maturità dell'epitelio vaginale, cioè rilevamento di oltre il 90% delle cellule superficiali in uno striscio vaginale con la più alta percentuale di cariopicnosi (oltre l'80%) ed elevata sensibilità al colorante. Lo sviluppo del corpo luteo porta alla comparsa nello striscio di un gran numero di squame cornee, leucociti e cellule intermedie.

Nel nostro studio impostiamo i seguenti compiti:

Identificare la dinamica dei cambiamenti di estradiolo e progesterone durante il periodo di proestro ed estro e confrontarla con i risultati di un esame citologico di strisci vaginali
analizzare i dati sui tempi dell'accoppiamento e della fecondazione in relazione allo stato endocrino e al grado di maturità dell'epitelio vaginale al fine di determinare i parametri ottimali per l'accoppiamento

Lo studio ha coinvolto 22 cani di età compresa tra 1,5 e 7 anni periodi diversi proestro ed estro. È stata determinata la concentrazione di progesterone ed estradiolo nel siero del sangue metodo di dosaggio immunoenzimatico utilizzando un analizzatore a scansione verticale e speciali kit diagnostici sulla base del laboratorio clinico e biochimico dell'Università medica statale di San Pietroburgo. Gli strisci sono stati prelevati con sterili tamponi di cotone dalla volta vaginale laterale, i preparati sono stati fissati con uno speciale colorante May-Grunwald e controcolorati con colorante Romanovsky-Giemsa. Negli strisci è stata calcolata la percentuale di cellule parabasali, intermedie, superficiali-intermedie e superficiali su 100 cellule.

Analizzando i risultati ottenuti, abbiamo individuato modello generale cambiamenti nella dinamica ormonale per tutti gli animali studiati e identificato le seguenti fasi del proestro:

1. Fase di riposo relativo. Continua dall'inizio dello svuotamento per 5-15 giorni. Nonostante i pronunciati cambiamenti nello stato dei genitali esterni, il livello di progesterone ed estradiolo è ad un livello relativamente basso, non superiore valori standard stadi corrispondenti dell'anestro Si ritiene che durante questo periodo venga stimolato lo sviluppo dei follicoli primordiali e le cellule della granulosa proliferino sotto l'influenza dell'FSH.
2. La fase dell'inizio della crescita dell'estradiolo. Entro 2 - 3 giorni dalla prima fase si rileva un leggero aumento della concentrazione di estradiolo. Durante questo periodo, i follicoli continuano a maturare e sintetizzano una quantità sufficiente di estrogeni, che a loro volta stimolano il rilascio dell'ormone luteinizzante.
3. La fase dell'inizio della crescita del progesterone Sotto l'influenza della luteotropina, la steroidogenesi nei follicoli passa alla produzione di progesterone. In futuro, l'aumento del progesterone continuerà, aggirando l'ovulazione, fino allo stadio del metestro. Tuttavia, spicca un’altra fase:
4. Fase di picco dell'estradiolo. La durata di questa fase è di 1 - 3 giorni. Un forte rilascio di estrogeni è causato dalla morte elevato numero follicoli che non hanno raggiunto la maturità finale con rilascio di grandi quantità di liquido follicolare. Le concentrazioni massime di estradiolo, determinate nel sangue, portano ad un potente rilascio di GnRH da parte dell'ipotalamo e di conseguenza alla secrezione di ormoni gonadotropi, in particolare LH. Il rilascio preovulatorio di luteotropina favorisce un ulteriore aumento dei livelli di progesterone. Quest'ultimo, insieme a FSH e LH, induce la sintesi di enzimi proteolitici nelle ovaie e un complesso di fattori (peptide natriuretico, angiotensina II, prolattina, neuropeptide Y, vasopressina, bradichinina) aumenta pressione idrostatica nella cavità follicolare.

Pertanto, sotto l'influenza dei motivi di cui sopra, la parete follicolare si rompe e si verifica l'ovulazione. Secondo diversi ricercatori l'ovulazione corrisponde ad una concentrazione di progesterone compresa tra 35 e 55 nmol/l. Nei nostri studi abbiamo scoperto che quando il progesterone aumentava a 32 - 43 nmol/l, abbastanza calo drastico livello di estradiolo.

I risultati della ricerca sono presentati nella tabella.

DINAMICA DEI CAMBIAMENTI NELLA CONCENTRAZIONE DI PROGESTERONE ED ESTRADIOLO DURANTE LE FASI DEL PROESTRO E DELL'ESTRO NELLE Cagne

Fasi del ciclo riproduttivo	Proestro				Estro
	1 fase	2 fase	3 fasi	4 fase
Durata, giorni	11,2+0,87	2,4±0,14	2,6±0,17	2,2±0,1119	3,2±0,16
Concentrazione di progesterone, nmol/l	1,36+0,08	1,89±0,11	6,76±0,19	20,47±1,43	39,54+1,72
Concentrazione
estradiolo, pmol/l	230,56±8,4	478,32+18,6	583,24+12,3	1169,07+71,4	634,93+32,8

Va notato che esiste una chiara relazione tra lo stato ormonale durante uno specifico periodo di svuotamento e il quadro citologico degli strisci vaginali. Pertanto, sono stati caratterizzati gli strisci prelevati nella prima fase del proestro grande quantità eritrociti, l'epitelio era rappresentato principalmente da cellule parabasali (67,4+4,3%) e intermedie (30,5+2,8%). Le cellule intermedie superficiali erano rare (3,1+0,4%). Nella seconda fase, il rapporto delle cellule è leggermente cambiato: il contenuto di cellule intermedie è aumentato al 47,3+3,7% e di cellule intermedie superficiali al 15,6±2,1%, mentre la percentuale di cellule parabasali è scesa al 37,1+1,2%. Un'ulteriore estrogenizzazione porta alla proliferazione dell'epitelio vaginale, come evidenziato da un cambiamento del profilo citologico allo stadio 3 del proestro verso un aumento della percentuale di cellule intermedie superficiali (32,4±2,0%) e la comparsa di singole cellule superficiali (4,1± 0,32%) . La proporzione delle cellule intermedie è scesa al 42,0+2,6% e quella delle cellule parabasali al 21,5+1,8%. Nella fase 4 si sono verificati cambiamenti citologici piuttosto drammatici: le concentrazioni di picco di estradiolo hanno portato ad un aumento significativo delle cellule più mature. Percentuale di superficie cellule epiteliali durante questo periodo era di circa 76,3+4,9%, molti dei quali erano privi di nuclei. La proporzione di superfici intermedie e intermedi era rispettivamente di 20,4±1,6% e 3,3+0,3%. Va notato che molte cellule hanno cambiato la loro sensibilità al colorante, diventando zosinofile. Infine, durante l'estro, quasi tutte le cellule epiteliali vaginali nello striscio erano superficiali (91,3+ 3,2%), la maggior parte di esse era priva di nucleo. E solo l'8,7+0,34% erano cellule intermedie superficiali.

Abbiamo esaminato 17 cagne da identificare giornata ottimale accoppiamento. Preliminarmente esclusa la presenza infezioni nascoste mediante metodo diagnostico PCR. Durante il periodo di svuotamento, in ciascun individuo sono stati determinati i livelli di progesterone ed estradiolo, nonché un esame citologico di strisci vaginali. Si consiglia di pianificare l'accoppiamento con un livello di progesterone di 30-35 nmol/l e di nuovo dopo 48 ore. Il tasso di fecondazione era del 100%.

La concentrazione di progesterone è un criterio chiave per determinare il momento dell'ovulazione, ma la determinazione dei livelli di estradiolo e l'esame citologico degli strisci vaginali forniscono preziosi dati chiarificatori. Quando effettui la prima visita durante la gravidanza, ti consigliamo di eseguire il primo test nei giorni 3-5 del proestro. A basse concentrazioni ormoni sessuali e l'assenza di alterazioni proliferative nell'epitelio vaginale, è necessario ripetere i test dopo 3-4 giorni. Va notato che quando il progesterone inizia ad aumentare, è possibile prevedere la dinamica dei suoi cambiamenti effettuando almeno due studi con un intervallo di 48 ore. Secondo le nostre ricerche, in media, il livello di questo ormone nel sangue aumenta di 6,52 nmol/l al giorno, ma è necessario attenersi a orari individuali. Raccomandiamo di utilizzare i dati che abbiamo ottenuto per il lavoro pratico. specialisti veterinari e conduttori di cani.

Vasilieva S.V., Vasiliev R.M.
Accademia statale di medicina veterinaria di San Pietroburgo

Progesteroneè un ormone sessuale femminile. Il suo il compito principale– mantenimento della gravidanza nei cani.

In quali casi vengono prescritti i test del livello di progesterone?

• valutazione degli aspetti della funzionalità ovarica nelle cagne e nei gatti;
• determinare il tempo dell'ovulazione per determinare il tempo dell'accoppiamento (nelle cagne);
• prevedere la data di nascita;
• conferma della presenza di tessuto ovarico residuo;
• valutazione della funzione corpo luteo in caso di aborto;
• rilevamento dell'estro asintomatico;
• identificare la presenza di cisti luteiniche, ecc.

Nella pratica veterinaria, i livelli di progesterone vengono spesso testati per determinare il momento ottimale dell'accoppiamento. Ciò è estremamente importante nel caso dell'inseminazione artificiale con seme congelato o refrigerato, o quando il maschio si trova a lunga distanza ed è necessario conoscere la data esatta dell'accoppiamento per portare la femmina o il maschio.

Come preparare un animale per la ricerca?

Non è necessaria una preparazione speciale. Il prelievo di sangue viene solitamente effettuato al mattino a stomaco vuoto. La condizione principale è che l'animale non assuma farmaci che influiscono sui livelli di progesterone.

Quando dovrebbe essere effettuato lo studio?

I livelli di progesterone possono essere testati ogni 2-3 giorni, a partire da 3-5 giorni dopo l'inizio dell'estro. Di solito l'analisi è pronta entro 24 ore. Il tempo medio di analisi è fino a 4 ore.

Quale metodo viene utilizzato per condurre la ricerca?

Lo studio viene condotto utilizzando il metodo dosaggio immunoenzimatico(ELISA).

Questo metodo quantitativo determinazione del livello di progesterone nel siero del sangue. Lo studio è condotto in condizioni di laboratorio utilizzando l'apposito dispositivo di analisi immunoenzimatica utilizzando reagenti speciali.

Il principio di determinazione del progesterone si basa sull'uso di un metodo ELISA competitivo. I topi topi vengono immobilizzati sulla superficie interna dei pozzetti della piastra. anticorpi monoclonali al progesterone. Il progesterone del campione in esame compete con il progesterone coniugato per il legame con gli anticorpi sulla superficie del pozzetto. Il risultato è un “sandwich” legato alla plastica contenente perossidasi. Durante l'incubazione con una soluzione di substrato di tetrametilbenzidina, le soluzioni nei pozzetti si colorano. L'intensità del colore, determinata sull'analizzatore, è inversamente proporzionale alla concentrazione di progesterone nel campione da analizzare.

Come interpretare i risultati dell'analisi?

Il valore quantitativo del progesterone nel sangue è determinato nei periodi pre e postvulatorio. Livello di progesterone sierico come cani diversi, e nello stesso individuo (da ciclo a ciclo) possono cambiare abbastanza rapidamente.

I dati medi sono presentati in tavolo.

I risultati possono variare da laboratorio a laboratorio. Ciò dipende dalle impostazioni dell'apparecchio e dei reagenti. L'interpretazione accurata dei risultati deve essere effettuata da veterinario con qualifiche ed esperienza lavorativa adeguate.

Tempi ottimali di accoppiamento:

Quando il livello di progesterone raggiunge 15,9 nmol/l (5 ng/ml), l'accoppiamento avviene dopo 24-48 ore.

L'inseminazione artificiale con sperma refrigerato viene effettuata 4 giorni dopo che il livello di progesterone ha raggiunto 7,95 nmol/l (2,5 ng/ml) o 48 ore dopo il livello di 15,9 nmol/l (5 ng/ml).

L'inseminazione artificiale con seme congelato viene eseguita 5 giorni dopo il limite di 7,95 nmol/l (2,5 ng/ml) o 72 ore dopo il limite di 15,9 nmol/l (5 ng/ml).

Qual è il vantaggio di questa ricerca?

Determinare i tempi dell'ovulazione consente di aumentare non solo la percentuale di accoppiamenti riusciti o inseminazione artificiale, ma anche la fertilità. UN metodi aggiuntivi studi basati sull'uso di strisci vaginali e vaginali, insieme alla determinazione del contenuto quantitativo di progesterone nel siero del sangue, consentono un controllo più accurato dell'estro e un aumento del numero di fecondazioni, della fertilità e una diminuzione del numero di viaggi inutili in caso di accoppiamento fallito eccetera.

Con l'avvento delle nuove attrezzature nella nostra filiale di Vitebsk, ora puoi determinare il livello di progesterone (e non solo) in soli 15 minuti!

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