Analisi Ifa. Test immunoenzimatico (EIA)

L'elenco dei metodi diagnostici disponibili si è ampliato rapidamente negli ultimi decenni. I diagnostici stanno cercando di combinare i vantaggi di tutte le analisi precedenti in nuovi metodi, eliminando tutti i precedenti svantaggi.

Recentemente, l'elenco delle procedure diagnostiche include sempre più un test immunoassorbente legato a un enzima, un test moderno e abbastanza nuovo, poco conosciuto dalla persona media non coinvolta nella medicina. Tuttavia, questa tecnica sta rapidamente guadagnando terreno tra il personale medico qualificato. Puoi provare a capire cos'è e in quali casi dovrebbe essere utilizzato familiarizzando con le sue caratteristiche e caratteristiche principali.

Il dosaggio immunoenzimatico è una tecnica strumentale di laboratorio basata sulla reazione molecolare “antigene-anticorpo”, che consente la rilevazione di proteine ​​specifiche in materiali biologici (campioni per la ricerca). Tali proteine ​​possono essere enzimi, vari microrganismi (virus, batteri, funghi), protozoi, ecc.

Dopo la scoperta del metodo, gli è stato dato il nome di test ELISA, che non ha nulla a che fare con il nome degli scopritori, ma è un'abbreviazione del nome completo in inglese - saggio immunoassorbente legato a un enzima. I medici di tutto il mondo usano questo nome; anche alcuni medici nei paesi di lingua russa chiamano così questo tipo di ricerca.

Il principio fondamentale del metodo è la reazione molecolare “antigene-anticorpo”.

Un antigene è qualsiasi molecola estranea che entra nel corpo umano come parte del microbo che causa la malattia. Gli antigeni sono solitamente molecole proteiche. Oltre ai microrganismi, un tale "estraneo" può essere globuli estranei che non corrispondono al gruppo o al fattore Rh.

In risposta all'ingresso di un tale antigene nel corpo, viene lanciata una reazione immunitaria, che mira a proteggere da eventuali molecole estranee. Ciò si verifica a causa della sintesi di agenti speciali del sistema immunitario: anticorpi (immunoglobuline). Ogni anticorpo è adatto solo per un antigene specifico e neutralizza lo “straniero” patogeno legandosi ad esso in un unico complesso. È il processo di tale legame che è chiamato reazione “antigene-anticorpo”.

Tipi di anticorpi

Tutti gli anticorpi (immunoglobuline) sono divisi in 5 tipi a seconda dello stadio della risposta immunitaria in cui compaiono:

Per la diagnostica ELISA, i livelli delle immunoglobuline IgG, IgM e IgA sono spesso importanti. In base ai loro titoli, puoi scoprire se una persona ha già avuto la malattia o se è stata infettata di recente, se ha sviluppato l'immunità o se il suo corpo è indifeso contro la patologia.

Vantaggi e svantaggi del dosaggio immunoenzimatico

Al momento, l'ELISA è uno dei metodi più accurati e sensibili. È stato adottato da specialisti in vari campi della medicina e continua ad espandere il suo campo di applicazione.

Vantaggi del metodo

• Elevata precisione dei dati ottenuti.
• Sensibilità (consente di rilevare la sostanza richiesta anche con una presenza minima dell'agente patogeno nel campione).
• Possibilità di diagnosi nei primi giorni di malattia o nel periodo di incubazione.
• Velocità di acquisizione dei dati rispetto ad altri metodi di simile precisione.
• Elevata automazione del processo e minima partecipazione umana, che riduce l'errore dell'esecutore.
• Ottenere dati sullo stadio del processo patologico e sull'efficacia della terapia scelta.
• Indolore e minimamente invasivo durante la raccolta del materiale.

Svantaggi del metodo

• Nella maggior parte dei casi, consente di determinare la risposta del corpo a un agente patogeno e non l'agente patogeno stesso.
• Prima del test è necessario conoscere con esattezza la malattia sospettata, poiché il test è altamente specifico.
• La probabilità di falsi indicatori è causata da problemi tecnici, assunzione di farmaci, presenza simultanea di diverse malattie croniche o disturbi metabolici nel corpo del paziente.
• L'interpretazione dei risultati dovrebbe essere eseguita solo da uno specialista altamente qualificato, poiché per interpretare i dati ottenuti è necessaria una formazione specifica e un'ampia scorta di conoscenze mediche in una determinata area.
• L'ELISA è un test abbastanza raro, quindi non viene eseguito in tutti i laboratori diagnostici.
• Il metodo è piuttosto costoso, poiché oltre ai reagenti, il laboratorio deve disporre di numerose attrezzature costose e campioni di antigeni prodotti in istituti speciali.

In quali casi viene utilizzato il test immunoenzimatico?

L'elenco completo delle indicazioni per i test immunoenzimatici è molto ampio e comprende quasi tutte le branche della medicina.

Molto spesso, l'ELISA viene utilizzato per i seguenti scopi:

• rilevamento di malattie infettive;
• diagnosi delle malattie sessualmente trasmissibili;
• determinazione dello stato immunitario o delle singole malattie autoimmuni;
• identificazione dei marcatori tumorali;
• determinazione degli ormoni

Nel caso di malattie infettive e virali la tecnica permette di individuare le seguenti patologie:

Inoltre, ELISA consente di determinare in modo rapido ed efficace lo stato dell'infarto, valutare il potenziale riproduttivo del corpo, identificare le allergie, la loro fonte, ecc.

La tecnica immunoenzimatica viene utilizzata per condurre studi clinici durante lo sviluppo di nuovi farmaci e per valutare il loro effetto sul corpo umano.

Tipi di campioni e metodi di selezione per la ricerca

Molto spesso, il materiale da testare per il test immunoenzimatico è il sangue, prelevato dalla vena antecubitale del paziente. La raccolta dei campioni viene effettuata a stomaco vuoto, principalmente al mattino. Dopo il prelievo, le cellule formate che interferiscono con la ricerca vengono separate e rimosse dal sangue, lasciando solo il siero.

Quando si diagnosticano le infezioni genito-urinarie, il materiale spesso diventa strisci dalle mucose degli organi genitali, muco dall'uretra o dalla cervice, campioni dal retto, raschiature da erosioni o ulcere nella zona inguinale e da altre parti del corpo. I tamponi possono essere prelevati sia dal cavo orale che dal rinofaringe.

A volte il test immunoenzimatico viene utilizzato nella pratica ostetrica e ginecologica durante la gravidanza per determinare lo stato del liquido amniotico. In questo caso, il liquido amniotico diventa il campione. Per fare questo, prendi una piccola quantità di liquido perforando il sacco amniotico con un lungo ago. Tutte le manipolazioni vengono eseguite con strumenti sterili per ridurre al minimo i possibili rischi.

Spesso il materiale diventa liquido cerebrospinale o sieroso. Ciò avviene con l'anestesia locale, che viene somministrata tramite iniezione.

Lo specialista inviato per lo studio dovrebbe chiarire quale tipo di materiali sono necessari per il test immunoenzimatico. Spesso vengono prelevati campioni di diversi tipi o da luoghi diversi contemporaneamente. Il medico che richiede questo tipo di esame dovrebbe anche informare il paziente sui preparativi per la donazione di biomateriale.

Preparazione per test immunoenzimatico

Per aumentare l'accuratezza dei dati ottenuti dopo il test immunoenzimatico, la preparazione per la selezione del materiale dovrebbe essere la seguente:

• 10 giorni prima dello studio, escludere antibiotici, farmaci antivirali e antimicotici;
• per un giorno è necessario escludere l'alcol, il fumo e l'assunzione di sostanze stupefacenti;
• durante lo stesso periodo è necessario evitare sforzi fisici eccessivi;
• Avvisare il prescrittore di tutti i farmaci che il paziente sta assumendo;
• Informa il tuo medico se sei incinta o sospetti di esserlo.

È meglio raccogliere i materiali del test al mattino a stomaco vuoto.

Se la diagnosi mira a determinare lo stato dei livelli ormonali, è importante assicurarsi di essere calmi il giorno prima ed evitare la tensione nervosa. Per le donne, la donazione del sangue per gli ormoni è chiaramente determinata dal periodo del ciclo mensile, che verrà discusso dal medico al momento dell'appuntamento.

2-3 giorni prima del campionamento, è necessario escludere dal menu cibi fritti e grassi e, prima del test per l'epatite, non mangiare agrumi o altri frutti e verdure arancioni o gialli.

Interpretazione dei risultati del test immunoenzimatico

Il risultato di uno studio qualitativo è solitamente indicato dai segni “+” (rilevato) o “-” (non trovato).

Sulla base della presenza o dell'assenza di alcuni gruppi di immunoglobuline, si possono trarre le seguenti conclusioni:

• JgM (-), JgG (-), JgA (-) - l'immunità alla malattia è completamente assente (il corpo non ha mai incontrato questo tipo di antigene in precedenza);
• JgM (-), JgG (+), JgA (-) - si è verificata una precedente collisione con questo antigene o con il vaccino;
• JgM (+), JgG (-/+), JgA (-/+) - processo patologico acuto (molto probabilmente primario);
• JgM (-), JgG (+/-), JgA (+/-) - processo cronico;
• JgM (+), JgG (+), JgA (+) - recidiva;
• JgM (-) - fase di recupero.

I valori quantitativi comportano un grande carico di informazioni, ma solo il medico curante può interpretarli, sulla base delle indicazioni precedenti, dell'età del paziente e delle norme per ciascuna malattia specifica. È per questo motivo che non puoi valutare tu stesso i risultati.

Quanto tempo è necessario attendere per i risultati?

Questa tecnica ha molte varietà, a seconda della quale viene determinato il periodo per ottenere i dati in mano. La durata media della diagnostica ELISA è di 4-6 ore, il che consente di fornire i risultati il ​​giorno successivo.

I metodi più lunghi richiedono fino a 10 giorni, ad esempio, in caso di infezione da HIV.

In caso di necessità urgente è possibile utilizzare metodi espressi, in cui si ottiene la risposta entro 1-2 ore.

Dove posso ottenere il test ELISA?

Poiché le apparecchiature per questo tipo di diagnostica sono piuttosto costose, non tutti i laboratori possono acquistarle. Inoltre, i test contenenti antigeni specifici hanno una durata di conservazione limitata (solitamente circa 1 anno) e quindi richiedono un aggiornamento costante.

Per questi motivi, le istituzioni mediche pubbliche non sempre dispongono di laboratori ELISA. Molto spesso è necessario contattare grandi centri medici privati ​​o grandi centri diagnostici.

Per condurre un test ELISA, il laboratorio deve disporre di una licenza speciale e il personale e gli assistenti di laboratorio devono seguire una formazione specifica.

Molto spesso, il medico raccomanda un centro diagnostico o un laboratorio specifico che indirizza il paziente per l'esame.

Costo del test immunoenzimatico

Il prezzo per questo studio dipende dalla regione del paese e dal livello della clinica che fornisce il servizio. A Mosca, il prezzo minimo per determinare un antigene parte da 700 rubli. Se è necessario identificare più immunoglobuline contemporaneamente, il prezzo verrà sommato.

In caso di analisi urgenti il ​​costo aumenta di 150-200 rubli. per ciascun antigene.

Nonostante il costo piuttosto elevato, il test immunoenzimatico consente di rendere l’esame del paziente il più informativo e veloce possibile, riducendo il tempo prima dell’inizio del trattamento e consentendo una più rapida stabilizzazione delle condizioni della persona.

Questo video presenta il film “Nozioni di base sul dosaggio immunoenzimatico”.

Di tanto in tanto i medici prescrivono i test ELISA; non tutti sanno di cosa si tratta. ELISA ha la seguente decodifica: dosaggio immunoenzimatico del sangue. Un simile esame del sangue aiuta a capire come il corpo combatte le malattie infettive e dimostra la fase della malattia. Il test immunoenzimatico aiuta a valutare l'attività protettiva del sangue, identificando l'immunodeficienza in patologie associate a infezioni, problemi ormonali, ecc.

L'esame del sangue ELISA funziona con materiale prelevato da una vena. Inoltre, sono disponibili per l'esame il contenuto del corpo vitreo, il liquido del midollo spinale e gli strisci dell'uretra o del canale cervicale. Per il test immunoenzimatico ELISA, il fluido che circonda il feto può essere prelevato da donne in gravidanza.

In questo caso, il sangue può essere analizzato direttamente per l'ELISA utilizzando diverse tecniche. C'è concorrenza diretta, indiretta e blocco. Quando il corpo viene infettato da un agente patogeno, chiamato antigene, il sistema immunitario inizia a produrre anticorpi specifici, ad esempio contro l'epatite. Questi anticorpi hanno lo scopo di “affrontare” agenti estranei. Cosa sono gli anticorpi? Si tratta di proteine ​​speciali che possono interagire con gli antigeni e formare complessi immunologici detti antigene-anticorpo. È per il rilevamento di questi complessi che è responsabile la diagnostica ELISA. Per rilevare un antigene, gli anticorpi vengono aggiunti al campione di sangue risultante oppure viene eseguita la procedura inversa.

Un risultato ELISA positivo si basa sulla reazione del sistema immunitario e degli enzimi. Sotto l'influenza del primo, gli agenti infettivi e gli elementi cellulari si legano, il secondo aiuta a visualizzare il risultato del primo. La reazione immunitaria prevede una combinazione di anticorpo e antigene. Come risultato di questo processo, si forma un complesso immunitario. Tutte le cellule hanno l'antigene sulla loro superficie. La cellula immunitaria cattura quella sospetta e l'antigene, che si fissa sulla superficie, viene sottoposto a una procedura di confronto con le informazioni che vengono “caricate” nella memoria. Se c'è una corrispondenza nella descrizione, la cellula ritorna a casa, ma in caso contrario si verifica una connessione, la cui creazione è responsabile dell'anticorpo che si attacca alla superficie.

La reazione enzimatica, nel frattempo, consente alle sostanze di trasformarsi in nuove. Il materiale è esposto a un enzima. In questo caso la differenza enzimatica è assicurata da substrati diversi. Il prodotto risultante da questa reazione viene inviato per la determinazione della quantità di agente patogeno, la cui determinazione si basa sulla densità del colore della soluzione.

Caratteristiche del metodo

Un esame del sangue immunoenzimatico viene prescritto quando è necessario diagnosticare allergie e malattie di origine virale. Esiste anche un test ELISA per la sifilide e una serie di altre infezioni che vengono trasmesse attraverso contatti sessuali non protetti. Questa diagnosi sta diventando sempre più popolare rispetto alla PCR. Il fatto è che la PCR implica lavorare con strisci. A differenza della PCR, i risultati ELISA possono essere ottenuti da esami del sangue.

Inoltre, è possibile prescrivere un esame del sangue con il metodo ELISA quando è necessario stabilire la presenza di immunodeficienza, diagnosticare l'oncologia, valutare l'efficacia del trattamento, determinare i livelli ormonali e sottoporsi ad un esame preoperatorio nel suo insieme.

Se confronti gli studi ELISA, ad esempio, con la PCR, puoi trovare una serie di vantaggi. La cosa principale è la possibilità di una diagnosi completa anche nelle prime fasi di sviluppo. Inoltre, i risultati ELISA aiutano a determinare lo stadio specifico della malattia e il livello del suo sviluppo.

Il test ELISA è più efficace del test PCR inoltre può essere eseguito durante la gravidanza per rilevare le malattie sessualmente trasmissibili; Chiunque abbia effettuato questo test può scoprire la concentrazione di TSH nel siero del sangue. Questo è molto importante per verificare quale sia la reazione della ghiandola tiroidea, se ci sono malfunzionamenti nel suo funzionamento.

Ulteriori vantaggi della reazione a catena della polimerasi sono però la velocità dello studio, il che significa risultati rapidi. I medici apprezzano anche l'accuratezza dei risultati. Se parliamo di malattie sessualmente trasmissibili, il livello raggiunge il 98%, così come la concentrazione di TSH.

Naturalmente, ci sono alcuni inconvenienti. Tuttavia, in questo caso stiamo parlando di caratteristiche indirette del test. In particolare, stiamo parlando del fatto che è impossibile escludere possibili errori nella determinazione degli standard. A volte un test effettuato da una ragazza assolutamente sana può mostrare un risultato falso positivo o un risultato negativo nel caso opposto. Tuttavia, la classificazione dei metodi di ricerca psicologica nella maggior parte dei casi associa tali carenze a una preparazione impropria o alla violazione della tecnica con cui è stato raccolto il materiale.

Funzionalità di esecuzione

Per l'analisi ELISA, nella maggior parte dei casi, viene donato il sangue. Prima di donare il sangue, è importante digiunare per almeno otto ore ed evitare di assumere numerosi farmaci che influenzano il risultato del test. Stiamo parlando di antistaminici e farmaci ormonali che influenzano il funzionamento della ghiandola tiroidea. Inoltre, l'alcol dovrebbe essere escluso per almeno 24 ore. Assicurati di non fumare almeno un'ora prima di donare il sangue. La distorsione del risultato è possibile anche durante l'assunzione di sostanze stupefacenti.

Prima di passare alla trascrizione, vale la pena menzionare quali metodi di misurazione vengono utilizzati per tale test. Il risultato del test indicherà anticorpi o immunoglobuline Ig. Intendono le proteine ​​molto specifiche discusse in precedenza. I linfociti B sono responsabili della loro produzione non appena virus, batteri o funghi entrano nel corpo. Esistono cinque tipi di immunoglobuline, designate dall'alfabeto latino.

Le loro differenze sono associate a diverse forme e masse molecolari. Hanno emivite diverse e sono coinvolti o meno nei processi infettivi in ​​modi diversi. Varia anche l’arco temporale entro il quale possono essere rilevati dal momento in cui si manifesta l’infezione.

Se classifichi le immunoglobuline utilizzando il peso molecolare come base, allora le IgM hanno gli indicatori più alti. Una caratteristica di questo tipo di immunoglobuline è l'incapacità di passare attraverso la barriera placentare. Se nel test in un neonato vengono rilevate IgM, stiamo parlando della presenza di infezione nel feto.

La stragrande maggioranza del sangue umano contiene immunoglobuline IgG, la minima delle quali è IgE. Parlando del lavoro nell'ambito dei processi infettivi, si dovrebbe prestare particolare attenzione alle opzioni A, M, G. Le IgE agiscono come marcatore di una reazione allergica. Le IgD si trovano solo nei tessuti dei linfonodi e delle tonsille. Questo è importante dal punto di vista della creazione dell'immunità locale.

Inoltre, l'analisi determina gli antigeni. Per loro si intendono sostanze ad alto peso molecolare, note per la loro origine organica. In particolare, stiamo parlando di agenti patogeni di malattie infettive e di altre malattie dello spettro. Inoltre, intendiamo anche sostanze che segnalano vari cambiamenti cellulari che sono inevitabili in numerose malattie. È anche indicato un immunocomplesso, che dimostra un complesso antigene-anticorpo che prende parte al processo immunitario.

Tipicamente i tempi di produzione dipendono dallo specifico laboratorio contattato. Alcuni laboratori sono in grado di fornire i risultati entro un giorno o due, altri impiegano una settimana. I ritardi possono essere dovuti alla necessità di accumulare una certa quantità di siero.

Impatto sui risultati e interpretazione

Nonostante il fatto che l'ELISA sia considerato uno dei metodi di test più accurati, si verificano ancora degli errori. La procedura di prelievo del materiale, il trasporto e lo stoccaggio impropri del materiale possono influenzare la correttezza dei risultati. L'assunzione di farmaci, come accennato in precedenza, segnala la presenza di malattie nascoste. Anche i disturbi metabolici o l'immunodeficienza non ti permetteranno di ottenere gli indicatori corretti. Durante il periodo di vita fino a un anno, i neonati possono anche avere indicatori imprecisi. Ciò è dovuto al fatto che nel corpo sono presenti anticorpi materni.

Parlando di decodifica, i moduli di analisi utilizzano un segno positivo o negativo per indicare i risultati del calcolo per ciascuna classe di immunoglobuline. Le seguenti sono opzioni probabili.

L'assenza di IgG, IgA e IgM rilevate indica un recupero completo. Un risultato negativo per componenti come IgM, IgA, IgG significa una mancanza di immunità alle infezioni.

La combinazione di un risultato positivo e negativo per IgG, IgA in combinazione con IgM positiva indica la presenza di un'infezione acuta nel corpo. Un risultato IgG positivo combinato con indicatori negativi per IgA e IgM corrisponde al periodo post-vaccinazione o all'acquisizione dell'immunità a seguito di un'infezione.

La combinazione di un risultato positivo o negativo per IgG, IgA e un risultato negativo per IgM indica la presenza di un'infezione nel suo decorso cronico. Un risultato positivo per tre componenti: IgG, IgM, IgA indica una esacerbazione di un'infezione che era in forma cronica. Oltre a chiarire direttamente le classi di anticorpi, nell'ambito della decifrazione dell'analisi ELISA, il medico riceve informazioni sui loro indicatori quantitativi. È importante sottolineare che il medico curante dovrebbe essere responsabile della decodificazione. Il fatto è che la combinazione di alcuni componenti può portarlo a pensare di aver ricevuto un risultato falso, il che lo porterà a ripetere il test. La decrittazione indipendente in questo caso è inutile.

L'analisi ELISA (saggio immunoassorbente legato all'enzima) è una moderna procedura diagnostica volta a identificare anticorpi specifici nel sangue contro i patogeni di una serie di malattie, determinando lo stadio di sviluppo della patologia e la sua eziologia. Viene utilizzato come metodo per monitorare il processo di trattamento e la sua efficacia. Durante il processo di ricerca vengono analizzati indicatori qualitativi e quantitativi.

Il metodo ELISA è altamente informativo; l'accuratezza dei risultati è superiore al 96%. La diagnostica è disponibile in quasi tutti i laboratori e le istituzioni mediche.

Principali indicazioni

Viene prescritto un test immunoenzimatico per confermare la presenza di malattie infettive a trasmissione sessuale:

• tricomoniasi;
• clamidia;
• ureaplasmosi;
• sifilide, ecc.

L'ELISA viene utilizzato anche per diagnosticare le malattie virali:

• herpes;
• herpes di tipo 4 (virus Epstein-Barr);
• Epatite virale;
• infezione da citomegalovirus.

Come prepararsi alla ricerca

Il materiale biologico per la ricerca è il sangue. Alcuni giorni prima del test non dovresti assumere farmaci. Antibiotici, antielmintici e antivirali vengono sospesi entro 14 giorni.

Il materiale viene raccolto al mattino a stomaco vuoto. Un'ora prima della procedura è consentito bere un bicchiere di acqua naturale, è escluso l'assunzione di cibo;

Caratteristiche dell'analisi

Per condurre lo studio, il sangue venoso viene prelevato in un volume di almeno 5 ml. In alcuni casi, come biomateriale vengono utilizzati il ​​liquido cerebrospinale, il liquido amniotico o il contenuto del corpo vitreo.

Il prelievo di sangue viene effettuato utilizzando un ago per iniezione, rigorosamente a stomaco vuoto, per evitare risultati falsi positivi. Dovresti smettere di fumare e bere bevande alcoliche 12 ore prima. Quando si utilizzano sostanze stupefacenti, i risultati dell'analisi sono distorti.

Se la conclusione indica valori negativi delle immunoglobuline G, A, M, ciò indica la fase iniziale dello sviluppo del processo patologico o la sua assenza. Questo risultato viene registrato al completo recupero dopo la terapia.

Un risultato IgM e IgA negativo e un risultato IgG positivo indicano la formazione dell'immunità dopo una malattia infettiva o una vaccinazione.

Un risultato IgM positivo e un risultato IgG, IgA negativo o positivo indicano la presenza di una patologia infettiva acuta.

L'analisi ELISA viene eseguita abbastanza rapidamente, i risultati sono pronti entro un giorno dalla raccolta del materiale.

Come viene effettuato uno studio ELISA?

Meccanismo di reazione

Il test immunoassorbente enzimatico si basa sulla reazione immunitaria di un antigene con un anticorpo e l'attaccamento di un tag enzimatico agli anticorpi consente di prendere in considerazione il risultato della reazione antigene-anticorpo in base alla comparsa di attività enzimatica o a un cambiamento nel suo livello In una forma semplificata, il meccanismo di reazione può essere presentato come segue:

Calcolo dei risultati

Esecuzione del test immunoenzimatico

Per la sierodiagnosi vengono utilizzate piastre di polistirene da 96 pozzetti, sulle pareti delle cellule sulle quali è pre-adsorbito l'antigene. Il siero del test viene aggiunto alla cella della compressa. In questo caso ad esso sono attaccati anticorpi omologhi all'antigene. Gli anticorpi non attaccati vengono rimossi mediante lavaggio. Successivamente, alle cellule vengono aggiunti anticorpi contro le immunoglobuline umane (anticorpi) marcati con un enzima. Se nel siero del test erano presenti anticorpi rilevabili, in questa fase agiranno come antigeni con cui reagiranno gli anticorpi marcati. L'aggiunta di una sostanza cromogena (colorante) dopo il lavaggio permetterà di tenere conto della reazione dello sviluppo del colore nelle cellule. L'intensità del colore è proporzionale alla quantità di enzima e quindi alla quantità di anticorpi. Quando si misura la densità ottica (OD) di un liquido in una cellula e lo si confronta con un campione di controllo, la concentrazione di anticorpi viene calcolata in unità. di volume Il metodo più spesso utilizzato è quello di calcolare i risultati in unità di densità ottica. È necessario tenere presente che ciascun sistema di test ha i propri indicatori per la registrazione dei risultati e indicatori di normalità e patologia da cui si dovrebbe orientarsi durante l'interpretazione. risultati.

Quali infezioni possono essere rilevate mediante ELISA?

Principalmente nella moderna venereologia viene utilizzato per la diagnosi della sifilide (in combinazione con altre reazioni), dell'infezione da HIV, dell'epatite virale. Ha un valore limitato per la diagnosi dell'infezione da clamidia, dell'infezione da citomegalovirus e di altre infezioni erpetiche per determinare gli anticorpi in varie malattie infettive, i livelli di ormoni, autoanticorpi e vari marcatori di cancro.

Come interpretare i risultati ELISA

Lo studio della presenza e del livello di anticorpi di varie classi in alcuni casi aiuta a determinare le fasi del processo infettivo

Sfortunatamente, un vantaggio così importante dell'ELISA come la determinazione quantitativa degli anticorpi non è di grande importanza nel lavoro pratico, ad es. non consente una diagnosi accurata e non influisce sul dosaggio e sui tempi di somministrazione dei farmaci.

Qual è il ruolo del metodo ELISA nella diagnosi della sifilide

Il metodo ELISA nella diagnosi della sifilide è stato utilizzato per la prima volta nel 1975. Attualmente è ampiamente utilizzato per la diagnosi sierologica della sifilide in Russia e viene utilizzato come test di conferma per la sifilide. Di solito viene condotto uno studio che identifica il cosiddetto anticorpi totali contro gli antigeni del Treponema pallidum (IgM e IgG), sebbene in alcuni casi sia possibile determinare solo gli anticorpi “precoci” della classe M ELISA per la sifilide diventa positivo dopo 3 settimane dal momento dell'infezione e rimane positivo per un bel po' molto tempo anche dopo il trattamento (a volte per tutta la vita). Pertanto, come test che conferma la cura della sifilide, l'ELISA non viene utilizzato. Nella maggior parte dei casi, viene eseguita solo una determinazione qualitativa dell'ELISA, ad es. solo un risultato positivo o negativo, sebbene sia possibile anche la determinazione quantitativa.