Показатель прогестерона высокий сука сама вяжется. Определение сроков вязки

ОПРЕДЕЛЕНИЕ СРОКОВ ВЯЗКИ У СУК

Для серьезного заводчика, который планирует вязку «на выезде» (в другом городе, а то и в другой стране), результативность вязки имеет очень большое значение. Никому не хочется, чтобы путешествие в дальние края прошло безрезультатно. Для начинающего заводчика, пусть даже нашедшего подходящего кобеля буквально по соседству, пустые хлопоты тоже радости не принесут. По статистике, 50-80% нерезультативных вязок объясняется тем, что сука была повязана не вовремя. Какие же методы, с учетом многовекового опыта и новых научных достижений, мы можем использовать для определения оптимального срока вязки?

«Пробный» кобель

Многие «бывалые» кобели неплохо разбираются в этом вопросе. Если вы со своей сукой прибыли на вязку, а опытный и обычно активный кобель не проявляет должного энтузиазма, предпочитая лишь прыгать, играть и имитировать бурную деятельность, скорее всего, щенков ждать не стоит, даже если вам удастся «уговорить» потенциальных партнеров честно выполнить свой долг. На этой «информированности» опытного производителя основан старинный способ использования для определения оптимальной даты вязки так называемого «пробного» кобеля. То есть, если такой кобель проявляет должную активность в отношении течной суки, то ее можно везти на вязку к запланированному кобелю.
Недостатки данного метода: встречаются чересчур сексуальные кобели, готовые вязать суку почти в любой день течки, а некоторые кобели, постоянно проживающие в одном доме с сукой, напротив, теряют к ней интерес. Таким образом, метод «пробного кобеля» мы можем иметь в виду, но использовать его целесообразно лишь как вспомогательный.

Хвост - это важно

Положение хвоста у суки в период течки имеет определенное значение. В самом начале течки сука заигрывает с кобелями, но при малейшей попытке кобеля запрыгнуть на нее, огрызается и поджимает хвост. К тому моменту, когда сука будет готова принять кобеля, она начнет отводить хвост в строну весьма оригинальным образом, как бы изогнув его дугой. Даже суки с купированными хвостами пытаются проделать данную процедуру.
Для того чтобы увидеть это зрелище, совершенно не обязателен «пробный» кобель. Достаточно взъерошить рукой шерсть на крупе суки или почесать круп над хвостом.
Недостаток метода: некоторые эмоциональные суки отводят хвост в сторону задолго до наступления соответствующего периода.

Считаем дни

В массовой кинологической литературе можно вычитать про метод подсчета дней. Согласно этому методу, суку следует вязать на 11-13 день от начала течки. Только вот где ж оно, начало?
Чтобы легче было следить за половым циклом вашей суки, не ленитесь записывать дату и продолжительность предыдущих течек. Так вы, по крайней мере, будете примерно представлять, когда ждать следующую течку. Как правило, интервал составляет около 6 месяцев. Однако некоторые суки текут раз в 4 месяца, а другие лишь раз в год. И даже у одной и той же суки интервал между течками может «сбиваться». Впрочем, лучше хоть какой-то контроль, чем никакого. Средняя продолжительность течки у сук 3 недели (в реальности же от 10 дней до месяца).
Вы не пропустите классическое начало течки, если внимательно последите за поведением суки. Приблизительно за пару недель до течки она начнет часто «присаживаться» на прогулке, оставляя метки для окрестных кобелей (иногда вдруг может даже «сделать лужу» дома, хотя обычно никогда так не поступает). С этого момента тщательно следим за сукой, чтобы не пропустить первый день появления кровяных выделений. Для некоторых владельцев сук это превращается в «головную боль», если их питомица чересчур чистоплотна и тщательно вылизывается. Перехитрить «чистюлю» можно так: утром, сразу после пробуждения, пока сука не успела вылизаться, проведите ватным тампоном по петле суки. Вы обязательно обнаружите на тампоне следы выделений (если таковые есть), а также их цвет (что также немаловажно).
Допустим, сегодня у суки появились выделения. Значит, сегодняшний день будет считаться первым днем течки. Начинаем отсчет.
Недостаток данного метода: в реальности сроки «охоты» (периода, в который сука подпускает кобеля - говоря научным языком, овуляции) существенно варьируются у разных сук. Овуляция у одной суки может начаться на 7-й день, а у другой на 20-й. С возрастом срок наступления овуляции обычно сдвигается на более поздний. Так что чисто математический подсчет нам не сильно поможет. Его необходимо сочетать с другими методами.

Следим за выделениями

Как уже упоминалось выше, имеет значение не только наличие у суки выделений, но и их цвет. При «классической» течке сначала выделения будут ярко-красными, затем коричневатыми и, наконец, розовыми или желтоватыми. Считается, что вязать суку нужно на следующий день или через день после появления розовых выделений.
Но это если все идет по «классическому» сценарию. Иногда последовательность «красные - коричневатые — розовые» нарушается. Например, идут-идут красные выделения, а затем просто прекращаются, без всяких промежуточный стадий.
Хуже того, у некоторых сук бывает так называемая «скрытая» течка, то есть течка вообще без каких-либо выделений. Для них данный метод вовсе неприемлем.

Тест старых заводчиков

Чтобы воспользоваться этим тестом должным образом, нужно научиться определять состояние петли (наружного полового органа суки). К началу течки петля припухает и в первые дни течки выглядит объемной. Но если вы ее потрогаете, то обнаружите, что она жесткая, т.е. в тонусе. При наступлении овуляции петля станет мягкой, податливой. А если вы пошевелите нижний край петли пальцем, сука поддернет петлю вверх (так она обычно помогает кобелю в момент проникновения).
Таким образом, суку можно считать готовой к вязке, когда:

  • выделения из петли становятся бледно-розовыми или вовсе прекращаются;
  • если провести рукой по крупу суки против шерсти, она недвусмысленно отводит хвост в сторону;
  • петля у суки становится мягкой и вялой.

Совокупность всех трех признаков говорит о том, что сука должна быть повязана в течение 48 часов.
Этим тестом с успехом пользовались и продолжают пользоваться заводчики старой закалки, хотя сейчас появились более точные научные тесты. Но в некоторых случаях, когда лаборатория и ветеринар с соответствующей квалификацией находятся «за сто верст», он остается единственно доступным.

Исследование влагалищного мазка

Поскольку, как уже говорилось, существуют различные индивидуальные особенности прохождения течки, для надежности можно сделать специальный цитологический анализ влагалищного мазка (он был изобретен в 80-е гг. прошлого века, и сейчас его делают многие ветврачи в нашем городе). Это особенно важно, если в предыдущую течку ваша сука «пропустовала», несмотря на наличие признаков готовности и вроде бы удачную вязку по всем правилам. В детали технологии анализа мы вдаваться не будем, оставив это ветеринарным специалистам. А владельцу суки следует знать, что результат анализа тем надежнее, чем ближе к срокам овуляции он сделан. Возможно, анализ придется сделать повторно через несколько дней для уточнения оптимальных сроков вязки.
Для 90% сук результат исследования влагалищного мазка достоверен, но, к сожалению, у 10% сук цитология влагалища не соответствует ожидаемой схеме. Если ваша собака входит в число этих 10%, для нее остается последнее средство.

Тест на прогестерон

Прогестерон - гормон, вырабатываемый яичниками и обеспечивающий наступление беременности у всех видов животных.
Тест на прогестерон аналогичен человеческому, поэтому может проводиться в медицинской лаборатории. (Имейте в виду, что медицинские лаборатории, как правило, не производят забор крови у животных. Взять кровь на анализ можно в ветеринарной клинике, предварительно узнав, как, когда и в каком виде его следует доставить в медицинскую лабораторию).
У суки прогестерон начинает вырабатываться еще до наступления овуляции, а к моменту овуляции его уровень существенно возрастает, что дает информацию о точном времени овуляции.
Для точности результата (что особенно важно при «скрытой» течке) исследование уровня прогестерона можно проводить каждые 2-3 дня, начиная с 3-5 дня от начала течки.
Конечно, лучше консультироваться с ветеринаром, но все же вот цифры для самостоятельного контроля:

  • Начальный уровень прогестерона — менее 3,18 нмоль /л (1,0 нг/мл);
  • Готовиться к вязке (уведомить владельца кобеля) следует при достижении уровня прогестерона 7,95 нмоль/л (2,5 нг/мл);
  • Овуляция происходит на уровне прогестерона 15,9 нмоль /л (5 нг/мл). При таком показателе вязку следует осуществить через 24-48 часов

Ну и раз уж мы заговорили о прогестероне, будем иметь в виду, что после овуляции его уровень продолжит расти в течение 2-3 недель, в конечном итоге достигнув 31,8-254,4 нмоль/л (10-80 нг/мл). Этот уровень необходим для поддержания беременности и сохраняется у собак в течение 60 дней.
За 48 часов до родов показатель прогестерона начинает падать до уровня 6,36 нмоль/л (2 нг/мл), а за 24 часа до родов падает до 3,18 нмоль/л (1нг/мл). Так можно при желании точно определить время родов и, что еще более важно, оптимальный срок для кесарева сечения (если таковое предписано по ветеринарным показаниям).
Успешной вам вязки, дорогие заводчики, и здоровых, красивых щенков!

Летиция Барлерен

Контролируя репродукцию собак, долгое время довольствовались подавлением течки у сук. Развитие чистокровного собаководства обусловило зарождение настоящей гинекологии собак, особенно подробно разработанной доктором Фоитбоннэ, участником последнего конгресса CNVSPA.

Консультации по поводу бесплодия у самок получили за последние годы широкое распространение и при лечении собак. В настоящее время комбинация методов радиоиммунологического определения уровня прогестерона в крови (что теперь возможно в условиях клиники благодаря мелким kit-ам, ставшим коммерческими) и взятия влагалищных мазков позволяет точно установить оптимальный момент вязки и оплодотворения. Такой уровень диагностики позволяет разрешить большую часть проблем, связанных с плодовитостью производительницы. Действительно, 50-80% этих проблем - следствие неверно определенного момента вязки! Остаются случаи бесплодия, где простого отслеживания наступления овуляции недостаточно: приходится производить ряд исследований, даже превентивного характера (для возможно быстрого реагирования не дожидаясь следующего полового цикла) в течение всего периода течки и беременности. Сплэн Фонтбоннэ (ENVL* Ecole Nationale Veterinaire a"Lyon) на последнем конрессе CNVSPA в Лионе в декабре 1996 года обозначил главные черты углубленного наблюдения за сукой, ход диагностики, а также возможную терапию.

показания для углубленного наблюдения

повторное бесплодие.

Если после нескольких попыток, несмотря на проведенное классическими методами достоверное определение оптимального момента вязки, сука все же прохолостела, приходится проводить более полный цикл наблюдений за стадией созревания фолликулов, а также за возможной беременностью.

нетипичная и аномальная течка

Нетипичная течка: слишком часто повторяющаяся (иногда ежемесячно), ненормальный объем кровянистых выделений (слишком много или слишком мало); слабое привлечение кобелей; прерванная течка (наблюдается в стаях у молодых сук в момент наступления эструса у доминирующей самки; течка нормальной продолжительности возобновляется примерно через месяц).

Аномальная течка:

По продолжительности более 25 или менее 7 дней. «короткие» течки, однако, часто бывают следствием неверного определения владельцем ее первого дня; точно так же некоторые суки способны к оплодотворению и после 25-го дня своего цикла (Берте Аллеман).

По отсутствию овуляции диагносцированному в результате наблюдений за предыдущими течками.

аномалии интерэструса

В случае очень короткого промежутка между последовательными продолжительными течками следует подозревать наличие гиперэстрии по причине опухоли яичника либо фолликулярных кист. В случае слишком продолжительного интерэструса между продолжительными течками можно думать о синдроме гипогонадизма (пониженной гормональной активности половых желез), связанного с недостаточностью созревания фолликулов.

аборт и преждевременные роды

До 40-45 дня беременности потери эмбрионов или плода не всегда заметны из-за их внутриматочной резорбции: наблюдение за беременностью должно включать и серологические исследования на Herpes virus.

развертывание углубленного наблюдения

наблюдения за течкой

В период наблюдения проводят различные исследования.

Вагинальные мазки

Анализ простой, но мало дающий для прогноза. Проводят для определения (повторными, многократными пробами) скорости ороговения влагалищных клеток, что свидетельствует о действии эстрадиола, вырабатываемого фолликулами яичников. Низкий показатель кератинизации (менее 50%) в течение проэструса и даже эструса (когда самка принимает самца) или, наоборот, быстро растущий с начала проэструса и после окончания эструса - признак аномалии, требующей изучения и, возможно, гормональной коррекции.

Вагинальный мазок


Количественное определение содержания гормонов

Метод определения концентрации эстрадиола (на практике - эстрадиола 17) является оригинальным по отношению к классическим методам наблюдения за овуляцией. Применяют в стадии проэструса или в период созревания фолликулов. На графике 1 : В норме показатель концентрации эстрадиола в плазме прогрессирует в течение проэструса и достигает пика (порядка 80-120 pmol/1* по авторским и лабораторным данным) примерно за 24 часа до пика секреции лютеинзирующего гормона ЛГ (Продан Б). Затем он понемногу снижается и устанавливается на низком уровне в течение эструса. При «мелкозубчатом» характере кривой возобновляют анализы крови каждые 48 часов с 3-го дня течки.

Ход некоторых кривых указывает на аномалии созревания фолликулов, вызывающие отсутствие овуляции: быстрое увеличение секреции эстрадиола до ненормально высоких значений (более 400 pmol/l) указывает на эстрогенизацию организма. Наоборот, ненормально низкая кривая (менее 50-60 pmol/l) - признак гипоэстрогении, связанной с недостаточным созреванием фолликулов.

Эстрадиол - гормон нестойкий, сохраняется плохо. Проба крови на антикоагулянте (например, гепарине) должна быть центрифугирована в течение ближайшего получаса; плазму затем охлаждают; ее дальнейшие перемещения совершаются только в термоконтейнерах. Рекомендовано отправлять флаконы с пробами только в лаборатории, специализирующиеся на определении гормонов у собак, поскольку у них концентрация эстрадиола ниже, чем у человека, и ее трудно выявить в условиях «классической» лаборатории. Определение содержания протестерона проводят в период эструса, поскольку оно выявляет случайные аномалии овуляции. На графике 1 : При нормальном цикле уровень прогестерона, низкий в течение проэструса, увеличивается сразу после достижения ЛГ своего пика и устанавливается на высоком уровне. В течение метаэструса он очень медленно понижается (независимо от наличия "а" или отсутствия беременности "b") и достигает минимального уровня примерно на 60-й день после овуляции. Определение содержания прогестерона - классический метод наблюдения за овуляцией для определения оптимального момента вязки. В конце течки (определяется по вагинальным мазкам) делается последний анализ крови с целью проверить активность желтых тел на этой стадии. Снижение уровня прогестерона - доказательство конца овуляции или же преждевременно наступившей недостаточности функций желтых тел.

Определение содержания гормона щитовидной железы Т4 показано в случае гипертериоза, приводящего к аномалии овуляции (вероятно, через гиперлактинемию), преждевременным родам или мертворожденности.

Серология на Herpes Virus .

Исследования важно провести в течение проэструса, так как в этот период у зараженных герпесом сук может наблюдаться реактивация вируса с сероконверсией. В случае положительного результата повторный анализ необходимо сделать через 15 дней, чтобы судить о динамике развития антител.

Эхография (УЗИ) яичников.

Проводят в конце проэструса для обнаружения фолликулярных кист.

с точки зрения практика

Для проведения углубленного наблюдения необходимо взятие серии проб крови от начала проэструса. Плазму охлаждают и отсылают в лабораторию только, если сука не забеременеет в течение месяца: таким образом избегают ожидания новой течки и необходимости исследования новых случайных проблем. Схема, рекомендованная доктором Фонтбонном:

Проэструс: пробы крови взятые на 3,5,7,9 и 11-й дни, охладить и подготовить пробы 7 или 9 для серологии на Herpes virus.

Эструс: подготовить несколько проб на прогестерон.

Конец течки: взятие пробы крови.

наблюдение за беременностью

Оно необходимо, так как беременные самки могут и не довести ее до естественного конца.

Определение уровня прогестерона

1-2 пробы в неделю в течении первого месяца беременности позволят выявить недостаточность желтых тел, приводящую к резорбции плодов или к аборту, и обеспечить своевременное лечение.

УЗИ брюшной полости

Проводят на 18-20-й день беременности и повторяют еженедельно для выявления различных патологий: гибель помета без клинических признаков, аномальне размеры плода и плодовых оболочек, гладулокистозная гиперплазия и др.

Кистоз яичников


Серологические исследования

В случае резорбции плодов или аборта следует проверить наличие инфекции как возможной причины (Herpes virus, Brucella).

Примечание: Во время эструса и беременности при наличии подозрительных влагалищных выделений проводят бактериологический анализ мазков с шейки матки.

лечение

гормональная терапия

Недостаточное созревание фолликулов (гипоэстрогения) является следствием нарушенного действия гипофизарного фолликулостимулирующего гормона ФСГ (Пролан А) на развитие фолликулов. Это корректируют сывороточным гонадотропином, получаемым из крови жеребой кобылы (СЖК, Folligon nd). Внутримышечно по 30 мг/кг в сутки с начала проэструса в течение 3-7 дней - до получения 60% влагалищных мазков с признаками кератинизации.

Применяют препарат «классической» медицины - Менотропин (Humegon ND) или hMG (Inductor ND) - препарат с доминирующим действием ФСГ и остаточным ЛГ. Современная тенденция склоняется к применению хорошо очищенного ФСГ (например, Metrodin ND, еще не опробованного на собаках), поскольку у женщин чистый ФСГ дает лучшие результаты, чем смешанный. Поэтому д-р Фонтбоннэ не советует употребление аналогов релизинг-факторов гипоталамуса (Receptal ND) у сук, так как они стимулируют двойное высвобождение Проланов А и Б, что препятствует созреванию фолликулов. Во время такого лечения нет необходимости стимулировать овуляцию препаратом hCG, поскольку нормально созревшие фолликулы овулируют самостоятельно.

Гиперэстрогения и отсутствие овуляции, не поддающиеся классическим методам лечения

Ненормально ранняя и чрезмерно обильная секреция эстрогенов фолликулами вызывает блокаду на уровне гипоталамуса. В медицине человека (в этом случае и при ссылках на неудачно проведенное прежде лечение) применяют антиэстрогены, например Кломифен (Clomid ND). Его действие, к сожалению, еще не проверено на собаках.

Отсутствие овуляции без недостаточности фолликулов или продолжительной течки

Овуляцию стимулируют применением препаратов с действием ЛГ (Gonadotrophie chorionique Endo nd, Chomlon ND) - три внутримышечные иньекции по 50 МЕ/кг с интервалом 48 часов.

Внимание: Хорошо известно иммуносенсибилизирующее действие этого гликопротеина у женщин и кобыл! Он также способен провоцировать нарушение овуляции, блокируя пик значений эндогенного ЛГ, поэтому, без крайней необходимости, его лучше не применять.

Функциональная недостаточность желтых тел

Нарушение секреции прогестерона желтыми телами корректируется применением этого гормона:

Орально: Utrogestan nd, эффективен для сук в дозе 1-2 капсул утром и вечером до 58-го дня беременности

Внутримышечно 1-2 раза в неделю Tocogestan nd, Progest 500 nd. Так как метаболизм прогестерона различен у разных сук, рекомендован 2-недельный контроль за его уровнем.

Примечание : У некоторых сук остановка прогестеронемии делает невозможными нормальные роды и необходимо кесарево сечение. Полезно предупредить владельца!

лечение антибиотиками

Хинолоны (Entrofloxacine) считаются наиболее эффективными при микоплазмозах.

Использование антибиотиков в превентивных целях не должно быть систематическим, но должно применяться в случаях истинного бесплодия бактериального происхождения согласно показаниям антибиограммы.

хирургическое лечение

Овариоэктомия одного или обоих яичников у сук-производительниц показана при подозрении на опухоль яичника или фолликулярные кисты.

заключение

Благодаря лекарственному арсеналу, которым располагает современный ветеринар, он может реально предложить собаководству проведение исследований, не менее глубоких, чем в гуманной медицине, правильную диагностику и лечение гинекологических заболеваний.

Гинекология "Ветеринар" - № 0 1997

Сегодня выходит на первый план грамотный, научно-обоснованный подход к племенному разведению собак. Высокая племенная ценность, уникальность некоторых особей является предпосылкой к тщательному обследованию репродуктивного аппарата собак не только с целью исключения инфекционных заболеваний, но и для выявления сроков овуляции. Особенно актуально такое обследование для животных, выезжающих на вязку в другие регионы страны и мира.

Многие заводчики понимают необходимость диагностики эструса, однако, дефицит информации, разрозненность данных по этому вопросу, а также недостаток специалистов в ряде случаев приводит к получению недостоверных данных или их неправильной интерпретации. Таким образом, наличие большого спроса на диагностику полового цикла у сук явилось причиной разработки алгоритма его исследования с выведением нормативных показателей и определением параметров овуляции.

Прежде всего, необходимо дать краткую характеристику полового цикла сук. Собака является моноцикличным животным, периодичность цикла составляет от 4 до 12 месяцев. Выделяют следующие стадии: проэструс, эструс, метэструс и анэструс. Начало течки, или проэтрус, проявляется соответствующими изменениями в половом аппарате: отмечается рост фолликулов и увеличение в них количества рецепторов к ФСГ. Клинически эта стадия характеризуется гиперемией слизистой влагалища, отёчностью вульвы, появлением кровянистых выделений. Под влиянием фоллитропина совместно с различными факторами роста происходит стимуляция развития примордиальных фолликулов, а также дифференцировка и пролиферация клеток гранулёзы. Из множества начинающих рост фолликулов созревают лишь единицы. Стадия эструса соответствует половой охоте и овуляции, и именно в этот период следует проводить вязку. Чёткую границу между стадиями уловить трудно, однако во время эструса наблюдается размягчение вульвы, изменение характера вагинальных выделений, готовность животного к спариванию. Затем на месте лопнувшего фолликула образуется полость, которая быстро заполняется гранулёзными клетками, наполненными жёлтым пигментом лютеином. Развитие жёлтого тела происходит в стадию метэструса, не зависимо от того произошло оплодотворение или нет. Как известно, беременность у собак имеет продолжительность 58-65 суток, и после её разрешения начинается стадия анэструса, или полового покоя.

Становится понятным, что подготовка к овуляции протекает под воздействием комплекса факторов, важнейшую роль из которых играют гормоны. Известно, что эстрогены и гестагены регулируют пролиферативные процессы в слизистой оболочке влагалища, которая состоит из многослойного плоского эпителия. В зависимости от степени зрелости, вагинальный эпителий может быть представлен парабазальными, промежуточными, поверхностно-промежуточными и поверхностными клетками. Морфологически они различаются следующим образом: парабазальные клетки самые мелкие, округлой формы, большую часть клетки занимает ядро. Промежуточные приблизительно вдвое крупнее за счёт цитоплазмы, поверхностно-промежуточные клетки истончаются, приобретают несколько угловатую форму. Поверхностные клетки самые крупные, часто безъядерные, содержащие гранулы кератогиалина В фазе анэструса вагинальный эпителий тонкий и бледный, в основном представлен парабазальными клетками. Овуляторный пик характеризуется наибольшей степенью зрелости вагинального эпителия, т.е. выявлением в вагинальном мазке более 90 % поверхностных клеток с наивысшим процентом кариопикноза (более 80%) и большой восприимчивостью к красителю. Развитие жёлтого тела приводит к появлению в мазке большого количества роговых чешуек, лейкоцитов и промежуточных клеток.

В нашем исследовании мы поставили следующие задачи:

Выявить динамику изменения эстрадиола и прогестерона в период проэструса и эструса и сопоставить её с результатами цитологического исследования вагинальных мазков
подвергнуть анализу данные о сроках вязки и оплодотворяемости в связи с эндокринным статусом и степенью зрелости вагинального эпителия с целью определения оптимальных параметров для спаривания

Исследованию подверглись 22 собаки в возрасте от 1,5 до 7 лет в различные периоды проэструса и эструса. Концентрация прогестерона и эстрадиола в сыворотке крови определялась иммуноферментным методом с использованием анализатора вертикального сканирования и специальных диагностических наборов на базе клинико-биохимической лаборатории СПбГАВМ. Взятие мазков осуществлялось стерильными ватными палочками с бокового свода влагалища, препараты фиксировались специальным красителем Май-Грюнвальда и докрашивались красителем Романовского-Гимза. В мазках высчитывалось процентное соотношение парабазальных, промежуточных, поверхностно-промежуточных и поверхностных клеток из 100 штук.

Анализируя полученные результаты, мы выявили общую закономерность изменения динамики гормонов для всех исследованных животных и выделили следующие фазы проэструса:

1. Фаза относительного покоя. Продолжается от начала пустовки в течение 5-15 суток. Не смотря на выраженные изменения состояния наружных половых органов, уровень прогестерона и эстрадиола находится на относительно низком уровне, не превышая нормативные значения соответствующие стадии анэструса Считается, что в этот период происходит стимуляция развития примордиальных фолликулов, пролиферация клеток гранулёзы под воздействием ФСГ.
2. Фаза начала роста эстрадиола. В течение 2 - 3 суток после первой фазы обнаруживается некоторое повышение концентрации эстрадиола. В этот период фолликулы продолжают созревать и синтезируют достаточное количество эстрогенов, которые, в свою очередь стимулируют выброс лютенизирующего гормона.
3. Фаза начала роста прогестерона.. Под воздействием лютеотропина стероидогенез в фолликулах переключается на выработку прогестерона. В дальнейшем рост прогестерона будет продолжаться, минуя овуляцию, вплоть до стадии метэструса. Однако, выделяется ещё одна фаза:
4. Фаза пика эстрадиола. Продолжительность этой фазы 1 - 3 суток. Резкий выброс эстрогенов обусловлен гибелью большого числа фолликулов, не достигших окончательной зрелости с высвобождением большого количества фолликулярной жидкости. Пиковые концентрации эстрадиола, определяемые в крови, приводят к мощному выбросу гонадолиберина гипоталамусом, а следовательно - и к секреции гонадотропных гормонов, в наибольшей степени ЛГ. Предовуляторный выброс лютеотропина способствует дальнейшему росту уровня прогестерона. Последний вместе с ФСГ и ЛГ индуцирует синтез протеолитических ферментов в яичниках, а комплекс факторов (натрийуретический пептид, ангиотензин II, пролактин, нейропептид У, вазопрессин, брадикинин) увеличивают гидростатическое давление в фолликулярной полости.

Таким образом, под воздействием вышеперечисленных причин фолликулярная стенка разрывается и происходит овуляция. По данным различных исследователей, овуляции соответствует концентрация прогестерона в пределах 35 - 55 нмоль/л. В наших исследованиях мы выявили при повышении прогестерона до 32 - 43 нмоль/л довольно резкое падение уровня эстрадиола.

Результаты исследований представлены в таблице.

ДИНАМИКА ИЗМЕНЕНИЯ КОНЦЕНТРАЦИИ ПРОГЕСТЕРОНА И ЭСТРАДИОЛА В СТАДИЯХ ПРОЭСТРУСА И ЭСТРУСА У СУК

Стадии полового цикла

Проэструс

Эструс

1 фаза

2 фаза

3 фаза

4 фаза

Продолжительность, сутки

11,2+0,87

2,4±0,14

2,6±0,17

2,2±0,1119

3,2±0,16

Концентрация прогестерона, нмоль/л

1,36+0,08

1,89±0,11

6,76±0,19

20,47±1.43

39,54+1,72

Концентрация

эстрадиола, пмоль/л

230,56±8,4

478,32+18,6

583,24+12,3

1169,07+71,4

634,93+32,8

Необходимо отметить наличие чёткой взаимосвязи между гормональным статусом в конкретный период пустовки и цитологической картиной вагинальных мазков. Так, мазки, взятые в 1 фазу проэструса, характеризовались большим количеством эритроцитов, эпителий был представлен приемущественно парабазальными клетками (67,4+4,3%) и промежуточными (30,5+2,8%). Поверхностно-промежуточные клетки встречались редко (3,1+0,4 %). Во второй фазе соотношение клеток несколько менялось: увеличивалось содержание промежуточных до 47,3+3,7 % и поверхностно-промежуточных до 15,6±2,1 % на фоне снижения процента парабазальных - до 37,1+1,2 %. Дальнейшая эстрогенизация приводит к пролиферации влагалищного эпителия, о чём свидетельствует изменение цитологического профиля на 3 стадии проэструса в сторону повышения процента поверхностно-промежуточных клеток (32,4±2,0 %) и появления единичных поверхностных (4,1+0,32%). Доля промежуточных клеток уменьшалась до 42,0+2,6 % , а парабазальных - до 21,5+1,8 %. Довольно резкие цитологические изменения происходили в 4 фазе - пиковые концентрации эстрадиола приводили к значительному увеличению самых зрелых клеток. Процентное содержание поверхностных эпителиальных клеток составляло в этот период порядка 76,3+4,9 %, многие из которых были безъядерные, Доля поверхностно-промежуточных и промежуточных была 20,4±1,6 % и 3,3+0,3 % соответственно. Следует указать, что многие клетки изменяли восприимчивость к красителю, становясь зозинофильными. И, наконец, во время эструса почти все клетки вагинального эпителия в мазке были поверхностные (91,3+ 3,2%), в большей части из них ядро отсутствовало. И лишь 8,7+0,34 % составляли поверхностно-промежуточные клетки.

Мы провели обследование 17 сук для выявления оптимального дня вязки. Предварительно исключали наличие скрытых инфекций методом ПЦР-диагностики. У каждой особи во время пустовки проводилось определение уровня прогестерона и эстрадиола, а также цитологическое исследование вагинальных мазков. Мы рекомендовали планировать вязку при уровне прогестерона 30-35 нмоль/л и повторно через 48 часов. Процент оплодотворяемости составил 100%.

Концентрация прогестерона является ключевым критерием для определения сроков овуляции, но определение уровня эстрадиола и цитологическое исследование влагалищных мазков вносят ценные уточняющие данные. При первичном обращении во время пустовки рекомендуем делать первый анализ на 3-5 сутки проэструса. При низких концентрациях половых гормонов и отсутствии пролиферативных изменений вагинального эпителия повторное взятие анализов следует проводить через 3-4 суток. Необходимо отметить, что при начале роста прогестерона можно прогнозировать динамику его изменения, сделав как минимум, два исследования с интервалом 48 часов. По данным наших исследований в среднем уровень этого гормона в крови за сутки увеличивается на 6,52 нмоль/л, однако следует придерживаться индивидуальных графиков. Рекомендуем использовать полученные нами данные для практической работы ветеринарных специалистов и кинологов.

Васильева С.В., Васильев Р.М.
Санкт-Петербургская государственная академия ветеринарной медицины

Прогестерон – это женский половой гормон. Его главная задача – поддержание беременности у собак.

В каких случаях назначают исследования уровня прогестерона?

  • оценка аспектов функционирования яичника у сук и кошек;
  • определение времени овуляции для определения времени вязки (у сук);
  • предсказания даты родов;
  • подтверждение наличия остатка ткани яичника;
  • оценка функции желтого тела в случаи аборта;
  • выявление бессимптомной течки;
  • выявление наличия лютеиновых кист и др.

В ветеринарной практике чаще всего исследуются уровни прогестерона для определения оптимального времени вязки. Это крайне важно при искусственном осеменении замороженной или охлажденной спермой, или когда кобель находится на большом расстоянии и нужно точно знать дату вязки, чтобы привезти суку или кобеля.

Как подготовить животное к исследованию?

В особой подготовке необходимости нет. Забор крови производят обычно утром натощак. Основное условие — животное не должно принимать препараты, влияющие на уровень прогестерона.

В какое время необходимо проводят исследование?

Исследование уровня прогестерона можно проводить каждые 2-3 дня, начиная с 3-5 дня от начала течки. Обычно, анализ готов в течение 24-х часов. Среднее время выполнения анализа – до 4 часов.

Каким методом проводится исследование?

Исследование проводят методом иммуноферментного анализа (ИФА).

Это количественный метод определения уровня прогестерона в сыворотке крови. Исследование выполняется в лабораторных условиях с использованием соответствующего прибора иммуноферментного анализатора с применением специальных реагентов.

Принцип определения прогестерона основан на использовании конкурентного метода ИФА. На внутренней поверхности лунок планшета иммобилизованы мышиные моноклональные антитела к прогестерону. Прогестерон исследуемого образца конкурирует с конъюгированным прогестероном за связывание с антителами на поверхности лунки. В результате образуется связанный с пластиком «сэндвич», содержащий пероксидазу. Во время инкубации с раствором субстрата тетраметилбензидина происходит окрашивание растворов в лунках. Интенсивность окраски, которую определяют на анализаторе, обратно пропорциональна концентрации прогестерона в исследуемом образце.

Как интерпретировать результаты анализа?

Количественное значение прогестерона в крови определяют в до- и постовуляторный периоды. Уровень прогестерона в сыворотке крови, как у разных собак, так и у одной и той же особи (от цикла к циклу) может меняться достаточно быстро.

Средние показатели представлены в таблице .

Результаты в разных лабораториях могут отличаться. Это зависит от настроек аппарата и реагентов. Точную интерпретацию результатов должен проводить ветеринарный врач, имеющий соответствующую квалификацию и опыт работы.

Оптимальные сроки вязки:

При достижении уровня прогестерона 15,9 нмоль /л (5 нг/мл), вязка осуществляется через 24-48 часов.

Искусственное осеменение с помощью охлажденной спермы проводится через 4 дня после достижения уровня прогестерона 7,95 нмоль/л (2,5 нг/мл) или 48 часов после отметки 15,9 нмоль/л (5 нг/мл).

Искусственное осеменение с помощью замороженной спермы выполняется через 5 дней после отметки 7,95 нмоль/л (2,5 нг/мл) или 72 часа после отметки 15,9 нмоль/л (5 нг/мл)

Какая польза данного исследования?

Определения сроков овуляции позволяет увеличить не только процент удачных вязок или искусственного осеменения, но также и плодовитость. А дополнительные методы исследования, основанные на использовании влагалищных мазков и влагалища, совместно с определением количественного содержания прогестерона в сыворотке крови позволяют обеспечить более точный контроль течки и увеличение числа оплодотворений, плодовитости, уменьшение числа бесполезных поездок в случае неудачной вязки и т.д.

С появлением нового оборудования в нашем витебском филиале теперь можно определить уровень прогестерона (и не только) всего за 15 минут!

Получить более подробную информацию о проведении исследования по определению уровня прогестерона в сыворотке крови можно у врачей-репродуктологов