Введення антитоксичної сироватки. Сироватка антитоксична

АНТИТОКСИНИ(грецька anti- проти + токсини) - специфічні антитіла, що утворюються в організмі людини і тварин під дією токсинів (анатоксинів) мікробів, отрут рослин і тварин, що мають здатність нейтралізувати їх отруйні властивості.

Антитоксин є одним з факторів імунітету (див.) і виконують головну захисну роль при токсинемічних інфекціях (правцевому, дифтерії, ботулізмі, газовій гангрені, деяких стрептококових і стафілококових захворюваннях та ін).

У 1890 році Берінг і Кітасато (Е. Behring, S. Kitasato) вперше спостерігали, що сироватки тварин, які багаторазово отримували несмертельні дози дифтерійного і правцевого токсину, набували здатності знешкоджувати ці токсини (див.). У Пастерівському інституті в Парижі Ру (E. Roux) у 1894 р. була отримана перша антитоксична протидифтерійна сироватка, яку він перший ввів у широку практику. Антитоксична сироватка проти газової гангрени була отримана Вейнбергом (М. Weinberg в 1915 імунізацією тварин збільшуються дозами живої культури. Після відкриття Рамоном (G. Ramon) в 1923 анатоксинів (див.) отримання будь-яких антитоксинів не зустрічає великих труднощів.

В організмі в природних умовантитоксини утворюються в результаті перенесеної токсинемічної інфекції або внаслідок носійства токсигенних мікроорганізмів, виявляються у сироватці крові та можуть забезпечувати несприйнятливість до токсинемічних інфекцій.

Антитоксичний імунітет можна створити штучно: активною імунізацією анатоксином або введенням антитоксичної сироватки (пасивний імунітет). При первинній імунізації анатоксином швидкість утворення антитоксинів залежить від чутливості імунізованого, від дози та якості анатоксину, від інтервалів та швидкості резорбції антигену в організмі. При імунізації сорбованими або преципітованими анатоксинами, що застосовуються в наст, час, поява і накопичення антитоксинів у крові відбувається повільніше, ніж при імунізації тими ж дозами несорбованих анатоксинів, але титри антитоксинів значно вищі і виявляються більш тривалий час. Після первинної імунізації «імунологічна пам'ять» в організмі до утворення антитоксинів зберігається невизначено тривалий час, до 25 років, а можливо – і все життя. При ревакцинації вироблення антитоксинів в організмі відбувається дуже швидко. Вже на 2-й день після ревакцинації виявляються значні кількості антитоксинів, титри яких продовжують наростати наступні 10-12 днів. Швидке вироблення антитоксинів при ревакцинації має велике практичне значення у профілактиці правця та інших токсинемічних інфекцій. З метою профілактики правця новонароджених проводять імунізацію та ревакцинацію правцевим анатоксином вагітних жінок. Антитоксини, що утворюються, мають здатність проходити через плаценту в організм плода, а також передаватися новонародженому з молоком матері.

Антитоксичні сироватки отримують імунізацією коней та великого рогатої худобизростаючими дозами анатоксинів, а потім і відповідними токсинами. Утворення антитоксинів у тварин відбувається інтенсивніше у разі застосування преципітованих антигенів - 1% хлористого кальціюабо 0,5% калійно-алюмінієвих галунів. Для підвищення титру антитоксинів у коней-продуцентів застосовують різні стимулятори (див. Ад'юванти).

Радянські вчені (О. А. Комкова, К. І. Матвєєв, 1943, 1959) розробили метод отримання полівалентних протигангренозних (Cl. perfrin-gens, Cl. oedematiens, Cl. septicum) та протиботулінічних антитоксинів типів А, В, С та Е від одного продуцента. У цьому випадку кінь імунізують невеликими дозами кількох антигенів. Цей метод знайшов широке застосування у практиці виробництва полівалентних протигангренозних та протиботулінічних сироваток від одного продуцента із задовільними титрами всіх антитоксинів.

Антитоксини протидифтерійної та протиправцевої кінської сироватки в основному містяться в γ1-, γ2-, β2-фракціях глобулінів.

Антитоксини в практичної медицинизастосовуються для профілактики та лікування дифтерії, правця та ботулізму. За допомогою антитоксинів у людей можна створити пасивний імунітет такої напруженості, який захищає від захворювання у разі проникнення в організм збудника інфекції чи токсину, як це буває під час ботулізму. Дітям, які мали контакт з хворим на дифтерію, вводять антитоксини для попередження захворювання на дифтерію. При травмі неімунізованим проти правця дітям та дорослим вводять протиправцеву сироватку. При виявленні випадків захворювання на ботулізм усім особам, які вживали в їжу продукт, що викликав захворювання, вводять полівалентну протиботулінічну сироватку з метою профілактики.

Для отримання лікувальної дії дуже важливим є раннє введення антитоксину, здатного знешкоджувати токсин, що циркулює у крові. Тому ефективність серотерапії залежить значною мірою від терміну застосування антитоксинів. Результати лікування антитоксинами за різних інфекцій не однакові. При лікуванні дифтерії люди отримали хороші результати; при лікуванні правця та ботулізму найкращі результати отримані при введенні антитоксинів на початку захворювання. Ефективним є лікування стафілококового сепсису гомологічним альфа-стафілококовим антитоксином (С. В. Скуркович, 1969). При газовій гангрені лікувальна дія антитоксинів піддається сумніву, хоча багато лікарів продовжують його застосовувати.

Однак введення людям гетерологічних антитоксичних сироваток для профілактики та лікування інфекцій іноді супроводжується ускладненнями. У поодиноких випадкахпри введенні кінської сироватки у людини може розвинутись анафілактичний шок (див.), іноді з смертельним наслідком. У 5-10% випадків розвивається сироваткова хвороба (див.). Тому в СРСР та інших країнах для профілактики правця у людей замість кінської сироватки застосовують гомологічний імуноглобулін з донорської крові, що містить правцевий антитоксин. Гомологічний антитоксин рідко викликає небажані реакції і знаходиться в організмі в необхідному титрі до 30-40 днів (К. І. Матвєєв, С. В. Скуркович та співр., 1973).

Для усунення ускладнень, що спостерігаються від введення гетерологічних нативних антитоксичних сироваток, запропоновано різні способиочищення А. від баластових білків: висолення нейтральними солями, фракціонування за допомогою електродіалізу, перетравлення за допомогою ферментів. Найкращі результати були отримані методом пептичного перетравлення (І. А. Перфентьєв, 1936). Очищення антитоксичних сироваток методом протеолізу в СРСР було здійснено в Інституті епідеміології та мікробіології ім. Η. Ф. Гамалеї АМН СРСР (А. В. Бейлінсон та співробітниками, 1945). Перевагою методу протеолізу (діаферм-3) є те, що він дає в 2-4 рази більший ступінь очищення антитоксинів, ніж інші методи, але при цьому втрачається 30-50% антитоксинів. При протеолізі відбувається глибоке зміна молекули антитоксину та зменшення його анафілактогенних властивостей. Розроблено методи очищення та концентрації антитоксинів із застосуванням гідрату окису алюмінію, фільтрацією через сефадекси (молекулярні сита) та застосуванням іонного обміну. При t° 37° протягом 20 діб титр антитоксину в очищених сироватках дещо знижується, потім стабілізується та зберігається незмінним до 2 років і більше. Після ліофільного висушування під вакуумом при низьких температурахтитр антитоксину знижується на 2-25%. Висушені антитоксини зберігають свої фізичні та специфічні властивості і можуть зберігатися протягом кількох років.

Антитоксин піддаються обов'язковому контролю на нешкідливість на морських свинках і апірогенність на кроликах.

Вміст антитоксинів в антитоксичних сироватках виражається в міжнародних одиницях (ME), прийнятих Всесвітньою організацією охорони здоров'я, що відповідає мінімальній кількостісироватки, що нейтралізує стандартну одиницю токсину, виражену в мінімальних смертельних, некротичних або реактивних дозах залежно від виду тварини та токсину. Наприклад., ME протиправцевої сироваткивідповідає її мінімальній кількості, що нейтралізує приблизно 1000 мінімальних смертельних доз(Dim) стандартного токсину для морської свинки вагою 350 г; ME протиботулінічного антитоксину - найменша кількість сироватки, що нейтралізує 10 000 Dim токсину для мишей вагою 18-20 г; ME стандартної протидифтерійної сироватки відповідає її мінімальній кількості, що нейтралізує 100 Dim стандартного токсину для морської свинки вагою 250 г.

Для деяких сироваток, які не мають прийнятих міжнародних стандартів, затверджені національні стандарти, і їхня активність виражається в національних одиницях, які називаються антитоксичними одиницями (АЕ).

При титруванні антитоксинів спочатку визначають умовну (дослідну) одиницю токсину. Дослідна доза токсину позначається символом Lt (Limes tod) і встановлюється стосовно стандартної антитоксичної сироватці, що випускається Держ. НДІ стандартизації та контролю медичних біологічних препаратів ім. Л. А. Тарасевича М3 СРСР. Для визначення дослідної дози токсину до певної кількості стандартної сироватки відповідно до рівня титрування (до 1/5, 1/10 або 1/50 ME) в об'ємі 0,2 мл додають дози, що зростають або зростають, токсину в об'ємі 0,3 мл. Після витримування при кімнатній температурі протягом 45 хвилин, цю суміш вводять внутрішньовенно білим мишам в об'ємі 0,5 мл на кожну мишу. За тваринами спостерігають 4 добу. За дослідну дозу приймають ту мінімальну кількість токсину, яка у суміші з прийнятою дозою стандартної сироватки викликає загибель 50% взятих у досвід мишей.

Протиботулінічні антитоксичні сироватки типів А, В, С, Е та протигангренозні (Cl. perfringens), С титрують на рівні 1/5 ME. Досвідчена доза токсину підтитрується також до 1/5 ME стандартної сироватки. Протиботулінічна сироватка типу F та протигангренозні сироватки типів A, D, Е, а також протиправцева сироватка титруються на рівні 1/10 ME. Досвідчена доза токсину обов'язково підтитрується до 1/10 ME стандартної сироватки. Протигангренозна сироватка (Cl. oedematiens) титрується на рівні 1/50 ME. Дослідна доза токсину підтитрується до 1/50 ME стандартної сироватки. Випробувані сироватки розводять в залежності від передбачуваного титру і до різних розведень сироватки об'ємом 0,2 мл додають дослідну дозу токсину в об'ємі 0,3 мл (з розрахунку на 1 мишу), суміш залишають для з'єднання при кімнатній температурі протягом 45 хв. і вводять по 0,5 мл внутрішньовенно білим мишам. Протиправцева сироватка титрується підшкірним введенням 0,4 мл суміші задню лапкумиші. У досвід на кожну дозу беруть не менше двох мишей, суміш готують із розрахунку не менше ніж на 3 миші. При кожному титруванні сироватки обов'язково ставиться контроль активності дослідної дози токсину зі стандартною сироваткою.

Принципи титрування дифтерійного антитоксину ті ж, що й інших сироваток, тільки розведення стандартної сироватки і дослідна доза токсину спільно вводяться внутрішньошкірно-морській свинці (метод Ремера). Попередньо зі стандартною сироваткою вититрується так звана некротична доза - limes necrosis (Ln) дифтерійного токсину, що представляє собою ту найменшу кількість токсину, яке при внутрішньошкірному введенні морської свинки (обсязі 0,05 мл) в суміші з 1/50 ME стандартної протидикітерії до 4-5-го дня утворення некрозу. Титрування дифтерійного антитоксину за методом Рамона (реакція флоккуляції) проводять за допомогою токсину або анатоксину, в якому попередньо визначають вміст антигенних одиниць (АЕ) в 1 мл. Одну антигенну одиницю токсину, що позначається як поріг флоккуляції – limes flocculationis (Lf), нейтралізує одна одиниця дифтерійного антитоксину. Для титрування невеликих кількостей дифтерійного антитоксину застосовується і внутрішньошкірний метод Йенсена на кроликах.

Антитоксини широко застосовуються для профілактики та терапії токсинемічних інфекцій. Крім того, їх використовують для нейтралізації отрут змій, павуків та отрут рослинного походження.

Бібліографія:Рамон Г. Сорок років дослідницької роботи, пров. з франц., М., 1962; Резепов Ф. Ф. та ін. Визначення нешкідливості та специфічної активності імунних сироваток та глобулінів, у кн.: Методич. посібник з лаборат. оцінка якості бакт. та вірусн. препаратів, за ред. С. Г. Дзагурова, с. 235, М., 1972; Токсини-анатоксини та антитоксичні сироватки. М., 1969; Behring в. К i t а в a t о, Über das Zustandekommen der Diphterie-Immunität und der Tetanus-Immunität bei Tieren, Dtsch. med. Wschr., S. 1113, 1890; Kuhns W. J. a. Pappenheimer A. M. Immunochemical studies antitoxin виробляються в індивідуальних і алергічних окремих hyperimmunized with diphtheria toxoid, J. exp. Med., v. 95, p. 375, 1952; Miller J. F. A. P. a. o. Interaction між lymphocytes in immune responses, Cell. Immunol., v. 2, p. 469, 1971, bibliogr.; White R. G. Взаємодія з органами зв'язку в гермінальних або лімфоцитопоетичних центрах lymph nodes to production of antibody, в кн.: Mechanism. antibody formation, p. 25, Прага, 1960.

К. І. Матвєєв.

Антитоксичні гетерогенні сироватки виходять шляхом гіперімунізації різних тварин. Вони називаються гетерогенними, т.к. містять чужорідні в людини сироваткові білки. Більш переважним є застосування гомологічних антитоксичних сироваток, для отримання яких використовується сироватка перехворілих людей (корова, паротидна), або спеціально імунізованих донорів (протиправцева, протиботуліністична), сироватка з плацентарної або абортивної крові, що містять антитіл до ряду. перенесеного захворювання.

Для очищення та концентрування антитоксичних сироваток використовують методи: осадження спиртом або ацетоном на холоді, обробка ферментами, афінна хроматографія, ультрафільтрація.

Активність імунних антитоксичних сироваток виражають у антитоксичних одиницях, тобто. тим найменшим колом антитіл, яке викликає видиму або реєстровану відповідним способом реакцію з певним кількостям специфічного антигену. активність антитоксичної протиправцевої сироватки та відповідного Ig виражається в антитоксичних одиницях.

Антитоксичні сироватки застосовуються для лікування токсинемічних інфекцій (правець, ботулізм, дифтерія, газова гангрена).

Після введення антитоксичних сироваток можливі ускладнення у вигляді анафілактичного шокуі сироваткової хвороби, тому перед введенням препаратів ставлять алергічну пробу на чутливість до них пацієнта, а вводять їх дрібно, по Безрідко.

3.Збудники холери. Таксономія. Характеристики. Мікробіологічна діагностика Специфічна профілактика та лікування.

Збудник – Vibrio cholerae, серогруп О1 та О139, характеризується токсичною поразкою тонкого кишечника, Порушенням водно-сольового балансу.

Морфологічні та культуральні властивості.Вібріон має один полярно розташований джгутик. Під впливом пеніциліну утворюються L-форми. Грамнегативні, суперечка не утворюють. Факультативний анаероб. Невибагливий до живильних середовищ. Температурний оптимум 37С.

На щільних середовищах вібріони утворюють дрібні прозорі круглі S-колонії з рівними краями. На скошеному агарі утворюється жовтуватий наліт. У непрозорих R-колоніях бактерії стають стійкими до дії бактеріофагів, антибіотиків та не аглютинуються О-сироватками.

Біохімічні властивості.Активні: до кислоти зброджують глюкозу, мальтозу, сахарозу, маніт, лактозу, крохмаль. Усі вібріони поділяються на шість груп по відношенню до трьох цукрів (маннозу, сахарозу, арабінозу). Першу групу, до якої відносяться справжні збудники холери, складають вібріони, що розкладають маннозу і сахарозу і не розкладають арабіноз: розкладають білки до аміаку та індолу. H 2 S не утворюють.

Антигенна структура. Термостабільний О-антиген та термолабільний Н-антиген. Н-АГ є спільними для великої групи вібріонів.

Збудники класичної холери та холери Ель-Тор об'єднуються в серогрупу 01. Антигени серогрупи 01 включають у різних поєднаннях А-, В-і С-субодиниці. Поєднання субодиниць АВ називається сероваром Огава, поєднання АС – сероваром Інаба, поєднання ABC – Гікошима. R-форми колоній втрачають О-АГ.

резистентність.Вібріони погано переносять висушування. Довго зберігаються у водоймах, харчових продуктах. Біовар Ель-Тор більш стійкий у навколишньому середовищі, ніж класичний вібріон.

Епідеміологія.Гостра кишкова інфекціяз фекально-оральним механізмом передачі. Шлях передачі – водний, харчовий. Джерело інфекції – хвора людина або вібріоносій.

Чинники патогенності.Пили адгезії ; фермент муциназу, що розріджує слиз і забезпечує доступ до епітелію. Епітеліальні клітинивиділяють лужний секрет, який у поєднанні з жовчю є прекрасним живильним середовищем для розмноження вібріонів. Токсиноутворення вібріонів, які виробляють ендо- та екзотоксин. Екзотоксин (ентеротоксин) холероген- термолабільний білок, чутливий до протеолітичних ферментів. Холероген містить 2 субодиниці: А та В. А активізує внутрішньоклітинну аденілатциклазу, відбувається підвищення виходу рідини у просвіт кишечника. Діарея, блювання. Фермент нейрамінідазупосилює зв'язування холерного екзотоксину з епітелієм слизової оболонки кишечника. Ендотоксинзапускає каскад арахідонової кислоти, яка запускає синтез простагландинів (Е, F). Вони викликають скорочення гладкої мускулатури тонкого кишечника та пригнічують імунну відповідь, чим обумовлені діарея.

Клінічні проявиІнкубаційний період 2-3 дні. Біль у животі, блювання, діарея.

Імунітет.Гуморально-клітинний. При одужанні виникає напружений нетривалий імунітет.

Виділення та ідентифікація збудника. Матеріал для дослідження – виділення від хворих (кал, блювання), вода.

Для експрес-діагностики використовують РІФ, ПЛР. Бактеріоскопічний метод нині не використовується.

Лікування: а) регідратація (заповнення втрат рідини та електролітів введенням ізотонічних, розчинів, а також плазмозамінних рідин внутрішньовенно ; б) антибактеріальна терапія(Тетрацикліни, фторхінолони).

Профілактика.Саніт.-гіг. події. Екстрена профілактика антибіотиками широкого спектрудії, а також вакцинопрофілактика. Сучасна вакцина є комплексним препаратом, що складається з холероген-анатоксину та хімічного О-антигена, обох біоварів і сероварів Огава та Інаба. Щеплення забезпечує вироблення вібріоцидних антитіл та антитоксинів у високих титрах.

Квиток27

1.Методи культивування вірусів.

Для культивування вірусів використовують культури клітин, курячі ембріони та чутливих лабораторних тварин. Ці ж методи використовують і для культивування рикетсій та хламідій – облігатних внутрішньоклітинних бактерій, які не ростуть на штучних живильних середовищах.

Культури клітин.Культури клітин готують із тканин тварин чи людини. Культури поділяють на первинні (неперевиваються), напівперевиваються і перевиваються.

Приготування первинної культури клітинскладається з декількох послідовних етапів: подрібнення тканини, роз'єднання клітин шляхом трипсинізації, відмивання отриманої однорідної суспензії ізольованих клітин від трипсину з подальшим суспендування клітин в поживному середовищі, що забезпечує їх зростання, наприклад в середовищі 199 з додаванням телячої сироватки крові.

Культури, що перевиваютьсяна відміну від первинних, адаптовані до умов, що забезпечують їм постійне існування in vitro, і зберігаються протягом декількох десятків пасажів.

Одношарові культури клітин, що перевиваються, готують із злоякісних і нормальних ліній клітин, що володіють здатністю довго розмножуватися in vitro в певних умовах. До них відносяться злоякісні клітини HeLa, спочатку виділені з карциноми шийки матки, Нер-3 (з лімфоїдної карциноми), а також нормальні клітини амніону людини, нирок мавпи та ін.

До напівперевивається культурвідносяться диплоїдні клітини людини. Вони є клітинною системою, що зберігає в процесі 50 пасажів (до року) диплоїдний набір хромосом, типовий для соматичних клітин використовуваної тканини. Диплоїдні клітинилюдину не зазнають злоякісного переродження і цим вигідно відрізняються від пухлинних.

Про розмноження (репродукції) вірусів у культурі клітинсудять за цитопатичною дією (ЦПД), яка може бути виявлена ​​мікроскопічно та характеризується морфологічними змінами клітин.

Характер ЦПД вірусів використовують як їх виявлення (індикації), так орієнтовної ідентифікації, т. е. визначення їх видової приналежності.

Один із методівіндикації вірусів засновані на здатності поверхні клітин, в яких вони репродукуються, адсорбувати еритроцити - реакція гемадсорбції. Для її постановки в культуру клітин, заражених вірусами, додають завись еритроцитів і після деякого часу контакту клітини промивають ізотонічним розчином натрію хлориду. На поверхні уражених вірусами клітин залишаються прилиплі еритроцити.

Інший метод – реакція гемаглютинації (РГ).Застосовується для виявлення вірусів у культуральній рідині культури клітин або хоріоналантоїсної або амніотичної рідини курячого ембріона.

Кількість вірусних частинок визначають методом титрування ЦПД у культурі клітин. Для цього клітини культури заражають десятикратним розведенням вірусу. Після 6-7-денної інкубації їх переглядають наявність ЦПД. За титр вірусу приймають найбільше розведення, що викликає ЦПД у 50% заражених культур. Титр вірусу виражають кількістю цитопатичних доз.

Точнішим кількісним методом обліку окремих вірусних частинок є метод бляшок.

Деякі віруси можна виявити та ідентифікувати за включеннямиякі вони утворюють в ядрі або цитоплазмі заражених клітин.

Курячі ембріони.Курячі ембріони в порівнянні з культурами клітин значно рідше бувають контаміновані вірусами і мікоплазмами, а також мають порівняно високу життєздатність і стійкість до різних впливів.

Для отримання чистих культур рикетсій, хламідій. і ряду вірусів у діагностичних цілях, а також для приготування різноманітних препаратів (вакцини, діагностикуми) використовують 8-12-денні курячі ембріони. Про розмноження згаданих мікроорганізмів судять за морфологічними змінами, що виявляються після розтину ембріона на його оболонках.

Про репродукцію деяких вірусів, наприклад грипу, віспи, можна судити з реакції гемаглютинації (РДА) з курячими чи іншими еритроцитами.

До недоліків даного методуналежать неможливість виявлення досліджуваного мікроорганізму без попереднього розтину ембріона, а також наявність у ньому великої кількості білків та інших сполук, що ускладнюють подальше очищення рикетсій або вірусів при виготовленні різних препаратів.

лабораторні тварини.Видова чутливість тварин до певного вірусу та їх вік визначають репродуктивну здатність вірусів. У багатьох випадках лише новонароджені тварини чутливі до того чи іншого вірусу (наприклад, миші-сусунки – до вірусів Коксакі).

Перевага даного методу над іншими полягає у можливості виділення тих вірусів, які погано репродукуються у культурі чи ембріоні. До його недоліків відносяться контамінація організму піддослідних тварин сторонніми вірусами та мікоплазмами, а також необхідність подальшого зараження культури клітин для отримання чистої лінії даного вірусу, що подовжує термін дослідження.

2.Реакція зв'язування комплементу. Механізм. компоненти. Застосування.

Реакція зв'язування комплементу (РЗК)полягає в тому, що відповідно один одному антигени і антитіла утворюють імунний комплекс, до якого через Fc-фрагмент антитіл приєднується комплемент (С), тобто відбувається зв'язування комплементу комплексом антиген-антитіло. Якщо ж комплекс антиген-антитіло не утворюється, то комплемент залишається вільним.

Специфічна взаємодія АГ та AT супроводжується адсорбцією (зв'язуванням) комплементу. Оскільки процес зв'язування комплементу не проявляється візуально, Ж. Борде та О. Жангу запропонували використовувати як індикатор гемолітичну систему (еритроцити барана + гемолітична сироватка), яка показує, чи комплемент фіксований комплексом АГ-АТ. Якщо АГ та AT відповідають один одному, тобто утворився імунний комплекс, то комплемент зв'язується цим комплексом і гемолізу не відбувається. Якщо AT відповідає АГ, то комплекс не утворюється і комплемент, залишаючись вільним, з'єднується з другою системою і викликає гемоліз.

Компоненти. Реакція зв'язування комплементу відноситься до складних серологічних реакцій. Для її проведення необхідні 5 інгредієнтів, а саме: АГ, AT та комплемент (перша система), еритроцити барана та гемолітична сироватка (друга система).

Антигеномдля РЗК можуть бути культури різних вбитих мікроорганізмів, їх лізати, компоненти бактерій, патологічно змінених і нормальних органів, тканинних ліпідів, віруси та вірусовмісні матеріали.

Як комплементувикористовують свіжу чи суху сироватку морської свинки.

Механізм. РСК проводять у дві фази: 1-а фаза - інкубація суміші, що містить три компоненти антиген + антитіло + комплемент; 2-я фаза (індикаторна) - виявлення суміші вільного комплементу шляхом додавання до неї гемолітичної системи, що складається з еритроцитів барана, і гемолітичної сироватки, що містить антитіла до них. У 1-й фазі реакції при утворенні комплексу антиген-антитіло відбувається зв'язування ним комплементу, і тоді у 2-й фазі гемолізу сенсибілізованих антитілами еритроцитів не відбудеться; реакція позитивна. Якщо антиген та антитіло не відповідають один одному (у досліджуваному зразку немає антигену чи антитіла), комплемент залишається вільним і у 2-й фазі приєднається до комплексу еритроцит – антиеритроцитарне антитіло, викликаючи гемоліз; реакція негативна.

Застосування. РЗК застосовують для діагностики багатьох інфекційних хвороб, зокрема сифілісу (реакція Вассермана).

3.Збудник грипу. Таксономія. Характеристики. Лабораторна діагностика. Специфічна профілактика та лікування.

Таксономія: сімейство - Orthomyxoviridae, рід Influenzavirus. Розрізняють 3 серотипи вірусу грипу: А, В та С.

Структура вірусу грипу А.Збудник грипу має однонитчасту РНК, що складається з 8 фрагментів. Подібна сегментарність дозволяє двом вірусам при взаємодії легко обмінюватися генетичною інформацією і тим самим сприяє високій мінливості вірусу. Капсомери покладені навколо нитки РНК за спіральним типом. Вірус грипу має також суперкапсид із відростками. Вірус поліморфен: зустрічаються сферичні, паличкоподібні, ниткоподібні форми.

Антигенна структура. Внутрішні та поверхневі антигени. Внутрішні антигени складаються з РНК та білків капсиду, представлені нуклеопротеїном (NP-білком) та М-білками. NP- та М-білки – це типоспецифічні антигени. NP-білок здатний пов'язувати комплемент, тому тип вірусу грипу зазвичай визначають РСК. Поверхневі антигени - це гемаглютинін та нейрамінідаза. Їхню структуру, яка визначає підтип вірусу грипу, досліджують у РТГА, завдяки гальмування специфічними антитілами гемаглютинації вірусів. Внутрішній антиген – стимулює Т-кілери та макрофаги, не викликає антитілоутворення. У вірусу є 3 різновиди Н-і 2 різновиди N – антигенів.

Імунітет: Під час захворювання на противірусну відповідь беруть участь фактори неспецифічного захисту: функція виділення організму, сироваткові інгібітори, альфа-інтерферон, специфічні IgA в секретах респіраторного тракту, які забезпечують місцевий імунітет.

Клітинний імунітет - NK-клітини та специфічні цитотоксичні Т-лімфоцити, що діють на клітини, інфіковані вірусом. Постінфекційний імунітет досить тривалий та міцний, але високоспецифічний (типо-, підтипо-, варіантоспецифічний).

Мікробіологічна діагностика Діагноз «грип» базується на (1) виділенні та ідентифікації вірусу, (2) визначенні вірусних АГ у клітинах хворого, (3) пошуку вірусоспецифічних антитіл у сироватці хворого. При відборі матеріалу для дослідження важливо отримати уражені вірусом клітини, оскільки саме в них відбувається реплікація вірусів. Матеріал для дослідження - носоглоткове відділення. Для визначення антитіл досліджують парні сироватки хворого.

Експрес-діагностика.Виявляють вірусні антигени у досліджуваному матеріалі за допомогою РІФ (прямий та непрямий варіанти) та ІФА. Можна виявити в матеріалі геном вірусів за допомогою ПЛР .

Вірусологічний метод.Оптимальна лабораторна модель для культивування штамів-курячий ембріон. Індикацію вірусів проводять залежно від лабораторної моделі (за загибеллю, за клінічними та патоморфологічними змінами, ЦПД, утворення «бляшок», «кольоровій пробі», РДА та гемадсорбції). Ідентифікують віруси за антигенною структурою. Застосовують РСК, РТГА, ІФА , РБН (реакцію біологічної нейтралізації) вірусів та ін. Зазвичай тип вірусів грипу визначають РСК, підтип - РТГА.

Серологічний метод.Діагноз ставлять при чотириразовому збільшенні титру антитіл у сироватках парних від хворого, отриманих з інтервалом в 10 днів. Застосовують РТГА, РЗК, ІФА, РБН вірусів.

Лікування: симптоматичне/патогенетичне. А-інтерферон – пригнічує розмноження вірусів.

1. Препарати – індуктори ендогенного інтерферону.

Етіотропне лікування – ремантидин – перешкоджає репродукції вірусів, блокуючи М-білки. Арбідол – діє на віруси А та В.

2. Препарати – інгібітори нейрамінідази. Блокують вихід вірусних частинок із інфікованих клітин.

При тяжких формах – протигрипозний донорський імуноглобулін та нормальний людський імуноглобуліндля в\введення.

Профілактика : Неспецифічна профілактика– протиепідемічні заходи, препарати а-інтерферону та оксоліну.

Специфічна – вакцини. Живі алантоїсні інтраназальна та підшкірна, тривалентні інактивовані цільно-віріонні грипозні інтраназальна та парентеральна-підшкірна (Гриповак), хімічні Агриппал, полімер-субодинична «Гриппол». Живі вакцини створюють найбільш повноцінний, у тому числі місцевий імунітет

Квиток28

1.Бактеріофаги. Взаємодія фага із бактеріальною клітиною. Помірні та вірулентні бактеріофаги. Лізогенія.

Бактеріофаги- віруси бактерій, що мають здатність специфічно проникати в бактеріальні клітини, репродукуватися в них і викликати їх розчинення (лізис).

Взаємодія фага з бактеріальною клітиною. За механізмом взаємодії розрізняють вірулентні та помірні фаги.

Вірулентні фаги , Проникнувши в бактеріальну клітину, автономно репродукуються в ній і викликають лізис бактерій. Процес взаємодії вірулентного фага з бактерією протікає у вигляді кількох стадій і дуже схожий на процес взаємодії вірусів людини і тварин з клітиною господаря. Однак для фагів, що мають хвостовий відросток з чохлом, що скорочується, він має особливості. Ці фаги адсорбуються на поверхні бактеріальної клітини за допомогою фібрил хвостового відростка. В результаті активації фагового ферменту АТФази відбувається скорочення чохла хвостового відростка та впровадження стрижня у клітину. У процесі «проколювання» клітинної стінки бактерії бере участь фермент лізоцим, що знаходиться на кінці хвостового відростка. Після цього ДНК фага, що міститься в голівці, проходить через порожнину хвостового стрижня і активно впорскується в цитоплазму клітини. Інші структурні елементи фага (капсид і відросток) залишаються поза клітиною.

Після біосинтезу фагових компонентів та їх самоскладання в бактеріальній клітині накопичується до 200 нових фагових частинок. Під дією фагового лізоциму і внутрішньоклітинного осмотичного тиску відбувається руйнування клітинної стінки, вихід фагового потомства довкіллята лізис бактерії. Один літичний цикл (від моменту адсорбції фагів до виходу з клітини) триває 30-40 хв. Процес бактеріофагії проходить кілька циклів, доки не будуть лізовані всі чутливі до даного фагу бактерії.

Взаємодія фагів з бактеріальною клітиною характеризується певним ступенем специфічності. За специфічністю дії розрізняють полівалентні фаги, здатні взаємодіяти з спорідненими видами бактерій, моновалентні фаги, що взаємодіють із бактеріями певного виду, і типові фаги, що взаємодіють з окремими варіантами (типами) даного виду бактерій.

Помірні фаги лізують не всі клітини в популяції, з частиною з них вони вступають у симбіоз, внаслідок чого ДНК фага вбудовується у хромосому бактерії. У такому разі геномом фага називають профаг. Профаг, що став частиною хромосоми клітини, при її розмноженні синхронно реплікується з геном бактерії, не викликаючи її лізису, і передається у спадок від клітини до клітини необмеженому числу нащадків.

Біологічне явище симбіозу мікробної клітини з помірним фагом (профагом) називається лізогенієюа культура бактерій, що містить профаг, отримала назву лізогенної. Ця назва відображає здатність профагу мимоволі або під дією ряду фізичних та хімічних факторіввиключатися з хромосоми клітини і переходити в цитоплазму, тобто поводитися як вірулентний фаг, що лізує бактерії.

Лізогенні культури за своїми основними властивостями не відрізняються від вихідних, але вони несприйнятливі до повторного зараження гомологічним або близьким спорідненим фагом і, крім того, набувають додаткових властивостей, які знаходяться під контролем генів профагу. Зміна властивостей мікроорганізмів під впливом профагу одержала назву фагової конверсії. Остання має місце у багатьох видів мікроорганізмів і стосується різних їх властивостей: культуральних, біохімічних, токсигенних, антигенних, чутливості до антибіотиків та ін. цю частину хромосоми до іншої клітини. Якщо мікробна клітина стане лізогенною, вона набуває нових властивостей. Таким чином, помірні фаги є сильним чинником мінливості мікроорганізмів.

2.Патогенність та вірулентність бактерій. Чинники патогенності.

Фенотиповою ознакою патогенного мікроорганізмує його вірулентність, тобто. властивість штаму, що проявляється у певних умовах (при мінливості мікроорганізмів, зміні сприйнятливості макроорганізму тощо). Вірулентність можна збільшувати, знижувати, вимірювати, тобто. вона є мірою патогенності. Кількісні показники вірулентності можуть бути виражені в DLM (мінімальна летальна доза), DL« (доза, що викликає загибель 50% експериментальних тварин). При цьому враховують вид тварин, стать, масу тіла, спосіб зараження, термін загибелі.

До факторів патогенностівідносять здатність мікроорганізмів прикріплюватися до клітин (адгезія), розміщуватись на їх поверхні (колонізація), проникати у клітини (інвазія) та протистояти факторам захисту організму (агресія).

Адгезіяє пусковим механізмом інфекційного процесу. Під адгезією розуміють здатність мікроорганізму адсорбуватися на чутливих клітинах із наступною колонізацією. Структури, відповідальні за зв'язування мікроорганізму з клітиною називаються адгезинами і розташовуються на його поверхні. Адгезини дуже різноманітні за будовою та обумовлюють високу специфічність - здатність одних мікроорганізмів прикріплюватися до клітин епітелію дихальних шляхів, інших - кишечникаабо сечостатевої системиі т.д. На процес адгезії можуть впливати фізико-хімічні механізми, пов'язані з гідрофобністю мікробних клітин, сумою енергії тяжіння та відштовхування. У грамнегативних бактерій адгезія відбувається за рахунок пилок I і загального типів. У грампозитивних бактерій адгезини являють собою білки та тейхоєві кислоти клітинної стінки. В інших мікроорганізмів цю функцію виконують різні структури клітинної системи: поверхневі білки, ліпополісахариди та ін.
Інвазія.Під інвазивністю розуміють здатність бактерій проникати через слизові, шкіру, сполучно-ткані бар'єри в внутрішнє середовищеорганізму і поширяться його тканинами і органам. Проникнення мікроорганізму в клітину пов'язується з продукцією ферментів, а також з факторами, що пригнічують клітинний захист. Так фермент гіалуронідазу розщеплює гіалуронову кислоту, що входить до складу міжклітинної речовини, і, таким чином, підвищує проникність слизових оболонок і сполучної тканини. Нейрамінідаза розщеплює нейрамінову кислоту, яка входить до складу поверхневих рецепторів клітин слизових оболонок, що сприяє проникненню збудника у тканини.
Агресія.Під агресивністю розуміють здатність збудника протистояти захисним факторам макроорганізму. До факторів агресії відносяться: протеази – ферменти, що руйнують імуноглобуліни; коагулаза – фермент, що згортає плазму крові; фібринолізин - розчинний потік фібрину; лецитиназа - фермент, що діє на фосфоліпіди мембран м'язових волокон, еритроцитів та інших клітин. Патогенність може бути пов'язана з іншими ферментами мікроорганізмів, при цьому вони діють як місцево, так і генералізовано.

Важливу рольу розвитку інфекційного процесу грають токсини. за біологічним властивостямбактеріальні токсини поділяються на екзотоксини та ендотоксини.
Екзотоксинпродукують як грампозитивні, так і грамнегативні бактерії. За своєю хімічною структурою це білки. За механізмом дії екзотоксин на клітину розрізняють кілька типів: цитотоксини, мембранотоксини, функціональні блокатори, ексфоліанти та еритрогеміни. Механізм дії білкових токсинів зводиться до пошкодження життєво важливих процесів у клітині: підвищення проникності мембран, блокади синтезу білка та інших біохімічних процесів у клітині або порушення взаємодії та взаємокоординації між клітинами. Екзотоксини є сильними антигенами, які продукують утворення в організмі антитоксинів.

Екзотоксини мають високу токсичність. Під впливом формаліну та температури екзотоксини втрачають свою токсичність, але зберігають імуногенну властивість. Такі токсини дістали назву анатоксинита застосовуються для профілактики захворювання правця, гангрени, ботулізму, дифтерії, а також використовуються у вигляді антигенів для імунізації тварин з метою одержання анатоксичних сироваток.
Ендотоксиниза своєю хімічною структурою є ліпополісахаридами, які містяться в клітинній стінці грамнегативних бактерій та виділяються в навколишнє середовище при лізисі бактерій. Ендотоксини не мають специфічності, термостабільні, менш токсичні, мають слабку імуногенність. При надходженні в організм великих доз ендотоксини пригнічують фагоцитоз, гранулоцитоз, моноцитоз, збільшують проникність капілярів, руйнують дію на клітини. Мікробні ліпополісахариди руйнують лейкоцити крові, викликають дегрануляцію опасистих клітин з виділенням вазодилататорів, активують фактор Хагемана, що призводить до лейкопенії, гіпертермії, гіпотонії, ацидозу, десимінованої внутрішньосудинної коагуляції (ДВК).
Ендотоксини стимулюють синтез інтерферонів, активують систему комплементу за класичним шляхом, мають алергічні властивості.
При введенні невеликих доз ендотоксину підвищується резистентність організму, посилюється фагоцитоз, стимулюються В-лімфоцити. Сироватка тварини імунізованого ендотоксином має слабку антитоксичну активність і не нейтралізує ендотоксин.
Патогенність бактерій контролюється трьома типами генів: гени - власними хромосомами, гени привнесені плазмідами помірними фагами.

3.Збудник правця. Таксономія та характеристика. Мікробіологічна діагностика та лікування.

Стовпняк- тяжка ранова інфекція, що викликається Clostridium tetani, характеризується ураженням нервової системи, нападами тонічних та клонічних судом.

Таксономія. С. tetani відноситься до відділу Firmicutes, роду Clostridium.

Морфологічні характеристики.Збудник – рухлива (перитрих) грампозитивна паличка, утворює суперечки, частіше круглі, рідше овальні, суперечки розташовані термінально. У культурі старше 24 годин бактерії стають грамнегативними. Капсул не утворюють.

Культуральні властивості. Облігатний анаероб. На рідких живильних середовищах бактерії ростуть придонно, продукуючи сильний екзотоксин. На щільних живильних середовищах утворюють прозорі або трохи сіруваті колонії з шорсткою поверхнею. Не розщеплюють вуглеводів, мають слабку протеолітичну дію.

Антигенна структура та токсиноутворення. По джгутиковому Н-антигену ділиться на 10 сероварів; О-антиген є загальним всім представників виду. Збудник продукує два патогенні розчинні антигени - тетанолізин і тетаноспазмін, що становлять дві фракції правцевого екзотоксину.

Чинники патогенності. Основним фактором патогенності є екзотоксин. Тетанолізин і тетаноспазмін надають відповідно гемолітичну (викликає лізис еритроцитів) та спастичну (викликає мимовільне скорочення м'язів) дію.

Резистентність. Будучи нормальним мешканцем кишечника тварин, людини, клостридії потрапляють у навколишнє середовище, у ґрунт із фекаліями, ще як суперечка можуть зберігатися роками. Спори правцевої палички відрізняються термостійкістю: при кип'ятінні гинуть лише через 50-60 хв.

Епідеміологія та патогенез. Зараження відбувається при проникненні збудника в організм через дефекти шкіри та слизових оболонок при пораненнях (бойових, виробничих, побутових), опіках, обмороженнях, через операційні рани, після ін'єкцій. При інфікуванні пуповини можливий розвиток правця у новонароджених («пупковий правець»).

Патогенез.Головним патогенетичним фактором є правцевий токсин. Палички правця залишаються у ранової тканини, тобто. на місці застосування, і не поширюються по організму. Від місця розмноження збудника токсин поширюється по кровоносних та лімфатичних судинах, по нервових стовбурах, досягає спинного та довгастого мозку і вражає. нервові закінченнясинапсів, що секретують медіатори (ацетилхолін), внаслідок чого порушується проведення імпульсів з нервових волокон.

клініка.Інкубаційний період становить середньому 6- 14 днів. У хворих спостерігаються спазм жувальних м'язів, утруднене ковтання, напруга м'язів потилиці, спини (тулуб приймає дугоподібне положення - опистотонус), грудей та живота. Характерними є постійні м'язові болі, підвищена чутливість до різних подразників, часті генералізовані судоми. Хвороба протікає при підвищеній температурі тіла та ясній свідомості.

Імунітет. Після перенесеної хвороби імунітет не виробляється. Від матері, вакцинованої проти правця, новонародженим передається нетривалий пасивний антитоксичний імунітет.

Мікробіологічна діагностика Для бактеріологічного дослідженняберуть матеріал із рани та вогнищ запалення, а також кров. У культурах виявляють правцевий токсин, проводячи досвід на мишах, у яких розвивається характерна клінічна картина. Виявлення правцевого токсину за наявності грампозитивних паличок з круглими термінальними спорами дозволяє зробити висновок, що в досліджуваному матеріалі є С. tetani.

Лікування. Адсорбований правцевий анатоксин.Отриманий шляхом знешкодження формаліном правцевого токсину з подальшим його очищенням, концентрацією та адсорбцією на гідраті оксиду алюмінію. Входить до складу асоційованої коклюшно-дифтерійно-правцевої вакцини та інших препаратів. Застосовується для активної імунізаціїпроти правця.

Протиправцева сироватка.Отримана з крові коней, гінерімунізованих правцевим анатоксином. Застосовується для профілактики та лікування правця.

Імуноглобулін людський протиправцевий.Отримано з гамма-глобулінової фракції крові людей-донорів, ревакцинованих очищеним правцевим анатоксином. Застосовується для пасивної екстреної профілактики правця у поєднанні зі правцевим анатоксином при ушкодженнях. шкірних покривів, а також для лікування захворювання, що почалося.

Профілактика:При значних травмах необхідно звернутися до лікаря. Проводиться хірургічна обробкарани. Надійним способом захисту від правця є специфічна профілактика, яка полягає у проведенні планової та екстреної імунізації. Екстрена пасивна імунізація здійснюється у щеплених дітей та дорослих у випадках травм, опіків та обморожень шляхом введення 0,5 мл сорбованого правцевого анатоксину; нещепленим вводять 1 мл правцевого анатоксину та людський імуноглобулін. Для створення штучного активного імунітету застосовують адсорбований правцевий анатоксин у складі вакцин АКДЗ та АДС або секстанатоксину. Вакцинацію починають із 3-5-місячного віку і потім періодично проводять ревакцинації.

Квиток29

1.Основні засади культивування бактерій.

Універсальний інструментдля посівів є бактеріальна петля. Крім неї, для посіву уколом застосовують спеціальну бактеріальну голку, а для посівів на чашках Петрі – металеві або скляні шпателі. Для посівів рідких матеріалів поряд з петлею використовують пастерівські та градуйовані піпетки. Перші попередньо виготовляють із стерильних легкоплавких скляних трубочок, які витягують на полум'ї як капілярів. Кінець капіляра відразу ж запаюють для збереження стерильності. У пастерівських та градуйованих піпеток широкий кінець закривають ватою, після чого їх поміщають у спеціальні пенали або обгортають папером та стерилізують.

При пересіванні бактеріальної культуриберуть пробірку в ліву руку, а правою, обхопивши ватяну пробку IV і V пальцями, виймають її, проносячи над полум'ям пальника. Утримуючи іншими пальцями тієї ж руки зашморг, набирають нею посівний матеріал, після чого закривають пробірку пробкою. Потім у пробірку зі скошеним агаром вносять петлю з посівним матеріалом, опускаючи її до конденсату в нижній частині середовища, і зигзагоподібним рухом розподіляють матеріал по скошеній поверхні агару. Вийнявши петлю, обпалюють край пробірки та закривають її пробкою. Петлю стерилізують у полум'ї пальника та ставлять у штатив. Пробірки з посівами надписують, вказуючи дату посіву і характер посівного матеріалу (номер дослідження або назва культури).

Посіви «газоном»виробляють шпателем на живильний агар у чашці Петрі. Для цього, відкривши лівою рукою кришку, петлею або піпеткою наносять посівний матеріал на поверхню живильного агару. Потім проводять шпатель через полум'я пальника, остуджують його внутрішню сторону кришки і розтирають матеріал по всій поверхні середовища. Після інкубації посіву утворюється рівномірне суцільне зростання бактерій.

2.Імунокомпетентні клітини. Т-і В-лімфоцити, макрофаги, їх кооперація.

Ці імунні сироватки належать до гетерологічних препаратів, так як джерелом їх отримання є в основному коні. З-поміж цих препаратів найбільший досвід застосування протиправцевої сироватки, яку до того ж вводять в основному для профілактики правця. Тому ми вважали за можливе розглянути принципово ідентичні особливості виробництва гетерологічних імунних сироваток на основі технологічної схеми отримання протиправцевої сироватки.

Донорами або, як кажуть, продуцентами цих сироваток є коні, яких містять імунізаційних клініках, що складаються з ряду функціональних відділень. Спочатку здорових, відповідальних певним кондиціям імунологічної реактивності коней піддають гіперімунізації - процедурі інтенсивної підшкірної вакцинації наростаючими дозами анатоксину з ад'ювантом, завершуючи за необхідності цикл щеплень запровадженням необезвреженного токсину. Для отримання різних імунних сироваток відпрацьовано оптимальні схеми гіперімунізації. На 7-й день після закінчення циклу щеплень роблять кровопускання. Кров із яремної вениконя-продуцента отримують в обсязі, що дорівнює 1/50 маси тіла тварини: так у коня з масою тіла 450 кг беруть 9 л крові. (Після взяття крові кінь відпочиває два тижні, потім отримує черговий, більше короткий циклщеплень і знову піддається процедурі кровопускання; як продуценти гіперімунних антитоксичних сироваток коня використовуються в середньому два роки). Бутель з кров'ю направляють у відділення технічної та хімічної обробки сироватки, де здійснюється її очищення та концентрування.

У нашій країні та в ряді зарубіжних країн це проводиться в основному за допомогою методу, що отримав назву діаферм (походить від слів діаліз та ферментація, що лежать в основі технологічного процесу). При цьому спочатку кров обробляють на сепараторах для відділення еритроцитів від плазми, потім у спеціальних реакторах, з мішалками, сироваткові білки в плазмі піддають ферментативному гідролізу за допомогою пепсину протягом 2 годин в кислій зоні рН при 22-24°С. Ферментовану плазму прогрівають протягом 45 хв при 56°С у присутності 14% сульфату амонію і фільтрують, звільняючись при цьому від денатурованих і баластних білків, що випали в осад, не володіють функціями антитіл. Імунологічно активні білки - глобуліни висолюють із фільтрату шляхом його насичення сульфатом амонію до концентрації останнього, що дорівнює 34% при рН 7,1; віджатий осад ресуспендують і очищають спочатку від солей шляхом діалізу проти проточної води протягом 48 год, а потім від баластних білків, що залишилися, в їх ізоелектричній точці (рН 5,2-5,6) за допомогою обробки діалізату хлороформом. Надалі діалізат звільняють від хлороформу та денатурованого білка на сепараторах, практично вже очищену та концентровану сироватку додатково знесолюють діалізатом та стерилізують фільтруванням. Після цього для стабілізації Фізичних властивостей і біологічної активності сироватку витримують протягом 3 місяців і піддають повторної фільтрації для звільнення від імунологічно інертних ліпоідосодержащих білків, що випали в осад, розливають по ампулах і контролюють.

Слід зазначити, що описаний процес виготовлення імунних сироваток не позбавлений недоліків. Так, при цьому втрачається до 56-60% білка - носія антитоксичної активності, сироватка не повністю вільна від баластових білків та залишків пепсину, методика надійної інактивації якого ще не розроблена. Саме тому для очищення та концентрування низки гетерологічних сироваткових препаратів використовують методику виділення їх гамма-глобулінової фракції та інтенсивно розробляють виробничу технологію отримання чистих антитіл методами специфічної сорбції із сироватки на імуносорбентах – специфічних антигенах, фіксованих на нерозчинних носіях. Якщо за допомогою методу діаферм-3 виробляються протиправцева, протидифтерійна, полівалентна протигангренозна, моно- і полівалентна протиботулінічна гетерологічні сироватки, то також гетерологічні антирабічна сироватка і сироватка проти кліщового енцефаліту виробляються у вигляді більш очищених. Перед випуском виробничих серій протиправцевої сироватки слід контролювати:

Фізичні властивості (сироватка має бути прозорою, без пластівців, осаду та сторонніх включень; вміст білка не повинен перевищувати 15%; рН має бути в межах 6,9-7,2);

Стерильність (у посівах на різні живильні середовищане повинні виростати жодні мікроби);

Пирогенність (у здорових кроликів, які отримали внутрішньовенно сироватку з розрахунку 1 мл на 1 кг маси тіла, температура у прямій кишці не повинна підвищуватися більш ніж на 0,8 ° С у перші 3 год);

Нешкідливість ( морські свинки, що отримали підшкірно в обидва боки по 5 мл сироватки, повинні залишатися здоровими протягом 5 днів спостереження);

Специфічну активність (після 20-денної витримки сироватки при 37°С у дослідах абсолютного захисту білих мишей, що отримали сироватку різної концентрації в суміші з дослідною дозою токсину, каліброваної по міжнародному стандартуімунної сироватки визначають кількість міжнародних одиниць – ME – антитоксину, що містяться в 1 мл препарату).

Якщо результати контрольних досліджень задовольняють наведеним вимогам, правцеву сироватку, що містить до 1000 і більше ME в 1 мл, передають для профілактики або лікування правця в дозах, зазначених у настанові, що додається.

Так само контролюють властивості інших гетерологічних імунних сироваток, і лише методика визначення їхньої специфічної активності (кількість ME в 1 мл), природно, відрізняється. Подібно до вакцин, імунні сироватки зберігають у сухому затемненому місці при 3-10°С.

Антитоксичні сироватки Антитоксичні сироватки

імунопрепарати, що виготовляються з крові імунних людейта тварин та застосовувані для лікування пасивної імунопрофілактики токсинемічних інфекцій (дифтерії, правця, ботулізму, деяких форм стафілококової інфекції та ін.). Лікувальне та профілактична діяА. с. засноване на тому, що містяться в них антитоксини(див.) створюють пасивний імунітет, який захищає організм від токсичного впливу токсинів з моменту введення до 30 - 40-го дня після введення. А. с. не надають прямої інгібуючої дії на мікроби, що продукують токсини, та їх ендотоксини. Силу А. с. вимірюють у міжнародних од. (ME) або АЕ, що відповідають мінімальній кількості с-ки, що нейтралізує стандартну од. того чи іншого токсину. Див. Сироватки імунні діагностичніі Сироватки імунні лікувально-профілактичні.

(Джерело: «Словник термінів мікробіології»)

Дивитись що таке "Антитоксичні сироватки" в інших словниках:

Штучно одержувані сироватки, що містять антитоксини. Новий словник іншомовних слів. by EdwART, 2009. антитоксичні сироватки одержувані штучно сироватки, що містять антитоксин Великий словник іноземних слів. Видавництво… … Словник іноземних слів російської мови

СИРОВАТКИ- СИРОВІТКИ. С. імуніна сироватка, отримана з крові тварини, імунізованої природно або штучно до даного антигену (у більшості випадків хвороботворного мікроорганізму), і володіє відносно його суворо специфічним ...

Ски крові тварин і людини, що містять Ат проти бактерій (антибактер.), Вірусів (противірусні), екзотоксинів (антитоксичні), отрут змій, павуків та ін. Готують з крові гіперімунізованих тварин (зазвичай коней, мулів, буйволів), ... Словник мікробіології

Препарати з крові тварин та людини, що містять антитіла проти збудників інфекційних захворюваньабо продуктів їхньої життєдіяльності. Застосовуються для серодіагностики, серопрофілактики і ... Велика радянська енциклопедія

Фотографія мікропрепарату Clostridiu … Вікіпедія

I Протиотрути (antidota; синонім антидоти) засоби, здатні знешкоджувати отруту в організмі, зменшувати або запобігати розвитку розладів життєво важливих функцій, обумовлених отруєнням Протиотрути застосовуються тільки в токсикогенній фазі. Медична енциклопедія

АВІДИТЕТ- АВІДИТЕТ, Aviditat (від лат. avidus жадібний), термін у сучасній імунології, що означає вчення про якісну сторону реакцій імунітету. Поняття про А. введено в науку Ерліхом (Elhrlich) та його співробітниками, які намагалися особливостями та… Велика медична енциклопедія - ІНФЕКЦІЙНІ ХВОРОБИ. В уявленні римлян слово «infectio» полягало в собі поняття про групу гострих хвороб, що супроводжувалися лихоманкою, часто набували повального поширення і залежали від забруднення повітря ... Велика медична енциклопедія

Для очищення та концентрування антитоксичних сироваток використовують методи: осадження спиртом або ацетоном на холоді, обробка ферментами, афінна хроматографія, ультрафільтрація.

Активність імунних антитоксичних сироваток виражають в антитоксичних одиницях, тобто тим найменшим колом антитіл, яке викликає видиму або реєстровану відповідним способом реакцію з певним кількостям специфічного антигену. Активність антитоксичної протиправцевої сироватки та відповідного Ig виражається в антитоксичних одиницях.

Антитоксичні сироватки застосовуються для лікування токсинемічних інфекцій (правець, ботулізм, дифтерія, газова гангрена).

Після введення антитоксичних сироваток можливі ускладнення у вигляді анафілактичного шоку та сироваткової хвороби, тому перед введенням препаратів ставлять алергічну пробу на чутливість до них пацієнта, а вводять їх дрібно, по Безрідко. Для отримання цих препаратів застосовується сироватка крові тварин, імунізованих тим чи іншим антигеном. Дана сироватка містить антитіла, що нейтралізують токсини та розмноження відповідних мікробів. Сироваткова хвороба характеризується появою наступних симптомів:

Підвищення температури;

Уртикарний висип;

Плямисто-папульозний висип;

Артрит, артралгія;

Лімфаденопатія.

Зазвичай вони з'являються на 7-10 день після введення сироватки. Антитіла є чужорідним білком для людини і сприяють швидшому виведенню специфічних антитіл. У зв'язку з цим для попередження сироваткової хвороби особам, які отримували препарати кінської сироватки та мали в анамнезі алергічні реакції, призначаються специфічні імуноглобуліни людини, а не препарати, виготовлені 13 сироватки крові тварин.

Для виявлення сенсибілізації перед введенням сироватки проводиться проба із сироваткою у співвідношенні 1: 100. Зазвичай проба додається та маркована червоним кольором. Розведена сироватка вводиться строго внутрішньошкірно у дозі 0,1 мл на згинальній поверхні передпліччя. Проба вважається негативною за відсутності реакції у місці введення через 20 хвилин або появі гіперемії та набряку менше 1 см. Позитивною вважається реакція за наявності набряку та гіперемії діаметром більше 1 см. У разі негативної реакції проби вводять 0,1 мл нерозведеної сироватки, а через 45 хвилин, протягом яких за хворим спостерігають, за відсутності реакції вводиться решта необхідної дози сироватки.

У разі позитивної шкірної проби сироватку застосовує по життєвим показанням. Для попередження реакції на сироватку у подібних випадках її вводять у розведенні 1: 100 через 15-20 хвилин у дозуванні 0,5, 2,0 та 5,0 мл, потім з тими ж інтервалами вводять підшкірно нерозведену сироватку в дозуванні 0,1 та 1,0мл. Якщо відсутня реакція, вводиться необхідна доза сироватки на тлі засобів протишокової терапії.

Протидифтерійна сироваткавводиться за загальноприйнятими правилами введення гетерологічних препаратів у адекватних дозах відповідно до термінів та форми хвороби. Найбільш виражений ефектреєструється при її введенні з перших годин захворювання. При гіпертоксичних та геморагічних формаху разі невчасного введення (пізніше 3 діб) сироватка є неефективною. При гіпертоксичних формах її вводять внутрішньовенно на тлі глюкокортикоїдної та дезінтоксикаційної терапії. При локалізованих та поширених формах дифтерії протидифтерійна сироватка вводиться 1 раз на добу, при субтоксичній – 2 рази на добу. Тривалість лікування протидифтерійною сироваткою становить від 1 до 5 діб, залежно від форми захворювання. При комбінованих формах дози протидифтерійної сироватки підсумовуються.

Сироватка застосовується для екстреної профілактики правця.Нейтралізація токсину проводиться запровадженням антитоксичної протиправцевої сироватки. З метою обмеження надходження токсину при ранах роблять «обколювання» її протиправцевою сироваткою у кількості 1000 – 3000 ME. Сироватку необхідно вводити якомога раніше, тому що токсин може фіксуватися клітинами спинного та довгастого мозку. Сироватка вводиться: - дорослим – 100 000 – 150 000 ME; - новонародженим – 20 000 – 40 000 ME; - Дітям - 80 000 - 100 000 ME. Антитоксична дія триває протягом 3 тижнів та більше. За хворими забезпечується спостереження щонайменше 1 години. Для екстреної профілактики правця проводять введення 0,5 мл правцевого анатоксину. Нещепленим проводиться активно-пасивна імунізація, при якій ін'єкцію правцевого анатоксину в дозі 1 мл поєднують із введенням 3000 ME протиправцевої сироватки за встановленою схемою в іншу частину тіла. Надалі вводиться лише анатоксин.