Чума мелких животных (pestis ovium et caprarum) - остро протекающая, высококонтагиозная болезнь овец и коз, характеризующаяся лихорадкой, геморрагическим диатезом, язвенно-некротическим стоматитом, катарально-геморрагическим энтеритом, расстройством функции желудочно-кишечного тракта.

Этиология.

Возбудитель болезни - РНК-геномный вирус, относящийся к семейству Paramixoviridae, подсемейству Morbillivirus, имеет слегка овальную форму, размеры от 150-700 нм до 200-400 нм. В антигенном и иммуногенном отношении близок к возбудителям чумы крупного рогатого скота, чумы плотоядных и кори.

Эпизоотологические данные.

В естественных условиях болезнь поражает коз и овец всех возрастов, но тяжелее протекает у 2-18-месячного молодняка. Козы более восприимчивы, чем овцы. У крупного рогатого скота вирус вызывает бессимптомное течение инфекции. Источником возбудителя инфекции являются больные и находящиеся в инкубационном периоде животные, начиная с 3 дней после инфицирования. Некоторые исследователи считают, что резервуаром чумы мелких жвачных в природе служат дикие африканские животные, которые поддерживают существование вируса в межэпизоотический период, а также способствуют его распространению в период эпизоотии.

Вирус передается аэрогенным и алиментарным путем, при прямом контакте овец и коз с больными животными, а также через инфицированные корм, воду, подстилку, инвентарь, одежду обслуживающего персонала. Инфекция чаще всего возникает после завоза животных из неблагополучных по чуме хозяйств. Протекает в виде энзоотии, чаще проявляется в сезон дождей. Установлена периодичность эпизоотии в Сенегале, повторяющаяся через каждые 3-4 года. Летальность у коз может достигать 95%, у овец - 40%.

Течение и симптомы.

Инкубационный период при чуме жвачных составляет 6-15 дн. Течение болезни у коз - сверхострое и

острое, у овец -острое и подострое.

При сверхострой форме у коз наблюдают повышение температуры тела до 40-42°С, угнетение, отсутствие аппетита, истечение из носа, слезотечение, чихание, диарею. Продолжительность болезни - 4-5 дн. У большинства больных смерть наступает внезапно.

Острое течение у коз и овец характеризуется теми же признаками, что и сверхострое течение, однако болезнь длится 8-10 дн. Появляется кашель, на слизистой оболочке ротовой и носовой полости развиваются язвы, очаги некроза, из носа выделяются вначале серозные, а затем серозно-гнойные истечения. У самок наблюдают воспаление влагалища, у стельных животных - аборты. Заболевание часто заканчивается переходом в подострую форму болезни или гибелью.

При подостром течении у овец отмечают лихорадку пе-ремеживающегося типа, некроз и язвы вокруг ноздрей, ротовой полости, при осложненных формах - пневмонию, диарею, истощение и обезвоживание организма, парезы и параличи конечностей. В тяжелых случаях больные животные погибают через 2-3 недели. Вирус вызывает разрушение эпителия дыхательных путей, желудочно-кишечного тракта и лимфоидных органов.

Диагноз.

Диагноз ставят комплексно на основании клинических, патологоанатомических, эпизоотологических данных и результатов лабораторных исследований. Лабораторные исследования предусматривают выделение вируса в культуре клеток почки эмбриона овцы, идентификацию его иммунофлюоресцентным и электронномикроскопическим методами. Предложены также РСК и РИД, которые, однако, не позволяют отличить чуму мелкого рогатого скота от чумы крупного рогатого скота. В затруднительных случаях проводят гистологические исследования и постановку биопробы на 2-4-месячных козлятах. Характерным является обнаружение в эпителии слизистой оболочки ротовой полости, кишечника ив ретикулярных клетках лимфоидных органов эозинофильных цитоплазматических и внутриядерных телец-включений в гистологических препаратах.

Дифференциальный диагноз.

Чума крупного рогатого скота и мелких жвачных

Pestes bovina (лат.); Rinderpest (нем.); Cattle plaque (англ.); Peste bovine (франц.).

Чума КРС - острая заразная вирусная болезнь, характеризующаяся высокой лихорадкой, катарально-геморрагическим, крупозно-дифтерическим воспалением слизистых оболочек. Распространена в Индии, странах Ближнего Востока, Египте и в 22 странах Центральной Африки. Вспышки болезни происходят в результате разноса её дикими буйволами и анти­лопами куду. Инфекция в бывшем СССР не регистрируется с 1928 г. Чума мелких жвачных животных (ЧМЖЖ) - заболевание овец и коз, характеризующее­ся лихорадкой, диареей, язвенными поражениями слизистой оболочке ротовой полости, пневмонией. Клинические признаки: тифоподобное состояние, некротиче­ский стоматит, поражение слизистых оболочек носа и глаз, профузная диарея.

ХАРАКТЕРИСТИКА ВОЗБУДИТЕЛЯ

Вирусную природу возбудителя болезни впервые установили Николь и др. в 1902 г.

Морфология и химический состав . Вирус чумы КРС и мелких жвачных в своей структуре имеет 6 белков (Н, F, L, N, Р и М), которые характеризуются высокой сте­пенью гомологии. Степень гомологии белка F ВЧ КРС и вируса кори (ВК) составляет 78,9%. По другим авторам, гомология аминокислотных последовательностей белка F ВЧ КРС и ВК составляет 81,3%, а ВЧ КРС и ВЧС - 68,2% (30). Обнаружено AT- родство Н- и особенно NP-белков ВЧ КРС, ВК и ВЧС.

Устойчивость. В отношении физических факторов ВЧ КРС нестоек и разрушает­ся под влиянием химических веществ. Нагревание до 60°С убивает его немедленно, до 55°С - за 20 мин; в условиях комнатной температуры вируссодержащая цитратная кровь сохраня­ет активность 4-6 дн, при 5°С - 1 нед, при 0°С - более 5 лет.

Время инактивации терморезистентного вируса, за которое инактивируется 50% его при 45°С, составило 4 дн. вместо 1,8 дн. для исходного родительского вируса. Полученный терморезистентный клон (1613-1009) характеризовался безвредностью для КРС и высокой иммуногенностью, что позволило использовать его для производства сухой лиофилизированной, устойчивой к хранению вакцины. В мясе больных животных вирус сохраняется в зависимости от скорости аутолиза и ко­личества молочной кислоты. Если рН изменяется в кислую сторону - вирус погибает за 4-6 ч. Поваренная соль консервирует его. В соленом мясе (10%-ный р-р NaCI ) он сохраняется более месяца. В шкурах жвачных животных, высушенных в темном месте, вирус утрачивает патогенность через 48 ч, а в шкурах необескровленных животных - за 24 ч. При гниении ма­териала вирус быстро погибает, поэтому в тропических странах трупы уже через несколько часов после гибели животного обезвреживаются. В моче и кале вирус сохраняется не более 30 ч. 2%-ный р-р карболовой кислоты, 1%-ное известковое молоко, 2%-ная щелочь, 2%-ные р-ры крезола и лизола обезвреживают зараженные вирусом материалы. Глицерин инактивирует при комнатной температуре до 10 дн. Чувствителен к эфиру и хлоро­форму. УФ-лучи и солнечный свет инактивируют его в течение от 40 мин до 5 ч. В солевых экстрактах из инфицированных органов вирус сохраняется больше 1 мес.

Антигенная структура . Антигенная структура изучена недостаточно. Идентифициро­вано 5 вирусспецифических полипепгидов. Изучена гомология в нуклеотидной по­следовательности белка слияния у 3-х вирусов (чумы КРС, чумы собак и кори). Проведено клонирование и анализ последовательности гена фосфопротеина ВЧ КРС. Получены монАТ к структурным белкам (нуклеотидному белку и гликопротеинам Н и Fo) вакцинного шт. K 17-79 ВЧ КРС. Показано, что из 24 видов монАТ 10 распознавали нуклеопротеин (NP), 8- фосфопротеин, 4 - ГА (Н) и 2 - белок слияния (Fo). МонАТ против Н нейтрализова­ли инфекционную активность вируса, тогда как подобные AT против Fo белка проявляли нейтрализующую активность только в присутствии комплемента морской свинки. Антигенная вариабельность и родство. АГ вариантов вируса нет. Иммунологическая идентичность полевых штаммов подтверждена многочисленными опытами перекрестного заражения. Между ВЧ КРС, ВК и ВЧС существует антигенное и иммунологическое родство. Кроме того, к ВЧ КРС оказались близки в антигенном отношении морбилливирусы, выде­ленные от дельфинов и морских свиней в Европе. Шт дифференциация ВЧ КРСпроизводиться при сравнении нуклеотидной последовательности транслируемой последовательности F-гена исследуемых штаммов в ПЦР.

Локализация вируса . Вирус разносится кровью по всему организму и исчезает из нее с поражением ЖКТ (обычно с 4-го по 10-й день). Вирусемия совпадает с периодом гипертермии. Иногда вирус обнаруживают в крови на протяжении всей болезни и даже за 12 ч до начала лихорадки. Его можно обнаружить в выделениях из носовой полости с 6-го по 14-й день, в органах животных, убитых на 6-й день. За день до развития лихорадки и через не­сколько часов после смерти животного большое количество вируса содержится в слезном секрете. Концентрация вируса в крови не превышает 10 2 -10 4 ТЦД 50 /мл.

ВЧ КРС - пантропный вирус. В органах и тканях накапливается неодинаково, в более высоких титрах находится в лимфоузлах (10 6,5 ИД 50/мл), в слизистой оболочке сычуга (10 5,5), в легких (10 4) и почках (10 3 - 10 4 ИД 50 /мл). В небольших количествах он присутствует в мозговой ткани, поперечнополосатой мышечной ткани и спинномозговой жидкости. Виру-соносительство у животных-реконвалесцентов практически не доказано.

Антигенная активность. У животных-реконвалесцентов обнаруживаются ВНА, КСА, анти-ГА и ПА. Поэтому наиболее надежными методами оценки поствакцинального имму­нитета являются РН и РСК. Телята приобретают иммунитет через молозиво от коров-реконвалесцентов или активно иммунизированных. Он сохраняется 6-8 мес. Поскольку ма­теринские колостральные AT тормозят образование иммунитета, телят нельзя вакциниро­вать ранее этого срока. У ягнят пассивный иммунитет сохраняется не менее 4-х мес. Изучались различные участки гемагглютинина и их роль в проявлении иммунобиологиче-ских свойств его и вируса в целом.

Экспериментальная инфекция. У КРС она удается, как правило, введением вируссодержащей крови, взятой в кульминационный период болезни per os, подкожно или внутри­мышечно. Заразить можно также слюной, истечением из влагалища больного животного. Овцы и козы заражаются, однако болезнь у них проявляется общей лихорадкой и вирусоносительством до 45 да. К искусственному заражению восприимчивы также верблюды и оле­ни. Относительно восприимчивости свиней мнения расходятся. У зараженных кроликов повышается температура тела. Грызуны, непарнокопытные, плотоядные, птицы и человек невосприимчивы. В конечной стадии летальной инфекции происходит интенсивное истощение лимфоцитов в лимфоузлах, селезенке и миндалинах. В трахее обнаружен некроз эпителиальных клеток с периферическим распределением АГ.

Культивирование . Вирус культивируется в организме восприимчивых животных и в культурах клеток почки телят без предварительной адаптации. Вирус чумы КРС хорошо размножается в первичных культурах клеток почки теленка, ягненка, эмбриона коровы, макрофагах и перевиваемых клетках. ЦПД вируса развивается медленно и длится при ис­пользовании больших концентраций вируса в течение 5-8 сут. Вслед за появлением цито-плазматических включений в инфицированных клетках, в том числе и симпластах, образу­ются внутриядерные оксифильные включения в количестве 2-4. Хроматиновая сеть ядра на­рушается лишь вокруг включений. В некоторых случаях они занимают почти все ядро.

Развитие вируса в культуре начинается через 3-6 ч после заражения. В этот период ви­рус ни в клетках, ни в среде не обнаруживается. Специфичность цитопатических изменений подтверждаются РН. Цитопатические изме­нения развиваются одновременно с накоплением вируса в инфицированных культурах кле­ток. Новую популяцию вируса обнаруживают через 6-8 ч после заражения в титре 10 3 - 10 4 ТЦД 50 /мл. Позднее титр вируса нарастает и к 5-7 сут достигает максимальной величины (10 5,5 -10 6,5 ТЦД 50 /мл). Одновременно происходит и накопление КС-антигена. Титр его на 5-7-е сут. равен 1:16- 1:64 (24, 27, 34). В клеточной линии почек африканских зеленых мар­тышек вирус образует бляшки. Однако лапинизированный и капринизированный штаммы вируса, размножаясь в культуре клеток, не вызывают в первых пассажах ЦПД. Помимо первичных культур клеток, культивирование удавалось и на перевивае­мых линиях клеток.

ГА свойства . ГА ВЧ КРС получают экстрагированием вируссодержащей культуры кле­ток эмбриона КРС. Экстракт концентрируют в 20 раз диализом. Концентрированный вирус с титром не ниже 10 6 ТЦД 50 /мл агглютинирует эритроциты обезьян и в меньшей степени эритроциты кроликов, морских свинок, мышей и крыс. ГА ВЧ КРС и ВК антигенно различ­ны, а иммунологическое родство обусловлено присутствием общего АГ в их нуклеокапсидах. Клонирован ген ГА шт. Kabete О и лапинизированного штамма. Показано, что в гене ГА шт. Kabete О по сравнению с геном лапинизированного штамма отсутствуют первые 17 нуклеотидов. Гемагглютинирующий АГ у ВЧ КРС выявляют только после специальной обработки. Антисыворотка к ВЧ КРС нейтрализует ГА активность вируса кори.

ЭПИЗООТОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ

Последние случаи возникновения чумы КРС, вследствие заноса из Монголии (1991), были зарегистриованы в Читинской области и Республике Тува (1991-1993 гг.). В последние годы неблагополучными по чуме КРС ежегодно являются 8-13 африканских и азиатских стран, в том числе Иран и Турция, из которых возможен занос возбудителя на территорию России. Получены данные о циркуляции ВЧ КРС среди мелких жвачных, содержащихся совместно с поголовьем яков и КРС, перенесших эпизоотию и привитых вирус-вакциной. Установлено участие овец и коз в эпизоотии чумы яков.

Идентифицировано две линии штаммов. Одна включает изоляты из Восточной и Запад­ной Африки, полученные в 1960 г., филогенетически родственные азиатским и ближневосточньм изолятам. Вторая линия включает большинство изолятов, полученных в Восточ­ной, Западной и Северной Африке в 1983-1993 гг. Во время эпизоотиии в Нигерии в 1980 г. совместно циркулировали изоляты обеих линий.

Источники и пути передачи инфекции. Источник инфекции - больные и переболев­шие чумой животные. Распространению ее способствуют трупы павших и вынужденно уби­тых животных, шкуры, кишечное сырье, кости, рога, копыта, шерсть. Определенную роль в распространении болезни могут играть козы и овцы, которые чаще переболевают бессимптомно. Собаки, хищники, птицы могут разносить вирус механически в случае поедания трупов животных, павших от чумы. Имеются сообщения о распространении чумы сусликами. Механический перенос вируса возможен через одежду обслуживающего персонала, корм, воду, подстилку, предметы ухода, транспорт. У клещей, слепней и мух вирус обнару­живали через 15-30 мин после того, как они находились на больном чумой животном. В ес­тественных условиях заражение чумой происходит через пищеварительный тракт, через слизистую оболочку носовой полости и конъюнктиву.

Спектр патогенности в естественных условиях. К вирусу восприимчив КРС, зебу, буйволы, иногда поражаются овцы и козы. Яки и верблюды переболевают легко. Дикие жвачные (лани, антилопы, газели, жирафы) болеют и могут распространять болезнь на ог­ромные пространства. Буйволы менее восприимчивы, чем КРС, однако иногда болезнь сре­ди них принимает злокачественный характер. В Индии наблюдается заболевание свиней, вызванное этим вирусом. В природе встречаются штаммы, высокопатогенные для КРС, но не вызывающие заболевания овец и коз, и штаммы, патогенные для всех этих животных. Однако в последние годы установлено, что ВЧ КРС и ВЧ мелких жвачных животных ВЧ МЖЖ значительно различаются между собой. ВЧ МЖЖ не является вариантом ВЧ КРС. Это оригинальный вирус, который на шкале родства в пределах Морбидливирусов одинако­во далек от ВК и ВЧ КРС. Чувствительность к ВЧ КРС различна и зависит от породы (местный скот менее чувствителен, чем скот улучшенных пород), эпизоотического состояния страны (там, где чума встречается энзоотически, скот менее восприимчив и легче переболевает благодаря остаточному иммунитету) и физико-географических условий (наблюдалась меньшая восприимчивость скота в низменных местах, чем в горных). Клиническая признаки и патологоанатомические изменения. В естественных усло­виях инкубационный период длится 6 дн. Болезнь сопровождается повышением температу­ры тела до 40-42,2°С, снижением удоя. Со 2-3-го дня у больного животного появляются сла­бость и угнетение. Температура поверхности тела неравномерная, рога и уши горячие, носовое зеркальце сухое. Кожа местами покрыта потом, волосяной покров без блеска и взъеро­шен. Развивается анарексия, усиливается жажда, прекращается жвачка, кал сухой, темного цвета, мочеиспускание редкое, моча темная. Со 2-го дня болезни развиваются воспаление и некроз слизистых оболочек: конъюнктива ярко-красная, с точечными кровоизлияниями, ве­ки припухшие, слезотечение. Вначале появляется серозный ринит, слизистый секрет стано­вится гнойным, затем грязно-серым или буроватым, иногда кровянистым. Слизистая обо­лочка носа вначале пятнистая, затем равномерно ярко-красная и усеяна мелкими кровоиз­лияниями. Саливация усилена, слизистая оболочка ротовой полости с красными пятнами. Вскоре на её поверхности появляются вначале твердые, позже мягкие желтовато-белые узелки размером с конопляное зерно. Затем они сливаются, образуя серый или серо-желтый налет, который может самопроизвольно отделяться, обнажая кровоточащую ткань слизистой оболочки. Поражение кишечного тракта в первые дни проявляется запором, позднее - профузным поносом с выделением кашицеобразных или жидких грязно-серых, цвета глины или темно-бурых отвратительно пахнущих, иногда кровянистых испражнений, содержащих слизь, серый детрит или клочья пленок. У коров и телок из влагалища выделяются слизи­стые или слизисто-гнойные, иногда кровянистые истечения. Иногда на коже вымени и мо­шонки появляются кровоизлияния величиной с чечевицу. Животные быстро худеют, скре­жещут зубами, мотают головой. Наблюдается гнойный секрет из глаз, носовые истечения, пенистая слюна в углах рта, ускоренное затрудненное со стонами дыхание, жидкие испраж­нения - характерные признаки чумы КРС. Большинство больных погибает. Практически вирус находят во всех органах, но больше всего его накапливается в лим­фоузлах, селезенке, тимусе, слизистой оболочке сычуга. Сильные поражения лимфоидной ткани лимфоузлов головы, туловища и внутренних органов, селезенки, тимуса, миндалин, лимфоидиые скопления и образование в слизистой оболочке пищеварительного и дыхатель­ного трактов свидетельствуют о размножении ВЧ КРС в клетках кроветворной ткани. Раз­рушение защитной системы организма обусловливает развитие воспалительных процессов в слизистых оболочках и коже, беспрепятственно развивается секундарная микрофлора, оби­тающая на покровном эпителии. Это придает воспалению крупозный или дифтерический характер, сопровождается образованием обширных эрозий и язв. Трупы сильно истощены. Наружные покровы вокруг естественных отверстий запачканы секретами и экскретами. На коже живота, вымени, бедер, промежности наблюдают сыпь в форме кровоизлияний, узелков и пузырьков с выделением экссудата, который, подсыхая, образует корочки.

Слизистая оболочка носовой полости, гортани и трахеи покрасневшая, пронизана кро­воизлияниями, часто усеяна эрозиями и язвами, покрыта пленками фибринозного экссудата. В грудной и брюшной полостях мутная сероватая жидкость с примесью крови. Бронхи из­редка содержат желатинозный экссудат, при надавливании выделяющийся в виде эластич­ных цилиндров. Легкие чаще в состоянии интерстициальной эмфиземы. Реже выявляют рассеянные лобулярные очаги пневмонии крупозного характера. Слизистая оболочка ротовой полости покрыта серо-желтыми наложениями, оставляющими после себя ярко-красного цвета эрозии. Бывают более глубокие поражения типа дифтерического воспаления и язв. Крупозные и дифтерические процессы начинаются с появления на слизистой оболочке ротовой полости узелковой сыпи. Слизистая оболочка миндалин - также место для крупоз­ных и дифтерически-язвенных процессов. Преджелудки обычно не изменены. Исключение составляет книжка, растянутая скопившимися в ней плотными, сухими, иногда как бы спрессованными кормовыми массами. На листках книжки имеются узелки, эрозии и язвы. Сычуг пуст или в нем небольшое количество жидкости с примесью слизи, окрашенной в светло-желтый или шоколадный (примесь крови) цвет. Слизистая обо­лочка его, главным образом по вершинам складок и в области пилоруса, набухшая, ярко-красного или вишнево-красного цвета, пронизана кровоизлияниями и усеяна эрозиями и яз­вами, покрытыми пленками фибрина. Изменения кишечника наиболее выражены в тощей и прямой кишках. Содержимое то­щей кишки жидкое, напоминающее рисовый отвар. Позднее от примеси крови оно приобре­тает красно-коричневую окраски и, наконец, желто-зеленую. Обычно к содержимому при­мешаны хлопья фибрина. Слизистая оболочка тощей кишки крупозно-геморрагически вос­палена, пронизана многочисленными кровоизлияниями и покрыта пленками фибрина. Од­новременно в тощей кишке может развиваться дифтерический процесс, поражающий, глав­ным образом, пейеровы бляшки и солидарные фолликулы. Последние с поверхности покры­ты желтоватыми творожистыми массами, проникающими до подслизистой ткани. При раз­мягчении некротических масс и их отторжении в фолликулах остается язва. В прямой киш­ке фибринозно-геморрагическое воспаление с образованием фибринозных пленок, струпьев и язв. Толстый кишечник менее поражен. Обычно в нем находят явления острокатарального воспаления. Илеоцекальный клапан со стороны слизистой оболочки пронизан кровоизлия­ниями и покрыт крупозным и дифтерическим налетом. Мезентериальные лимфоузлы сильно набухшие и геморрагически инфильтрированы. Печень дряблая, глинистая или шафрано-желтого цвета. Желчный пузырь обычно сильно растянут густой, темно-зеленого цвета жел­чью с примесью крови. Его слизистая диффузно или полосчато гиперемирована и содержит небольших размеров язвы, окаймленные красным ободком, на дне которых различают серо-зеленого цвета струпья. Слизистая оболочка мочевого пузыря покрыта точечными и полосчатыми кровоизлияниями. Моча красно-бурого цвета, а при значительной примеси крови -кровянистая. На клиторе и на слизистой влагалища нередки кровоизлияния и крупозные пленки. Поверхностные лимфоузлы (подчелюстные, околоушные, заглоточные, шейные, предлопаточные, паховые, подколенные и др.) у павших животных атрофированы, на разре­зе бывают от бледно-серого до красного цвета, рисунок стерт. Селезенка уменьшена, выгля­дит более бледной и плотной. На разрезе пульпа темно-красная, фолликулы не различаются, трабекулы отчетливо выявляются.

Патологоанатомические изменения у МРС такие же, как у КРС. Они не ярко выражены, реже наблюдается крупозное воспаление ЖКТ и редки дифтерические процессы.

ДИАГНОСТИКА

Диагноз ставят на основании эпизоотологических, клинических, патологоанатомических данных, результатов лабораторных исследований и биопробы на восприимчивых животных. Лабораторная диагностика предусматривает: выделение вируса в культуре клеток и иденти­фикация его в РН, обнаружение вирусного АГ в органах и тканях от павших и вынужденно убитых животных в РСК, РДП, ВИЭОФ, РТНГА, РИГА, РИФ, ИФА; обнаружение специ­фических AT у переболевших животных в РСК, РН, РДП, РТГА, ИФА. ПЦР экс­пресс- метод диагностики болезни и видовой дифференциации.

Выделение вируса. Взятие и подготовка материала . Материал для выделения вируса берут от больных (кровь, пунктат лимфоузлов) или убитых и павших животных (предлопаточные, мезентериальные лимфоузлы, селезенка). Патматериал берут в стерильную, плотно закрывающуюся посуду и доставляют в лабораторию нарочным в опечатанном термосе со льдом при строгом соблюдении мер предосторожности. Тепаринизированную кровь в стерильных условиях разливают по пробиркам и центрифугируют при 2500 об/мин - 15-20 мин. Образовавшийся слой лейкоцитов между эритроцитами и плазмой в форме суспензии или пленки переносят пастеровской пипеткой в стерильный флакон. Пленку лейкоцитов отмывают от эритроцитов питательной средой и измельчают. Суспензию лейкоцитов в питательной среде используют для заражения культуры клеток. Заражать последнюю можно и цельной кровью. Вирус от больных животных выделяют прижизненно из пунктата предлопаточных лимфоузлов в инкубационный период за сутки до начала лихорадки, и на всем протя­жении болезни.

Лимфоузлы и селезенку можно хранить при -20°С в течение 60 дн., при -40°С - 6 мес., при 2-4°С - не более 7 дн. В кусочках размером 1-2 см, помещенных в 10%-ньш NaCI, вирус сохраняется при 2°С 15-30 да. Вируссодержащая цитратная кровь в условиях комнатной температуры сохраняет активность 4-6 да, при 5°С - 1 нед, при 0°С - 3-4 нед. В лиофильно высушенном материале, находящемся в ампулах под вакуумом при -20°С, вирус выживает более 5 лет, а при 2-4°С - не менее 1 года.

Заражение культуры клеток . Используют культуру клеток почки телят, которую после удаления ростовой среды заражают, нанося на слой клеток суспензию лейкоцитов исследуе­мого животного или суспензию его органов. Для адсорбции вируса культуры выдерживают 2 ч при 37° С, после чего инокулят отсасывают и вносят питательную среду с 2,5% телячьей инактивированной сыворотки. За культурой наблюдают 9-18 да. На положительный резуль­тат указывает ЦПЭ. При отсутствии ЦПЭ делают слепой пассаж. При изоляции таким методом затрачивается 20-25 да. Идентификацию проводят в РН.

Заражение восприимчивых животных . Рекомендуют заражать молодняк КРС или те­лят буйволов кровью или 10-20%-ной суспензией лимфоузлов, полученной от больных жи­вотных в первые 5 да после заболевания. Животным вводят подкожно 10 мл исследуемого материала. Это неразбавленная кровь или 10-20%-ная суспензия селезенки и лимфоузлов. На положительный результат указывает подъем температуры тела через 5 дн. после зараже­ния и последующее развитие типичной картины болезни. Смертность очень высокая - около 90%. В случае выздоровления животных дополнительным критерием специфичности тече­ния болезни является рост уровня AT.

Индикация и идентификация вируса

Вирусоскопия . ЭМ и ИЭМ в практических условиях не применяются. Из экспресс-методов диагностики наибольшего внимания заслуживает применение гибридизационного зонда. С помощью его (точечной гибридизации) удается дифференцировать два родствен­ных морбилливируса - ВЧ КРС и ВЧ МЖЖ. Дифферен диагностика с помо­щью ДНК-зондов идентифицировала вспышку чумы КРС среда популяции баранов в Индии.

Обнаружение специфических телец-включений. В зараженных культурах клеток в цитоплазме одиночных клеток и симпластов появляются сначала мелкие эозинофильные включения округлой формы со светлым ободком вокруг. С увеличением размеров симпла­стов растут объем и число цитоплазматических включений. Последние принимают много­угольную, продолговатую формы или форму кольца, охватывающего ядра симпластов; в ци­топлазме располагается до 10 включений. Вслед за появлением цитоплазматических вклю­чений в инфицированных клетках, в том числе и в симпластах, образуются внутриядерные оксифильные включения в количестве 2-4. Хроматиновая сеть ядра нарушается лишь вокруг включений. В некоторых случаях они занимают почти все ядро.

Биопроба . Идентифицировать ВЧ можно биопробой на иммунном и неиммунном скоте. Двух животных вакцинируют сухой вирусвакциной из шт. ЛТ (согласно утвержденному на­ставлению по применению препарата). Через 12 дн. вакцинированных и двух невакциниро­ванных животных заражают испытуемым материалом (суспензия селезенки, лимфоузлов и крови). При наличии у невакцинированных животных специфической температурной реак­ции, клинических признаков и отсутствии таковых у иммунных животных биопроба счита­ется положительной. У заболевших или павших животных обнаруживают специфический АГ в РСК и РДП.

Р H . Применяют качественную и количественную РН. Для установления специфичности вызываемых вирусом поражений клеток проводят качественную РН, а для определения ко­личества AT в сыворотке иммунных животных - количественную.

РСК. Применяют для прижизненной и посмертной диагностики чумы с целью выявле­ния АГ в гомогенатах лимфоузлов, селезенки, а также в инфицированной культуре клеток. При использовании РСК с целью идентификации вируса в культуре клеток в качестве спе­цифического и контрольного АГ используют культуральную жидкость с зараженной и неза­раженной культурами клеток.

РДП . Реакцию ставят по методу Оухтерлони. Вьмвление преципитирующего АГ ВЧ в органах больного КРС является ценным диагностическим тестом, поскольку этот АГ регу­лярно появляется в лимфоузлах больных животных, начиная с 1-го дня повышения темпе­ратуры. На 3-й день болезни он выявляется лишь у 50% больных. РДП, как и РСК, дает бы­стрый ответ (через 12-18 ч). Оптимальный срок для взятия проб - период от 4-6 дн. после начала лихорадки до появления поражений во рту и диареи. Если нет животного в этой ста­дии болезни, рекомендуют брать образцы от погибшего животного. Для исследования при­годен материал даже от разлагающихся в течение 52 ч трупов, в качестве антител исполь­зуют гипериммунные сыворотки кроликов и КРС.

Заведомо положительные и отрицательные АГ, приготовленные соответственно от больных и здоровых животных, используют в РДП одновременно. Положительную преципитирующую сыворотку получают от кроликов, иммунизированных инфицированными кро­личьими тканями. РСК, РДП, РН и РНГА являются специфичными и эффективными лабо­раторными методами выявления АГ и идентификации ВЧ КРС. Однако показано, что аттенуированные штаммы ВЧ КРС в естественных условиях не сти­мулируют продуцирование преципитирующего антигена в тканях животных. Это может быть характерным признаком отличия вакцинного штамма от эпизоотического. В Иране в 1982 г. в зонах, где скот был вакцинирован, у привитых животных не обнаруживали образо­вание преципитирующего антигена. Поэтому в зонах систематической вакцинации скота против данной инфекции диагноз поставить сложно.

ВИЭОФ . Предложен вместо РДП для быстрой диагностики чумы КРС. В качестве ис­пытуемого АГ служит суспензия селезенки и лимфоузлов толстого кишечника КРС и овец, полученных во время вспышки болезни. ВИЭОФ проводят в 0,8%-ной агарозе на веронало-вом буферном растворе с рН 8,6. Гипериммунную сыворотку помещают в лунки вблизи анода, исследуемый материал - вблизи катода. Пластины помещают в горизонтальную ван­ночку с охлажденным вероналовым буфером. Линии преципитации образуются через 45 мин при силе тока 6 мА. ВИЭОФ при обнаружении АГ в тканях павших животных он ока­зался в 4-16 раз чувствительнее РДП и позволяет получить результат в течение 40 мин.

РТГА . Разработана для экспресс-диагностики чумы КРС. Если исследуемый материал содержит вирус, анти-ГА связываются, а их отсутствие или нехватку можно потом выявить, исследуя сыворотку в РТГА с использованием гемагглютинина ВК. При отсутствии вируса в исследуемом материале количество AT остается неизменным. В этой реакции используют родство АГ ВЧ КРС и ВК. Особую ценность она имеет для диагностики случаев заболева­ния, вызванных штаммами с ослабленной вирулентностью.

ИФ. В качестве исследуемого материала используют мазки-отпечатки и гистологиче­ские срезы (селезенка, лимфоузлы, печень, слизистые оболочки ротовой полости и кишеч­ника) из органов и тканей больных животных или инфицированные этими материалами культуры клеток. Возможно применение непрямого ИФ для обнаружения специфического АГ. Четкие результаты получают в случаях, если ФИТЦ-конъюгат изготовлен на основе гамма-глобулина, выделенного ионообменной хроматографией из специфической сыворот­ки. Прямая ИФ позволяет обнаруживать АГ в более ранние сроки: в мазках-отпечатках из органов больных животных через 2 ч, в зараженной культуре клеток - на 1 пассаж ранее по­явления ЦПД - т.е. раньше на 8-10 дн (11). С помощью прямой ИФ возможно оценивать результаты РН в культуре клеток через 24-48 ч после постановки опыта, тогда как для оцен­ки реакции по ЦПД вируса требуется 6-8 сут. Поэтому прямой метод ИФ признан высоко-специфичным, чувствительным и пригодным для экспресс-диагностики чумы КРС.

РНГА и РЗГА . Обе реакции позволяют дифференцировать сыворотки и АГ при исполь­зовании обработанных дубильной кислотой эритроцитов крови коз. Реакции основаны на адсорбции перекрестных AT из сыворотки, которая используется в РТГА.

ИФА . ИФА позволяет быстро выявлять АГ ВЧ КРС в патматериале. Наиболее часто АГ выявляли в мазках из поражений слизистой ротовой полости и лимфоузлов. АГ ВЧ наибо­лее часто выявляли у КРС моложе 3 лет, а у буйволов - в более старшем возрасте. В РДП и ИФА результаты совпадали, но последний позволял получить результат через 2-3 ч. Успеш­но вирус определяли в назальных и глазных секретах через 4 дн несмотря на то, что он там содержался в количестве не более 1,75 lg ТЦД 50 /мл. ИФА оказался более чувствительным по сравнению с выделением ВЧ КРС. Получены компоненты набора для диагностики чу­мы КРС методом твердофазного ИФА, которые обеспечивают обнаружение вирусспецифического АГ (нуклеопротеина) ВЧ КРС в лизатах зараженных клеточных культур и пробах органов больных животных, а также обеспечивали обнаружение AT в сыворотках больных и переболевших животных. Чувствительность ТФ ИФА при выявлении специфических анти­тел в сыворотках крови больных и иммунных животных (метод ингибирования) сравнима с чувствительностью РТНГА с использованием эритроцитарного диагностикума на основе монАТ к ВЧ КРС.

Серодиагностика и ретроспективная диагностика. Для обнаружения AT используют РН, ВИЭОФ, РРГ и ELISA. Для серологического исследования берут кровь как можно раньше после установления клинических проявлений и повторно через 10-14 дн. Исследуют парные сыворотки крови не менее чем от 10 животных. ВНА и КСА у животных-реконвалесцентов обнаруживаются через 3-5 дн, поэтому чаще всего применяют РСК и РН. Ретроспективную диагностику чумы КРС проводят в очагах инфекции или при атипичном её течении на вакцинированном поголовье животных, имевших слабый поствакцинальный иммунитет, 4-кратное увеличение титра КСА и ВНА свидетельствует о наличии прошедшей инфекции.

РСК . Применяют чаще всего. На 3-4-й день после снижения температуры у животных обнаруживают КСА в титре от 1:10 до 1:40. На 21-30-й дн достигают максимума и удержи­ваются в течение 3 мес на уровне 1:80-1:160. Через 8 мес. титр их составляет 1:20-1:40.

PH . Можно ставить на кроликах, имея лапинизированный штамм. Учитывая дорого­визну метода, используют крайне редко. Реакция в культурах клеток с использова­нием адаптированных к ним штаммов - метод более простой и дешевый. Для выявления и титрования ВНА метод микротитрования не уступает пробирочному, но выгодно отличается от него меньшей чувствительностью к колебаниям дозы. Чтобы избежать цитотоксического и ингибирующего проявления, рекомендуется делать первоначальное разведение сыворотки 1:5. Количественную РН можно проводить в двух вариантах: 1) с постоянной дозой вируса (200-500 ТЦД 50) и двукратно возрастающими разведениями сыворотки; 2) с постоянной до­зой сыворотки (разведение 1:5-1:10) и 10-кратными разведениями вируса 10 -1 -10 -6 .

РТГА. В качестве АГ в этой реакции используют вирус кори.

Дифференциальная диагностика . Проводится по данным исследования вируссодержащего материала (гибридизационным тестом, биопробой, серологическими реакциями с видоспецифической сывороткой). В связи с тем, что в некоторых странах, чума КРС давно ликвидирована, при случайном заносе она может быть оши­бочно диагностирована как вирусная диарея или злокачественная катаральная горячка, что необходимо иметь в виду при дифференциальной диагностике чумы.

ИММУНИТЕТ И СПЕЦИФИЧЕСКАЯ ПРОФИЛАКТИКА

У переболевших животных образуется прочный, практически пожизненный иммунитет. Животные-реконвалесценты или привитые живыми вакцинами во время беременности так­же сообщают иммунитет потомству продолжительностью до 11 мес. Такой иммунитет раз­вивается в результате не только передачи AT с молозивом и молоком, но и проникновения вакцинного вируса в развивающийся эмбрион. Установлено снижение иммунного ответа на вакцину против чумы КРС у животных, перенесших экспериментальный тейлериоз.

Применение живых вакцин. В настоящее время для профилактики чумы КРС исполь­зуют живые культуральные вакцины из аттенуированных шт.TCRV, ЛТ и К37/70. Шт. ЛТ получен во ВНИИВВиМ Н.И. Митиным, В.Н. Сюриным и др. путем адаптации японского лапинизированного шт. ЛЗ ВЧ КРС в культуре клеток почки теленка. Вирус прошел 1271 пассаж на кроликах и 60 пассажей в культуре клеток, в том числе 8 пассажей методом предельных разведении, для выделения генетически однородной и стабильной популяции. Шт.1 ЛТ безвреден для КРС и овец различных породных групп и возрастов. Сухая вакцина ЛГ обладает более высокой терморезистентностью по сравнению с вакциной из шт. TCRV. Она является генетически стабильной ввиду длительного пассирования вируса через организм кролика, что гарантирует полную безвредность препарата для КРС.

Живые вакцины против чумы КРС исключительно эффективны и высокоэкономичны. У привитых животных может наблюдаться невысокая лихорадка, появляющаяся спустя 4-11 дн. после прививки и продолжающаяся 1-11 дн. После однократной прививки (100 ИД 100) иммунитет наступает через 72 ч и продолжается 7-8 лет. Для стран с жарким климатом разработана и изготовляется более терморезистентная вакцина. Использовали шт. Плоурайт, адаптированный к культуре клеток Vero и лиофилизированный с различными стабилизаторами. Получена вакцина, сохраняющая активность согласно рекомендации ФАО при 37°С в течение 4-х нед. Вакцину против чумы КРС можно использовать для иммунизации овец и коз, которые могут иметь субклиническую инфекцию. Японская вакцина из шт. Накамура III (лапинизированного) проявляет в ряде случаев абортогенные свойства. По дан­ным японских исследователей шт. LA-AKO успешно используется в качестве вакцинного, он индуцирует AT против шт. Kabete О LA-AKO, а сыворотка на шт. LA-AKO более пред­почтительна для определения и идентификации ВЧ КРС.

Положительно зарекомендовала себя вторая отечественная живая вакцина из шт. К-37/70, с помощью которой в 1991-1992 г. удалось оборвать вспышку инфекции в ряде районов Тувы. С использованием культуры клеток СПЖВ разработана более экономичная технология вакцины против чумы KPG из шт. К 37/70.

Инактивированные вакцины . Несмотря на общепризнанную эффективность живых вакцин против чумы КРС, предложена инактивированная ГОА-вакцина с сапонином. Все овцы, иммунизированные данной вакциной, как в цельном виде, так и в разведениях 1:3 и 1:9, противостояли контрольному заражению вирусом чумы КРС на 14-е сут. после вакцинации.

Инактивированные вакцины, по-видимому, необходимо использовать для создания бу­ферной зоны и на заключительном этапе искоренения инфекции после применения вирус-вакцины для ограничения возможного вирусоносительства. Инактивированная вакцина на основе аттенуированного шт. ЛТ ВЧ КРС, выращенного в перевиваемой клеточной линии почки сайгака, и применения в качестве инактиванта ионов меди, индуцирует достаточно напряженный иммунитет, вызывая образование ВНА, которые сохранялись в титре 1:19 в течение 12 мес. Испытания инактивированной вакцины против чумы КРС по срокам на­ступления иммунитета показали, что однократная вакцинация в дозе 3 мл защищает живот­ных от контрольного заражения на 3 и 5-е сут после иммунизации.

Генно-инженерные вакцины . При использовании достижений генной инженерии соз­даны новые типы вакцин: субьединичная, синтетическая и векторная или рекомбинангная. Наиболее перспективна рекомбинангная, состоящая из живого вируса (например оспы) или бактерий (Е.соli, дрожжи), в которых интегрирован ген, кодирующий протективный АГ ВЧ. Чаще для интеграции берут сайты тимидинкиназы или гемагглютинина (Н). В Японии скон­струированы 3 типа рекомбинантной вакцины. Вакцина, имеющая модифицированный ген Н с промотором МР7,5 К, наиболее иммуногенна. ВНА к вирусам оспы и чумы персистируют более года.

Серологическая оценка поствакцинального иммунитета. В результате сравни­тельного изучения эффективности 3 реакций (РН, РНГА и РТГА) для выявления AT у жи­вотных, иммунизированных культуральной вакциной против чумы, было установлено, что наиболее выраженная корреляция титров AT наблюдалась между РН и РТГА, взятых через 2-3 нед после вакцинации. В ответ на прививку живой вирусвакциной из шт. ЛТ КС и ВН AT обнаруживаются на протяжении года. Максимальный титр их через 1 мес/ достигает 1:80 и 1:160-1:640 соответственно. Через год после прививки титр AT соответственно снижается до 1:10-1:20 и 1:40-1:80. В ряде случаев ВНА обнаруживаются через 18 мес/ в титре 1:60-1:320 к 200 ТЦД 50 . Материнские AT сообщают иммунитет телятам на 6-7 мес., поэтому ак­тивную иммунизацию их можно проводить после этого срока. В тех случаях, когда титр ВНА и КСА равен 1:10 и выше, животные, как правило, устойчивы к экспериментальной инфекции ВЧ в дозе 10 3 ЛД 50 . Однако следует иметь в виду, что отсутствие КСА не свиде­тельствует об отсутствии специфического иммунитета, так как эти AT у вакцинированных и переболевших животных исчезают раньше, чем специфическая резистентность и ВНА. Нет также прямой корреляции между специфической резистентностью вакцинированных живот­ных и титром ВНА как в первые дни (3-5) после вакцинации, когда резистентность живот­ных обусловлена феноменом интерференции, так и в последующие, когда резистентность при отсутствии КСА и ВНА, обусловлена механизмами клеточного иммунитета.

Ветеринарно – санитарная оценка – больных и подозрительных по данному заболеванию на убой на пищевые цели не допускается.

Семейство: Poxviridae .

Таксономическая структура семейства.

Сeмейство: Poxviridae

Подсемейство: Chordopoxvirinae

Род:Orthopoxvirus , Parapoxvirus , Avipoxvirus , Capripoxvirus , Leporipoxvirus , Suipoxvirus , Molluscipoxvirus , Yatapoxvirus

Подсемейство: Entomopoxvirinae

Род: Entomopoxvirus A, Entomopoxvirus B, Entomopoxvirus C .

Характеристика вириона. Морфология. Вирион плеоморфный, чаще формы параллелепипеда: 220-450 нм (длина) х 140-260 нм (ширина) х 140-260 нм (толщина). Липопротеидная поверхностная мембрана с тубулярными или глобулярными субединицами (10-40 нм). Так же возможна овоидная форма вириона (250-300 нм (длина) х 160-190 нм (диаметр)), мембрана которого содержит спиральные филаменты (10-20 нм в диаметре). Поверхностная мембрана скрывает двояковогнутое или цилиндрическое ядро, состоящее из ДНК и белков (нуклеопротеиновый комплекс). Между поверхностной и коровой мембранами в вогнутостях присутствуют 1-2 латеральных тела. Зрелые внутриклеточные вирионы окружены мембраной, имеющей происхождение от аппарата Гольджи, и включающей вирусспецифические белки. Некоторые вирусы позвоночных (например, вирус оспы коров Cowpox virus ) могут быть сконцентрированы в виде телец-включений, тогда как другие (энтомопоксвирусы) могут быть локализованы разрозненно.

Вес частицы: 5 х 10 -15 г, плавучая плотность в буфере 1,16 г/см 3 , в сахарозе 1,25 г/см 3 , в CsCl и тартрате калия 1,30 г/см 3 , S 20 w 5000S.

Вирионы могут аггрегироваться в высокосолевых растворах. В большинстве случаев вирионы чувствительны к воздействию обычных детергентов, формальдегида, окислителей и температуре выше 40 о С. Некоторые представители устойчивы к воздействию эфира и сохраняют инфекционность после обработки трипсином. Поверхностная мембрана может быть удалена неионными детергентами и сульфгидрильными реагентами. В высушенном состоянии вирионы устойчивы длительное время при комнатной температуре..

Геном. ДНК. Одна линейная молекула. Ковалентно закрытая, двуспиральная. Длина 130-375 kbp. Составляет около 3% веса частицы.

Протеины. Протеины составляют около 90% веса частицы. Геном кодирует, 150-300 белков, около 100 из которых входят в состав вириона. Липопротеидная оболочка вириона содержит вирусспецифические полипептиды. Энтомопоксвирусы могут быть окружены вирусспецифическим мажерным структурным протеином - сфероидином. Ортопоксвирусы также могут быть внутри телец-включений, образованных одним протеином.

Липиды. Составляют около 4% веса частицы. Оболочка вирионов содержит гликолипиды, которые могут быть модифицированными липидамиклетки.

Углеводы. Составляют около 3% веса частицы. Неоторые вирусные протеины (напр. гемагглютинин оболочки ортопоксвирусов) содержат N- и C-ассоциированные гликаны.

Организация генома и репликация. Геном поксвирусов представлен молекулой линейной двуспиральной ДНК, иеющей ковалентно закрытые концы. Концевые шпильки включают две изомерных, неполностью сперенных, так называемых флип-флоп формы ДНК, образованных инвертированными комплементарными сиквенсами. В близи концов могут быть тандемные повторы разного размера. Репликация происходит, как правило, в цитоплазме. Проникновение в клетку внутриклеточного вируса и внеклеточного оболочечного вируса происходит разными путями. После адсорбции вириона проникновение в клетку зрелого внутриклеточного вируса происходит путем слияния плазматической мембраны и последующего высвобождения кора в цитоплазму, после чего продолжаются последующие этапы раздевания. Внеклеточные оболочечные вирионы, в отличие от внутриклеточных, для высвобождения кора должны обязательно пройти этап слияния с эндосомальными мембранами. Полиаденилированные, кэпированные первичные мРНК транскрипты, представляющие около 50% генома, первоначально синтезируются с обоих цепей ДНК за счет ферментов кора, включая вирускодируемую мультисубъединичную РНК полимеразу. Для последующей трансляции клеточными рибосомами происходит освобождение транскриптов из кора. Во время синтеза ранних протеинов, ингибируется синтез макромолекул клетки. Репродукция вируса в цитоплазме клеток сопровождается образованием базофильных (тип В) включений - вироплазмов.

Геном содержит близко расположенные ORFs, без интронов, некоторые из которых могут частично перекрывать предыдущую за счет вирусспецифических промоторов, которые регулируют транскрипцию трех классов генов. Первый класс генов (ранние гены) экспрессируется с частично раздетого вириона до репликации ДНК (они кодируют многие неструктурные протеины, включая энзимы, участвующие в репликации генома и модификации ДНК, РНК и протеинов, участвующих в подавлении ответа хозяина). Ранние гены кодируют также промежуточные транскрипционные факторы. Промежуточные гены (кодирующие поздние транскрипционные факторы) экспрессируются во время периода репликации ДНК и необходимы для последующей поздней транскрипции генов. Поздние гены экспрессируются во время пост-репликативной фазы (они, в основном, кодируют вирусные структурные протеины, но могут также кодировать и ранние транскрипционные факторы). Несмотря на то, что репликация происходит в цитоплазме, есть свидетельства о необходимости участия ядерных протеинов в пост-репликативной транскрипции.

мРНК кэпированы, полиаденилированы по 3’-концу, но не сплайсированы. Многие промежуточные, поздние и некоторые ранние мРНК имеют поли(А)-тракт, который предшествует кодируемой мРНК. Ранний синтез протеинов обычно снижается во время экспрессии поздних генов, но некоторые гены экспрессируются с промоторов как ранней, так и поздней активности. Определенные протеины проходят посттрансляционную модификацию (протеолитическое разрезание, фосфорилирование, гликозилирование, рибозилирование, сульфатирование, ацилирование, пальмитилирование и миристилирование). Протеолитическое разрезание поздних протеинов необходимо для морфогенеза вириона.

Репликация геномной ДНК происходит, за счет вирусных энзимов. Репликация ДНК проходит по механизму самопраймированного унинаправленного смещения цепи, при котором образуются канкатомерные репликативные промежуточные формы, освобождающиеся путем специфического разрезания до одинаковх по размеру ДНК, которые, затем, ковалентно закрываются. Возможна гентическая рекомбинация внутри рода, которая может происходить между дочерними молекулами во время репликации. Негенетическая реактивация генома, приводящая к появлению инфекционного вируса, была показана на внутри- и межродовом уровне в подсемействе Chordopoxvirinae .

Морфогенез вируса начинается вслед за репликацией ДНК и экспрессией ранних, промежуточных и поздних генов. Сборка частиц инициируется образованием серповидных мембранных структур. Реплицированные конкатамерные ДНК, представляющие геномную единицу, упаковываются в незрелую вирусную частицу, которая, затем, претерпевает процесс созревания с образованием зрелой внутриклеточной вирусной частицы, обладающей (при условии выхода из клетки) инфекционностью. Часть зрелых внутриклеточных вирионов получают оболочку, представляющую собой модифицированную мембрану аппарата Гольджи, транспортируется на периферию клетки, где слияние оболочечного вириона с плазматической мембраной приводит к высвобождению внеклеточных оболочечных вирионов. Таким образом, оболочечные вирионы приобретают клеточные липиды и дополнительные вирусспецифические протеины, включая гемагглютинирующий протеин. Оболочка расположена близко к поверхностной мембране. Так как инфекционностью обладают как внеклеточные оболочечные, так и внутриклеточные вирионы, внешние антигены таких вирусов различны, что определяет прикрепление таких вируса к разным клеточным рецепторам и разные механизмы раздевания.

Вирусная ДНК и несколько протеинов организуются у всех инфекционных вирионов в нуклеопротеиновый комплекс кора. Внутриклеточные зрелые вирионы имеют окружающую поверхностную мембрану, латеральные тела и нуклеопротеиновый коровый комплекс. Кор вируса вакцины (Vaccinia virus ) покрыт мембраной толщиной 9 нм с регулярной субъединичной структурой, и имеет двояковогнутую форму, что связано, вероятно, м наличием латеральных тел (или артефактами подготовки пробы). Поверхностная липопротеиновая мембрана, покрывающая кор вируса вакцины и латеральные тела, имеет толщину около 12 нм и содержит неодинаковые поверхностные трубочки, сформированные мелкими глобулярными субъединицами. Во время естественной инфекции распространение вируса происходит, в основном, за счет вирусных частиц, высвобождающихся из клеток (внеклеточные оболочечные вирионы).

Антигенные свойства. Внутри каждого рода подсемейства Chordopoxvirinae отмечается перекрестная реактивность. Нейтрализующие антитела родоспецифичны. Антитела к нуклеопротеину имеют широкую перекрестную реактивность. Ортопоксвирусы имеют ГА антигены, которые в других родах встречаются редко.

Биологические особенности. Пути распространения инфекции (для подсемейства Chordopoxvirinae ): аэрозольно, контактно, переносчиками (механически). Представители подсемейства Entomopoxvirinae распространяются членистоногими (механически). В природе спектр патогенности узок, хотя в лабораторных условиях число восприимчивых биологических систем значительно выше. Многие поксвирусы позвоночных вызывают макуло-папуллезную, везикулярную сыпь после системной или локальной инфекции. Резервуарами в природе поксвирусов, инфицирующих людей, являются различные виды позвоночных, кроме вируса контагиозного моллюска и ортопоксвируса Variola virus (вирус натуральной оспы - small pox, искоренен). Вирусы данного семейства могут быть подразделены на основе способности к образованию внутриклеточных включений: Chordopoxvirinae – ацидофильные (тип А) тельца-включения; Entomopoxvirinae – включения или сфероиды. Включения могут защищать таких поксвирусов при неблагоприятных условиях.

Нейтрализующие антитела и клеточно-опосредованный иммунитет играет решающию роль в борьбе с поксвирусными инфекциями. Реинфицирование случается редко, и, обычно, легко протекает. Контагиозный моллюск может возникать вновь после заражения других областей кожи вирусом из первичных очагов.

Подсемейство: Chordopoxvirinae .

Включает поксвирусы позвоночных, имеющих форму параллелепипеда или овоида, с низким содержанием G+C (30-40%), за исключением парапоксвирусов (64%) и вируса контагиозгого моллюска (63%). В роде наблюдаются широкие перекрестные реакции и перекрестная защита. Эта особенность менее заметна среди авипоксвирусов. Некоторые вирусы образуют оспины на хорион-аллантоисной оболочке (ХАО) куриных эмбрионов.

Род: Orthopoxvirus . Типовой вид : Vaccinia virus (VACV) (вирус вакцины).

Характерные особенности. Вирирон имеет форму параллелепипеда, 200х200х250 нм. Устойчив к воздействию эфира. Наблюдается широкая перекрестная реактивность между вирусами. Инфицированные клетки синтезируют гемагглютинин, который обладает гемадсорбирующей и гемагглютинирующей активностью в отношении эритроцитов некоторых видов птиц и разрушению оболочки внеклеточных оболочечных вирусов. Сайты нейтрализации внеклеточных вирионов отличаются от таковых внутриклеточных вирионов. В природе спектр патогенности узок, хотя в лабораторных условиях число восприимчивых биологических систем (животных и культур клеток) значительно выше.

Размер ДНК 170-250 kbp, G+C состав 36%. Наблюдается широкая перекрестная гибридизация на внутри- и межродовом уровне.

Полиморфизм генов, кодирующих гемагглютинин и белок-включение типа А; морфологические особенности оспин; максимальная температура, поддерживающая культивирование на куриных эмбрионах. В ряде случаев важен учет эклогических ниш и спектра естественных хозяев. Дополнительно имеет значение анализ полиморфизма длин рестрикционных фрагментов (RFLP) концевыхучастков вирусной ДНК за пределами общих генов.

Виды (9 видов):

Название вида вируса	Название на русском языке	№ генома в генбанке	Аббревиатура	Резервуар
Camelpox virus	Вирус оспы верблюдов			Верблюды
Cowpox virus	Вирус оспы коров			Грызуны, кошки,КРС,люди
Ectromelia virus (Mouse poxvirus)	Вирус эктромелии (Вирус оспымышей)			Не известен
Monkeypox virus	Вирус оспы обезьян			Грызуны, приматы,люди
Raccoonpox virus	Вирус оспы енотов			Cеверо-Американский енот
Taterapox virus	Вирус оспы Африкан. песчанки			Африканская песчанка
Vaccinia virus Buffalopox virus	Вирус вакцины Вирус оспы буйволов Вирус оспы кроликов			Естественного резервуара нет Буйволы, КРС, человек Кол.кролики,естественный резервуар не известен
Variola virus	Вирус оспы человека			Человек, в природе искоренен
Volepox virus	Вирус оспы мышей-полевок			Калифорнийская мышь и полевка

Предполагаемые виды (2): Skunpox virus (SKPV); резервуар – Северо-Американский скунс. Uasin Gishu disease virus (UGDV); резервуар – Центрально-Африканская лошадь.

Род: Parapoxvirus . Типовой вид : Orf virus (ORFV) (вирус Orf, вирус контагиозного пустулезного дерматита, вирус контагиозной эктимы).

Характерные особенности. Вирион: овоидный, 200-300 нм х 140-170 нм, поверхностные филаменты упорядоченно пересекаются и имеют вид накрученной нити. Размер ДНК 130-150 kbp, G+C состав 64%. Большинство видов перекрестно реагируют между собой в ДНК-гибридизации и серологических реакциях. Перекрестная гибридизация и карта ДНК свидетельствует о широкой дивергенции сиквенсов разных членов рода, более высокой, чем у членов рода ортопоксвирусов. Как правило, все вирусы были выделены от копытных (чаще одомашненных). Имеют узкий спектр восприимчивых культур клеток.

Критерии подразделения на виды внутри рода. Наиболее пригодным критерием при видовой идентификации является определние вида животного-хозяина. Вместе с этим, используют результаты анализа полиморфизма длин рестрикционных фрагментов (RFLP) и перекрестной гибридизации (особенно по концевым участкам генома).

Виды (5 видов):

Название вида вируса	Название на русском языке	Аббре-ура	Резервуар
Bovine papular stomatitis virus	Вирус папуллезного стоматита КРС		КРС, человек
Orf virus* (Contagious pustular dermatitis virus) (Contagious ecthyma virus)	Вирус Orf (Вирус контагиозного пустулезного дерматита) (Вирус контагиозной эктимы).		Овцы, козы, олени, человек
Parapoxvirus of red deer in New Zealand	Парапоксвирус красных оленей Новой Зеландии		Красные олени
Pseudocowpox virus (Milker’s nodule virus) (Paravaccinia virus)	Вирус псевдооспы коров (Вирус узелков доильщиц) (Вирус паравакцины)		КРС, человек
Squirrel parapoxvirus	Вирус параоспы белок		Нет данных

Примечание: * - номер генома в генбанке M30023.

Предполагаемые виды (3): Auzduk disease virus (Camel contagious ecthyma virus) (вирус болезни Ауздук, вирус контагиозной эктимы верблюдов), Chamois contagious ecthyma virus (вирус контагиозной эктимы серн), Sealpox virus (вирус оспы тюленей).

Род: Avipoxvirus . Типовой вид : Fowlpox virus (FWPV) (вирус оспы кур).

Характерные особенности. Вирион кирпичеобразный (330х280х200 нм). ДНК 300 kbp. При обработке эфиром инфекционность не снижается. В состав рода входят вирусы птиц, способствующие возникновению пролиферативных кожных поражений (кожная форма) и/или поражений желудочно-кишечного и респираторного (верхние дыхательные пути) трактов (дифтеритическая форма). Перекрестная защита различна. Распространение вирусов происходит с участием членистоногих (механический перенос), при непосредственном контакте или аэрозольно. В серологических тестах просматривается значительная перекрестная активность. Вирусы продуцируют тельца-включения А-типа, со значительным количеством липидов. Продуктивная инфекция вирусов наблюдается в культурах клеток птиц. У млекопитающих и в культурх клеток млекопитающих инфекция, вызванная вирусами данного рода протекает абортивно. Вирусы распространены везде.

Критерии подразделения на виды внутри рода. Для видовой идентификации используют такие критерии, как характеристика болезни, хозяин и экологическая ниша, ростовые характеристики при культивировании на хорион-аллантоисной мембране, спектр восприимчивых культур клеток. Предлагается использовать результаты анализа полиморфизма длин рестрикционных фрагментов (RFLP) и перекрестной гибридизации.

Виды (10 видов):

Название вида вируса	Название на русском языке	№ генома в генбанке
Сanarypox virus	Вирус оспы канареек
Fowlpox virus	Вирус оспы кур
Juncopox virus	Вирус оспы юнко
Mynahpox virus	Вирус оспы майн
Pigeonpox virus	Вирус оспы голубей
Psittacinepox virus	Вирус оспы попугаев
Quailpox virus	Вирус оспы перепелов
Sparrowpox virus	Вирус оспы воробьев
Starlingpox virus	Вирус оспы скворцов
Turkeypox virus	Вирус оспы индеек

Предполагаемые виды (3): Crowpox virus (CRPV) Peacockpox virus (PKPV) Penguinpox virus (PEPV).

Род: Capripoxvirus . Типовой вид : Sheeppox virus (SPPV) (вирус оспы овец).

Характерные особенности. Вирион имеет форму параллелепипеда, 300х270х200 нм. Вирус чувствителен к воздействию эфира и хлороформа. Размер ДНК 154 kbp. Род включает вирусы овец, коз и КРС. Вирус распространяется членистоногими (механически) и контактно. Наблюдается значительная перекрестная защита и реактивность на антигенном и генетическом (ДНК-гибридизация) уровнях.

Критерии подразделения на виды внутри рода. Только по результатам RFLP.

Виды (3 вида):

Название вида вируса	Название На русском языке	Аббревиатура
Goatpox virus	вирус оспы коз
Lumpy skin disease virus	вирус бугорчатки
Sheeppox virus	вирус оспы овец

Род: Leporipoxvirus .

Типовой вид : Myxoma virus (MYXV) (вирус миксомы).

Характерные особенности. Вирион имеет форму параллелепипеда, 300х250х200 нм. Вирус чувствителен к воздействию эфира. Размер ДНК 160 kbp, G+C состав 40%. Вирус распространяется контактно и членистоногими (механически). Вирусы миксомы и фибромы вызывают у хозяев образование локальных доброкачественных опухолей. Вирус миксомы вызывает тяжело протекающую болезнь у Европейских кроликов. Перекрестное родство (антигенное и генетическое) и защита хорошо выражены.

Критерии подразделения на виды внутри рода. Результаты РН (ингибирование образования бляшек),результаты анализа перекрестной защиты на животных, РДП. Учитываются экологические ниши, спектр восприимчивых животных, проявление болезни, характеристики образуемых бляшек, спектр восприимчивых клеточных культур и, как дополнение, RFLP.

Виды (4 вида): Предполагаемые виды: нет.

Название вида вируса	Название на русском языке	№ генома в генбанке	Аббревиатура
Hare fibroma virus	Вирус фибромы зайцев
Myxoma virus	Вирус миксомы
Rabbit fibroma virus	Вирус фибромы кроликов
Squirrel fibroma virus	Вирус фибромы белок

Род: Suipoxvirus . Типовой вид : Swinepox virus (SWPV) (вирус оспы свиней).

Характерные особенности. Вирион имеет форму параллелепипеда, 300х250х200 нм. ДНК (175 kbp) с инвертированными концевыми последовательностями в 5 kbp. Вирус образует бляшки в культуре клеток почки или тестикул свиньи (один пассаж в течение 3 дней при 37 о С). Вирус вызывает бессимптомную генерализованную болезнь кожи у свиней, локализующуюся в эпителии и региональных лимфоузлах. Обычно вируснейтрализующие антитела не обнаруживаются. Вирусы распространены повсеместно. Предполагается возможность механического переноса членистоногими (вши). Экспериментальная инфекция воспроизводится у кроликов.

Вид (1): Swinepox virus (Вирус оспы свиней) [М59931, 64000] (SWPV).

Род: Molluscipoxvirus . Типовой вид : Molluscum contagiosum virus (MOCV).

Характерные особенности. Вирион имеет форму параллелепипеда, 320х250х200 нм. Плавучая плотность в CsCl 1,288 г/см 3 . Размер ДНК 188 kbp, G+C состав 60%. Отмечена сильная перекрестная ДНК-гибридизация. В первичных культурах клеток (из тканей органов человека или животных) накапливается плохо. Вирус распространяется контактно среди детей и подростков, чаще половым путем. Часто инфекция возникает как оппортунистическая у людей, больных СПИДом или с экземой. Инфицированные клетки увеличены, с цитоплазматическими включениями. Инфекция может рецидивировать, а проявление изменяться при бактериальном коинфицировании.

Критерии подразделения на виды внутри рода. Вид только один.

Вид (1): Molluscum contagiosum virus (вирус контагиозного моллюска) (MOCV).

Предполагаемые виды: не имеющие названия вирусы лошадей, ослов и шимпанзе.

Род: Yatapoxvirus . Типовой вид : Yaba monkey tumor virus (YMTV).

Характерные особенности. Вирион кирпичеобразный, 300х250х200 нм. Размер ДНК 146 kbp, G+C состав 33%. Yaba monkey tumor virus вызывает у приматов развитие гистиоцитом и опухолеподобных масс мононуклеарных клеток. Вирусы выделялись от содержащихся в неволе обезьян и экспериментально инфицированных кроликов. Сообщалось о лабораторном заражении людей. Несмотря на широкую перекрестную ДНК-гибридизацию, на основе рестрикционных карт предполагаются значительные различия сиквенсов между Tanapox virus и Yaba monkey tumor virus . Tanapox virus вызывает у приматов локализованные изменения, являющиеся следствием механического переноса вируса насекомыми в период сезона дождей в африканских лесах. Поражения обычно содержат вирионы с двухслойной оболочкой, окружающей вирусную мембрану.

Критерии подразделения на виды внутри рода. Вид только один, но данные RFLP, свидетельствуют о существовании двух вариантов. Виды (2 вида):

Название вида вируса	№ генома	Аббревиатура
Tanapox virus
Yaba monkey tumor virus

Подсемейство: Entomopoxvirinae .

Характерные особенности. Вирусы насекомых. Вирионы имеют различные морфологические формы. Размер 70-250 х 300 нм. Вирионы содержат 1-2 латеральных тела. G+C состав вирусной ДНК 20%. Вирион включает не менее 4-х ферментов, аналогичных вирусу вакцины. Вирионы некоторых типов имеют на поверхности глобулярные выступы. Общая колинеарность по коровым генам отличается от таковой представителей Chordopoxvirinae , и является главным характерным признаком подсемейства. Серологического родства с хордопоксвирусами нет. Реплицируются в цитоплазме клеток насекомых (гемоцитах, и культуре клеток жировой ткани (adipose)). Зрелые вирионы обычно формируют сфероиды, включающие белок сфероидин. Подразделение на роды основано на морфологии вириона, спектре хозяев, размере генома.

Род: EntomopoxvirusA 7видов.Типовой вид: Melolonta melolonta entomopoxvirus (MMEV).

Род: EntomopoxvirusB 14 видов.Типовой вид: Amsacta moorei entomopoxvirus (AMEV)].

Род: EntomopoxvirusC 6 видов.Типовой вид: Chironomus luridus entomopoxvirus (CLEV).

Неклассифицированные вирусы семейства (15).

Название вируса	Аббревиатура
California harbor seal poxvirus		Тюлени, собаки и кошки
		Мыши (Бразилия)
		Дельфины
		Москиты, человек (спорно)
Grey kangaroo poxvirus		Серые кенгуру
Marmoset poxvirus		Мартышки
Molluscum-like poxvirus
Mule deer poxvirus		Чернохвостые олени (США)
Nile crocodile poxvirus		Нильские крокодилы
		Сумчатые (marsupial) (Австралия)
Red kangaroo poxvirus		Красные кенгуру
Salanga poxvirus		Саланга Aethomus medicatus (ЦАР) 2
Spectacled caiman poxvirus	SPV	Очковые кайманы
		Мышы полевки (Туркмения)
		Комары Aedes sipsoni (ЦАР) 2

Примечание: 1 – номер генома в генбанке , 2 – ЦАР – Центрально-Африканская Республика.

Чума мелких жвачных (ЧМЖ) - высоко контагиозная вирусная болезнь овец и коз, протекающая преимущественно остро или подостро, характеризующаяся лихорадкой, язвенными поражениями слизистых оболочек ротовой и носовой полостей, конъюнктивитами, геморрагическим гастроэнтеритом, поражением лимфоидной системы и развитием пневмонии.

Первые сведения о заболевании среди мелких жвачных относятся к ХΙХ веку, при этом описания клинических признаков болезни среди овец и коз чаще всего встречались по аналогии с описанием болезни у КРС. Ввиду сходства по клиническим признакам заболевания с чумой крупного рогатого скота, ее называли чумой мелких жвачных. Более детальные исследования показали, что заболевания под такими названиями по клиническим и патологической картине соответствовали чуме мелких жвачных. Официальное название болезни чума мелких жвачных было принято в 1980 году, возбудитель ЧМЖ был выделен в отдельную нозологическую группу.Человек чумой мелких жвачных не болеет.

Чуму мелких жвачный животных вызывает РНК - содержащий вирусотряда Mononegavirus, семейства Paramyxoviridae, рода Morbillivirus. Он чувствителен к физико-химическим факторам и относится к слабо устойчивым вирусам. Возбудитель ЧМЖ также чувствителен к повышенным температурам, однако некоторые штаммы вируса сохраняют инфекционную активность при 60°С в течение 60 минут. Вирус быстро инактивируется под воздействием ультрафиолетовых и прямых солнечных лучей. При температуре -20°С сохраняется до 2-6 мес., при комнатной температуре погибает через 3-4 дня. В летнее время в трупах вирус погибает через 20-30 часов, однако в костном мозге вирус сохраняется до 30 дней. В навозе вирус гибнет через 30 часов, на пастбище через 36 часов. В соленом мясе вирус сохраняется до 28 суток.

Вирус ЧМЖ чувствителенк растворам:2%-ные растворы фенола и едкого натрия инактивирует вирус за 24 часа, 20 % эфир-за 12 часов. При проведении противоэпизоотических мероприятий используют следующие дезинфектанты: горячий 2% раствор едкого натрия, 20% взвесь свежегашеной извести, осветленный раствор хлорной извести (содержанием активного хлора не менее 4%), или гипохлорит натрия, содержанием не менее 2% активного хлора, из расчёта 1,5 л раствора на 1м² площади, 2% раствор формальдегида, 1% раствор формалина для пароформалиновой камеры. В кислой среде (рН˂ 3,0) вирус инактивируется за 3 часа.

К чуме мелких жвачных животных восприимчивы домашние, а также дикие козы и овцы. Причем козы болеют чаще итяжелее, чем овцы. Наиболее предрасположены к данному заболеванию западноафриканские карликовые козы и некоторые гибридные породы этих животных. Ягнята и козлята, в силуне полностью сформировавшегося иммунитета, проявляют высокую чувствительность к вирусу. Восприимчивость к болезни также зависит от условий содержания и кормления, физиологического состояния (суягность и др.), наличия явных или скрытых признаков проявления других заболеваний. Кроме выше перечисленных видов животных к данной инфекции восприимчивы горные козлы, газели, серны,ларистанские овцы, болезнь у которых может завершаться летальным исходом. Источником ЧМЖ являются как больные, так и инфицированные животные, находящиеся в инкубационном периоде болезни. Из организма животных вирус выделяется со всеми экскретами и секретами. Аэрогенный путь передачи возбудителя является основным, но кроме него возможны также контактный и алиментарный. Так как вирус малоустойчив во внешней среде, передача возбудителя осуществляется в основном при непосредственном контакте между больными и восприимчивыми животными.

Механический перенос вируса возможен через руки и одежду обслуживающего персонала, корм, воду, подстилку, транспорт.После алиментарного заражения вирус быстро проникает в кровь и разносится по всему организму. В пищеварительном тракте происходит набухание и гиперемия слизистых оболочек, эпителий которых неркотизируется, отслаивается, проявляются язвы и эрозии. Вследствие тяжелого поражения слизистой оболочки желудочно - кишечного тракта резко нарушается пищеварение, развивается диарея.

Инкубационный период при чуме жвачных составляет 6-15 дней. Течение болезни у коз - сверхострое и острое, у овец - острое и подострое. При сверхострой форме у коз наблюдают повышение температуры тела до 40-42°С, угнетение, отсутствие аппетита, истечение из носа, слезотечение, чихание, диарею. Продолжительность болезни - 4-5 дней. У большинства больных смерть наступает внезапно.

Острое течение у коз и овец характеризуется теми же признаками, что и сверхострое течение, однако болезнь длится 8-10 дней. Появляется кашель, на слизистой оболочке ротовой и носовой полости развиваются язвы, очаги некроза, из носа выделяются вначале серозные, а затем серозно-гнойные истечения. У самок наблюдают воспаление влагалища, у стельных животных - аборты. Заболевание часто заканчивается переходом в подострую форму болезни или гибелью.

При подостром течении у овец отмечают лихорадку перемеживающегося типа, некроз и язвы вокруг ноздрей, ротовой полости, при осложненных формах - пневмонию, диарею, истощение и обезвоживание организма, парезы и параличи конечностей. В тяжелых случаях больные животные погибают через 2-3 недели. Вирус вызывает разрушение эпителия дыхательных путей, желудочно-кишечного тракта и лимфоидных органов.

У коз, овец чаще всего отмечают абортивную или бессимптомную форму болезни.

Труп истощен, кожа в области бедер и хвоста загрязнена фекалиями. Подкожная клетчатка отечная. Кровь водянистая темного цвета, плохо свертывается.Обнаруживают отечность стенок тонкого отдела кишечника, гиперемию, крупозно-геморрагическое воспаление и изъявление слизистых оболочек, фибринозный выпот в просвет кишечника. Печень глинистого цвета, дряблая. Некротические участкии язвы вокруг ноздрей, ротовой полости.

При возникновении заболевания (ЧМЖ) проводятся мероприятия по ликвидации чумы мелких жвачных животных в РФ, осуществляют в соответствии инструкцией по чуме крупногорогатого скота, утвержденной Главным управлением ветеринарии СССР в 1991 году, а также по рекомендациям МЭБ.

Основой профилактики является недопущение заноса возбудителя болезни из неблагополучных стран инфицированными животными. Для этого создают иммунный пояс на глубину адмистративного района (не менее 30 км) путем ежегодной плановой иммунизации всего находящегося в зоне поголовья мелкого рогатого скота. При непосредственной угрозе возникновения ЧМЖ создают в установленном порядке специальные комиссии по борьбе с этой болезнью,которые определяют перечень необходимых работ по упреждениюраспространения и ликвидации болезни в случае ее заноса, осуществляют контроль за их выполнением в эпизоотическом очаге, неблагополучном пункте и угрожаемой зоне. Снятие карантина проводят по истечении 21 суток со дня гибели или убоя последнего заболевшего в неблагополучном пункте животного с проведением комплекса ветеринарно-санитарных мероприятий и ликвидации очага инфекции.

Для специфической профилактики чумы мелких жвачных в настоящее время используются эффективные вакцинные препараты, в том числе вакцина, разработанная в ГНУ ВНИИВВиМРоссельхозакадемии.

Чума мелких жвачных (псевдочума крупного рогатого скота; Peste des Petits Ruminants -франц.) - вирусная болезнь овец и коз, протекает остро и подостро, характеризуется некротическим стоматитом и катарально-геморрагическими поражениями кишечника и лимфоидной системы.

Распространенность . Болезнь известна с 40-х годов (вероятно, с 1942 г.) и впервые была зарегистрирована среди овец и коз на территории Западной Африки. Возбудитель выделен в 1956 г. и вначале идентифицирован как штамм вируса чумы крупного рогатого скота. В естественных условиях он адаптировался к организму коз и овец и приобрел для них вирулентность, почти аналогичную для вируса чумы крупного рогатого скота. Позже эпизоотии чумы мелких жвачных наблюдали (1958-1960) в Нигерии (местечко Ката) с высокой летальностью среди овец и коз (до 20-40%). Затем эпизоотии болезни вновь были зарегистрированы в 1965 и 1968 гг. в Нигерии среди коз, но широко не распространились.
В настоящее время считают, что чума мелких жвачных - самостоятельная болезнь, протекает энзоотически, обычно в таких странах, как Нигерия, Сенегал, Берег Слоновой Кости.

Возбудитель - вирус, по морфологии, антигенному составу и иммунобиологическим свойствам близок к вирусу чумы крупного рогатого скота и по этим критериям отнесен к семейству парамиксовирусов, род морбиливирус.

Эпизоотологические данные . К вирусу восприимчивы овцы и козы. Возбудитель может передаваться респираторным или алиментарным путем при прямом контакте или через загрязненные корма и предметы ухода за животными, инфицированные экскретами и секретами больных животных, как правило, содержащими вирус в течение всего острого периода болезни.

Клинические признаки . Чума у овец и коз протекает остро и подостро. Инкубационный период - от 6 до 15 дней, в зависимости от дозы и вирулентности вируса.

При остром течении болезнь начинается повышением температуры тела до 41-41,5°С , беспокойством животных. Затем отмечают угнетение общего состояния, ухудшение или отсутствие аппетита. Носовое зеркальце становится сухим, шерсть тускнеет, слизистые оболочки воспалены. В зоне воспаления слизистых оболочек ротовой и носовой полостей вначале появляются зоны гиперемии, затем очаги некроза, на месте которых образуются язвы. Истечение из носа и ротовой полости сначала слизисто-серозное, затем гнойное с гнилостным ихорозным запахом.

Дыхание затруднено, появляются признаки пневмонии. На 5 - 10-й день болезни животные, как правило, погибают.

При подостром течении болезнь развивается медленнее и первые признаки появляются только на 5-10-е сутки в виде интермитирующей лихорадки, легкого угнетения и серозного истечения из носовой и ротовой полостей. На 15-18-й день лихорадка достигает апогея, появляются признаки пневмонии (в результате осложнения секундарной микрофлорой) и поражения желудочно-кишечного тракта (диарея). При летальном исходе эти признаки прогрессируют, наступает обезвоживание организма, и животное погибает через 2-3 недели от начала болезни. При благоприятном исходе признаки постепенно затухают, происходит заживление язв и животные выздоравливают.

Патологоанатомические изменения . В основном их регистрируют в желудочно-кишечном тракте. Слизистая оболочка ротовой полости воспалена и изъязвлена. Язвы с неровными краями с некрозом в центре и покрыты гнилостным налетом. Резкие изменения с изъязвлением слизистых оболочек наблюдают в двенадцатиперстной кишке и при входе в отдел толстых кишок в области пейеровых бляшек. В отдельных случаях отмечают бронхопневмонию, воспаление слизистых оболочек верхних дыхательных путей. В лимфатических узлах (портальных, заглоточных, интерстициальных и т. д.) поражения наблюдают в виде кровоизлияний и очаговых некрозов. При гистологическом исследовании в клетках эпителия ротовой полости, кишечника и лимфатических узлов обнаруживают внутриядерные и цитоплазматические включения (A. Rowland, P. Bourdin, 1970).

Диагностика . При типичном течении болезни диагноз ставят на основании клинических симптомов и патоморфологических изменений. Для лабораторных исследований берут пробы органов и тканей больных животных или сыворотки от переболевших. Содержание специфических антигенов или антител в исследуемых материалах устанавливают с помощью РСК, РДП и МФА. В сомнительных случаях ставят биопробу на козлятах 2-4-месячного возраста.

Профилактика и меры борьбы . В неблагополучных зонах по чуме мелких жвачных восприимчивым животным прививают живую культуральную вакцину против чумы крупного рогатого скота (штамм TCRV) или аттенуированный вирус чумы мелких жвачных (51 пассаж в культуре клеток эмбриона овец). Препараты создают иммунитет продолжительностью более одного года.

При появлении болезни в новых очагах уничтожают всех больных и подозреваемых в заражении животных. В угрожаемой зоне крупному рогатому скоту, овцам и козам прививают одну из указанных вакцин и накладывают карантин. Он предусматривает ограничение вывоза животных (овец и коз) из неблагополучной зоны в течение 2 месяцев.

Ввоз животных разрешается через 14 дней после прививки. Все продукты животноводства обеззараживают и используют на месте.

ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ ВЛАДЕЛЬЦАМ ЖИВОТНЫХ!

Для недопущения этого опасного заболевания необходимо:

– не допускать приобретения животных без ветеринарных сопроводительных документов, подтверждающих их здоровье;

– приобретать животных только из благополучных хозяйств.

– карантинировать в течение 30 дней ввезённых животных для проведения необходимых исследований и обработок;

– регистрировать животных в сельских администрациях и государственной ветеринарной службе для получения идентификационного номера;

– оборот, перемещение, сдачу на убой, выгон, размещение на пастбище, перегруппировки животных, реализацию животноводческой продукции производить только с ведома и под контролем госветслужбы;

– обо всех случаях подозрения по заболеванию или падежа животных своевременно информировать ветеринарную службу.

УДК 619: 616.98:578.823.1.

Черных О.Ю. ГБУКК"Кропоткинская краевая ветеринарная лаборатория", г. Кропоткин
Мищенко А.В., Мищенко В.А. ФГБУ "ВНИИЗЖ", г. Владимир
Шевкопляс В.Н. Департамент ветеринарии Министерства сельского хозяйства Российской Федерации, г. Москва
Джаилиди Г.А. Государственное управление ветеринарии Краснодарского края, г. Краснодар
Дресвянникова С.Г. ГКУ КСББЖ "Краснодарская", г. Краснодар

Чума мелких жвачных животных (далее, ЧМЖ) - это трансграничная, эмерджентная, контагиозная вирусная болезнь овец и коз, характеризующаяся лихорадкой (40,0 - 42,0°С), диареей, анорексией, язвенно-некротическими поражениями слизистой оболочки ротовой и носовой полостей, конъюнктивитами, гнойными истечениями из глаз и носа, геморрагическим гастроэнтеритом, пневмонией и поражением органной иммунной системы.

Официальное название болезни чума мелких жвачных (Peste des petits ruminants) было принято в 1980 году на Международном Симпозиуме (Нигерия), а возбудитель ЧМЖ был выделен в отдельную нозологическую группу, и в 1991 году он был отнесен в род морбилли-вирусов семейства Paramixoviridae .

Возбудителем чумы мелких жвачных животным является РНК-содержащий вирус, размером 120-300 нм, относящийся к роду Morbilivirus семейства Paramixoviridae. Все вирусы семейства Paramixoviridae не устойчивы во внешней среде. Возбудитель ЧМЖ родственен вирусу чумы крупного рогатого скота. Однако, по данным молекулярно-генетических и иммунобиологических исследований, установлено, что вирусы чумы крупного рогатого скота и чумы мелкого рогатого скота указанные патогены рассматриваются как самостоятельные нозоединицы. На основании данных филогенетического анализа нуклеотидной последовательности генома возбудителя, штаммы вируса ЧМЖ формируют четыре филогенетические группы, возбудители трех были обнаружены в пробах из стран Африки. Вирусы генотипов 1 и 2 были выявлены в пробах патологического материала из стран Западной Африки. Вирусы 3 генотипа циркулируют на территории Восточной Африки. В четвертую группу входят возбудители, выделенные из патологического материала от животных индийского субконтинента, Ближнего и Среднего Востока. Все изоляты вируса ЧМЖ, выделенные во время вспышек в различных районах Турции и Ирана, принадлежат к четвертой филогенетической линии и имеют тесное родство с вирусами из стран Ближнего и Среднего Востока . Результаты филогенетического анализа штамма вируса, выделенного от больных чумой мелких жвачных из Таджикистана, Киргизии, Казахстана и Узбекистана показали, что указанный возбудитель относится к 4 линии . 12 января 2016 года на овцеводческой ферме района Варкетили Грузии было выявлено заболевание 1-2-х месячных ягнят. У больных животных были выявлены эрозионные поражения в ротовой полости, на слизистой языка, деснах и носовом зеркале. В пробах патологического материала в справочной лаборатории в Пирбрайте (Англия) был обнаружен вирус чумы мелких жвачных животных. Возбудитель относится к 4 генотипу, куда входят возбудители, выделенные из патологического материала от животных индийского субконтинента, Ближнего и Среднего Востока . Вирус чумы мелких жвачных животных легко разрушается во внешней среде. Оптимальная величина рН для возбудителя ЧМЖ составляет 7,3±0,2 . Нагревание до 60°С убивает вирус немедленно. В условиях комнатной температуры вируссодержащая цитратная кровь сохраняет активность в течение 4-6-ти дней, при 0°С - более 5 лет. При рН ниже 6,0 в мясе животных вирус погибает за 4-6 часов. В моче и кале вирус сохраняется не более 30-ти часов. Вирус чувствителен к эфиру, хлороформу, спиртами детергентам. Ультрафиолетовые лучи, и солнечный свет инактивируют возбудитель ЧМЖ в течение 40-300 минут . При гниении трупов павших животных вирус быстро погибает. При ликвидации очагов ЧМЖ проводится дезинфекция растворами фенола, едкого натрия, формальдегида и других веществ, содержащих альдегиды.

Чума мелких жвачных животных включена в перечень болезней, подлежащих обязательной декларации. Вирус ЧМЖ поражает не только домашних овец и коз, но и диких коз, а также сайгаков, газелей и других видов жвачных животных. Крупный рогатый скот не болеет чумой мелких жвачных животных, но в организме образуются антитела после инокуляции вируса. Считается, что эпизоотическую роль играют исключительно овцы и козы. Козы более восприимчивы, чем овцы. Человек к вирусу чумы мелких жвачных не восприимчив. Согласно "Кодексу здоровья наземных животных МЭБ 2015 года" чума мелких жвачных определяется как инфекция домашних овец и коз вирусом ЧМЖ. Инкубационный период при чуме мелких жвачных составляет 21 день .

Экономический ущерб, наносимый козоводству и овцеводству, чрезвычайно велик. Смертность в первичных очагах может достигать 100%, а на стационарно неблагополучных территориях - до 50%. Наиболее чувствительными к заболеванию ЧМЖ являются козы, смертность среди них может достигать 95%.

Прямые убытки обуславливаются гибелью животных, снижением продуктивности (удоев молока, качества и привеса мяса, потерь шерсти и пуха), а также затратами на проведение карантинных мероприятий. Гибель животных в основном происходит от осложнений секундарными инфекциями пораженных вирусом ЧМЖ органов дыхания . По оценке ФАО, ежегодный экономический ущерб от этой болезней составляет более 2 миллиардов долларов .

Чума мелких жвачных может протекать в сверхострой, острой и субклинической (подострой и хронической) формах.

Сверхострое течение болезни чаще всего отмечается у коз, заболевание характеризуется высокой температурой, депрессией, быстрой гибелью животных с внезапно возникшими пенистыми серозными или кровянистыми истечениями из носа без предшествующих видимых симптомов болезни .

При острой форме чумы мелких жвачных у животных резко повышается температура тела до 40-42°С. Как правило, на первой стадииб олезни поражается кишечный тракт, регистрируется запор и в последующем диарея. У многих больных животных регистрируются отек губ, гиперемия, язвенно-эрозионные поражения слизистой ротовой полости, конъюнктивиты, ринит, бронхопневмония и кашель. У суягных животных отмечаются аборты. Через 1-2 недели после появления первых клинических признаков у животных наблюдают дегидратацию, истощение, гипотермию, приводящие к летальному исходу.

При остром течении болезнь может протекать в менее тяжелой форме, а иногда и переходить в хроническую форму. В редких случаях регистрируется выздоровление больных животных. На более поздних стадиях появляются симптомы кровавой диареи. Гибель животных может наступать в течение 5-10-ти дней.

Заболевание в подострой форме развивается медленнее, и первые признаки патологии появляются на 5-10-й день и продолжаются в течение 2-3-х недель с температурой тела на уровне 39,5-40,5°С. легкого угнетения и серозного истечения из носовой и ротовой полостей. На 15-18-й день лихорадка достигает максимального уровня, и появляются признаки пневмонии (в результате размножения секундарной микрофлоры) и диареи. При этих формах патологии регистрируются стоматит, язвенно-эрозионные поражения на губах и в ротовой и носовой полостях, пневмония, диарея, истечения из носа и глаз, эктимоподобные поражения кожи. При летальном исходе эти признаки усиливаются, и наступает дегидратация организма. Гибель больных животных наступает через 2-3 недели после начала болезни. Редко диагностируется атипичная форма болезни, проявляющаяся поражением ЦНС, а также абортами и вульвовагинитами.

Патологоанатомические изменения при чуме мелких жвачных у овец и коз были аналогичны поражениям при чуме крупного рогатого скота, но менее выражены . Трупы павших от чумы мелких жвачных овец и коз сильно истощены. Слизистые оболочки носовой полости, гортани и трахеи гиперемированы с кровоизлияниями, язвами и эрозиями, покрытыми пленкой фибринозного экссудата. В грудной и брюшной полостях содержится мутная серозная жидкость с примесью крови. Легкие полнокровны с очагами лобулярной или крупозной пневмонии и множественными участками интерстициальной эмфиземы. При острой форме болезни типичная картина патологоанатомического вскрытия представлена явлениями общего резко выраженного геморрагического диатеза и воспалительно-некротическими поражениями слизистой оболочки органов пищеварения.На слизистой ротовой полости видны множественные язвы, ярко-красные эрозии и дифтеритические поражения. На слизистых оболочках миндалин регистрируются крупозные и дифтеритические язвенные поражения. Мезентеральные лимфатические узлы набухшие, сочные, красного цвета с кровоизлияниями. Печень дряблая, желтого или шафранного цвета. Желчный пузырь увеличен в объеме, растянут густой с примесью крови желчью. Книжка растянута плотными сухими спрессованными кормовыми массами. На листках книжки отмечаются язвы и эрозии. Слизистая оболочка сычуга набухшая, ярко-красного или вишнево-красного цвета с язвами и эрозиями, покрытыми пленкой фибрина. На слизистой оболочке тощей кишки отмечается крупозногеморрагическое воспаление с множественными кровоизлияниями и наложениями фибрина. В толстом отделе кишечника - острое катаральное воспаление. На пейеровых бляшках и солитарных фолликулах регистрируются дифтеритические поражения, и леоцекальный клапан утолщен, гиперемирован, усеян множественными кровоизлияниями и покрыт пленками фибрина.

Самые важные эпизоотологические особенности чумы мелких жвачных животных, как нозологической единицы, обусловлены патогенезом болезни, экологией и биологическими свойствами возбудителя. Считается, что вирус чумы мелких жвачных животных обладает пантотропностью, то есть способностью размножаться в клетках разных типов. При попадании в организм животных вирус размножается в эпителиальных клетках органов пищеварения и дыхания, а также в клетках иммунной системы (лимфоузлах, тимусе, селезенке).

Выработанные в процессе эволюции механизмы передачи возбудителя чумы мелких жвачных животных включает следующие этапы:

• пути выделения вируса из организма больного (инфицированного) животного;
• факторы передачи, обеспечивающие временное сохранение возбудителя во внешней среде и доставка его к новому хозяину;
• пути проникновения (внедрения) вируса в организм нового хозяина и связанная с этим его первичная локализация.

Источником вируса чумы мелких жвачных являются больные и инфицированные животные, находящиеся в инкубационном периоде болезни. Из организма больных животных вирус ЧМЖ выделяется со всеми экскретами и секретами. Вирус присутствует во всех органах и тканях организма, но больше всего возбудитель накапливается в лимфоузлах, селезенке, тимусе и слизистой оболочке сычуга. Аэрогенный путь передачи возбудителя чумы мелких жвачных является основным. Вирус передается также алиментарным путем, при прямом контакте овец и коз с больными животными, а также через инфицированные корма, воду, подстилку, инвентарь, одежду обслуживающего персонала. Вирус чумы мелких жвачных животных малоустойчив во внешней среде. Многие исследователи считают, что передача возбудителя осуществляется только при непосредственном контакте больных с восприимчивыми животными. Считается, что при чуме мелких жвачных отсутствуют резервуары вируса вне популяции этой восприимчивой группы животных. Фактов вирусоносительства даже после экспериментального заражения овец и коз возбудителем чумы мелких жвачных не выявлено.

При всех механизмах передачи возбудителя чумы мелких жвачных животных воротами инфекции являются слизистые оболочки органов дыхания и пищеварения, конъюнктива глаз, в эпителиальных клетках которых он размножается и в последующем распространяется по сосудам, что приводит к виремии и, как следствие, наступает гипертермия.

В странах Ближнего и Среднего Востока для профилактики чумы мелких жвачных используется вакцина из штамма "Nigeria 75/1" вируса .

Заключение. В последнее время в Турции, Иране, Афганистане, Пакистане и Китае, Казахстане, Киргизии, Таджикистане и Грузии были зарегистрированы случаи заболевания овец и коз чумой мелких жвачных животных. Выделенный вирус чумы мелких жвачных относился к 4 генотипу. В Иране, Турции, Афганистане и Пакистане инфекция регистрируется в течение нескольких лет, что свидетельствует об эндемичности болезни. Большое количество очагов чумы мелких жвачных в приграничных с Арменией, Азербайджаном и Туркменией провинциях Ирана, свидетельствует о большой угрозе заноса вируса на территорию сопредельных стран и в последующем на территорию Российской Федерации. В последнее время было зарегистрировано большое количество очагов ЧМЖ в Турции на границе с Грузией и Арменией. В январе 2016 года заболевание овец чумой мелких жвачных было зарегистрировано в Грузии. Результаты анализа ситуации по нодулярному дерматиту в Азербайджане (2014 год) и Республики Дагестан (2015 год) подтверждают существующую постоянную угрозу заноса вируса чумы мелких жвачных на территорию Российской Федерации . На территории Российской Федерации чума мелких жвачных животных никогда не регистрировалась. Из организма больных животных вирус ЧМЖ выделяется со всеми секретами и экскретами. Аэрогенный путь передачи возбудителя чумы мелких жвачных является основным. Вирус передается также алиментарным путем, при прямом контакте овец и коз с больными животными, а также через инфицированные корма, воду, подстилку, инвентарь, одежду обслуживающего персонала. Воротами инфекции являются слизистые оболочки органов дыхания и пищеварения, а также конъюнктива глаз.

Список литературы:

1. Алехин А.Ф., Мищенко В.А. Особенности течения чумы среди крупного рогатого скота, выпасающегося на отгонном пастбище //Вопросы вет. вирусологии, микробиологии и эпизоотологии /Материалы научной конференции ВНИИВ-ВиМ, Покров, 1992, 151-152.
2. Инфекция вирусом чумы мелких жвачных животных // Кодекс здоровья наземных животных МЭБ 2015, Глава 14.7., 717- 729.
3. Инфекционная патология животных.//Под ред. А.Я. Самуйленко, Б В. Соловьева, Е.А. Непоклонова и соавт., 2006, Т.1., 251- 263.
4. Закутский Н.И., Балышев В.М., Книзе А.В. и соавт. Чума мелких жвачных животных (современное состояние, эпизоотология, специфическая профилактика и меры борьбы)//Научный журнал КубГАУ, 2012,83(09).
5. Калантаенко Ю.Ф., Михалкин И.П., Балышев В.М . и соавт. Чума мелких жвачных - распространение, диагностика и профилактика // Ветеринарная патология, 2007, 2, 38- 43.
6. Мищенко А.В., Мищенко В.А., Кононов А.В. и соавт. Проблема нодулярного дерматита КРС// Ветеринария Кубани, 2015, 5,3-6.
7. Сергеев В.А., Непоклонов Е.А., Алипер Т.И. Вирусы и вирусные вакцины, М, Библионика, 2007,394-395.
8. Эпизоотическая ситуация и меры борьбы по чуме мелких жвачных животных в мире и на территории Республики Таджикистан/ Кошеметов Ж.К., Сан-сызбаев А.Р., Саттори И и соавт//Ветеринария, Доклады ТАСХН, 2014,4,
9. Amjad H., Qamarul I., Forsyth M. Peste des petits ruminants in goats in Pakistan // Vet.Rec., 1996, 139(5),118-119.
10. Fentahum T., Woldie M. Review on peste des petits ruminants (PRR) // Europe. Appl. Sciences, 2012, 4(4), 160-167.
11. EFSA Journal 2015, 13 (1), 3985, 94 pp.
12. Ozkul A., Akca Y., Alkan F. et al. Prevalence, distribution, and host range of peste des petits ruminants virus in Turkey // Emerging infectious diseases// 2002, 8, 7, 708-712.
13. Peste des petits ruminants// OIE Terrestrial Manual 2012, Chapter 2.7.11., 1032- 1043.
14. www.OIE.int ., 08.02.16.

Резюме. Приведены данные о путях распространения и механизмах передачи возбудителя трансграничной контагиозной вирусной болезни овец и коз, характеризующейся лихорадкой, диареей, язвенно-эрозионными поражениями слизистой оболочки ротовой и носовой полостей, конъюнктивитами, геморрагическим гастроэнтеритом, поражением лимфоидной системы и пневмониями. Смертность в первичных очагах может достигать 100%, а на стационарно неблагополучных территориях - до 50%. Наиболее восприимчивыми к заболеванию ЧМЖ являются козы, смертность среди них может достигать 95%. Возбудителем чумы мелких жвачных является вирус, относящийся к роду Morbilivirus семейства Paramixoviridae. По данным филогенетического анализа нуклеотидной последовательности генома вируса, все штаммы формируют четыре филогенетические линии, возбудители трех были выявлены в пробах патологического материала из Африки. В четвертую генетическую линию вошли возбудители чумы мелких жвачных животных, циркулирующие на индийском субконтиненте, Китае, Ближнем и Среднем Востоке, Таджикистане, Киргизии, Казахстане, Узбекистане, Иране, Турции и Грузии. Считается, что эпизоотическую роль играют исключительно домашние овцы и козы. На территории Российской Федерации чума мелких жвачных животных никогда не регистрировалась. Из организма больных животных вирус ЧМЖ выделяется со всеми секретами и экскретами. Аэрогенный путь передачи возбудителя чумы мелких жвачных является основным. Вирус передается также алиментарным путем, при прямом контакте овец и коз с больными животными, а также через инфицированные корма, воду, подстилку, инвентарь, одежду обслуживающего персонала. Воротами инфекции являются слизистые оболочки органов дыхания и пищеварения, а также конъюнктива глаз.