Analýza Ifa. Enzymová imunoanalýza (EIA)

Seznam dostupných diagnostických metod se v posledních desetiletích rychle rozšiřuje, diagnostici se snaží spojit výhody všech dosavadních testů v nových metodách a zbavit se všech jejich dosavadních nevýhod.

V poslední době seznam diagnostických postupů stále více zahrnuje enzymatický imunosorbentní test - moderní a poměrně nový test, který je pro průměrného člověka, který se nezabývá medicínou, málo známý. Přesto si tato technika rychle získává řady svých příznivců mezi kvalifikovaným zdravotnickým personálem. Můžete se pokusit zjistit, co to je a v jakých případech by se měl používat, tím, že se seznámíte s jeho vlastnostmi a hlavními charakteristikami.

Enzymová imunoanalýza je instrumentální laboratorní technika založená na molekulární reakci „antigen-protilátka“, která umožňuje detekci specifických proteinů v biologických materiálech (vzorky pro výzkum). Takovými proteiny mohou být enzymy, různé mikroorganismy (viry, bakterie, houby), prvoci atd.

Po objevení metody dostala název ELISA test, který nemá nic společného se jménem objevitelů, ale jde o zkratku celého názvu v angličtině – enzyme-linked immunosorbent assay. Tento název používají lékaři po celém světě, někteří lékaři v rusky mluvících zemích tak nazývají tento typ výzkumu.

Hlavním principem metody je molekulární reakce „antigen-protilátka“.

Antigen je jakákoli cizí molekula, která vstupuje do lidského těla jako součást mikroba, který způsobuje onemocnění. Antigeny jsou obvykle proteinové molekuly. Kromě mikroorganismů mohou být takovým „cizincem“ cizí krvinky, které neodpovídají skupině nebo Rh faktoru.

V reakci na vstup takového antigenu do těla se spustí imunitní reakce, která je zaměřena na ochranu proti jakýmkoli cizím molekulám. K tomu dochází v důsledku syntézy speciálních činidel imunitního systému - protilátek (imunoglobulinů). Každá protilátka je vhodná pouze pro specifický antigen a neutralizuje patogenního „cizince“ tím, že se na něj naváže do jediného komplexu. Je to proces takové vazby, který se nazývá reakce „antigen-protilátka“.

Typy protilátek

Všechny protilátky (imunoglobuliny) jsou rozděleny do 5 typů podle toho, v jaké fázi imunitní odpovědi se objevují:

Pro diagnostiku ELISA jsou nejčastěji důležité hladiny imunoglobulinů IgG, IgM a IgA. Podle jejich titrů můžete zjistit, zda člověk prodělal onemocnění již dříve nebo se nakazil nedávno, zda si vytvořil imunitu nebo zda je jeho tělo bezbranné vůči patologii.

Výhody a nevýhody enzymové imunoanalýzy

V současné době je ELISA jednou z nejpřesnějších a nejcitlivějších metod. Byl přijat odborníky v různých oblastech medicíny a stále rozšiřuje rozsah jeho použití.

Výhody metody

  • Vysoká přesnost získaných dat.
  • Citlivost (umožňuje detekovat požadovanou látku i při minimální přítomnosti patogenu ve vzorku).
  • Možnost diagnostiky v prvních dnech nemoci nebo v inkubační době.
  • Rychlost získávání dat ve srovnání s jinými metodami s podobnou přesností.
  • Vysoká automatizace procesu a minimální lidská účast, což snižuje chybovost interpreta.
  • Získání údajů o stadiu patologického procesu a účinnosti zvolené terapie.
  • Bezbolestné a minimálně invazivní při odběru materiálu.

Nevýhody metody

  • Ve většině případů umožňuje určit reakci těla na patogenní agens, a nikoli samotný patogen.
  • Před testem musí být přesně známo podezření na onemocnění, protože test je vysoce specifický.
  • Pravděpodobnost falešných indikátorů způsobených technickými problémy, užíváním léků, současnou přítomností několika chronických onemocnění nebo metabolických poruch v těle pacienta.
  • Interpretaci výsledků by měl provádět pouze vysoce kvalifikovaný odborník, protože k interpretaci získaných dat je nutné mít speciální školení a velkou zásobu lékařských znalostí v určité oblasti.
  • ELISA je poměrně vzácný test, proto se neprovádí ve všech diagnostických laboratořích.
  • Metoda je poměrně nákladná, protože kromě činidel musí mít laboratoř četné drahé vybavení a vzorky antigenů vyrobených ve speciálních ústavech.

V jakých případech se používá enzymatická imunoanalýza?

Úplný seznam indikací enzymové imunoanalýzy je velmi široký a zahrnuje téměř všechna odvětví medicíny.

Nejčastěji se ELISA používá pro následující účely:

  • detekce infekčních onemocnění;
  • diagnostika pohlavně přenosných chorob;
  • stanovení imunitního stavu nebo jednotlivých autoimunitních onemocnění;
  • identifikace nádorových markerů;
  • stanovení hormonů.

V případě infekčních a virových onemocnění nám tato technika umožňuje identifikovat následující patologie:

Kromě toho vám ELISA umožňuje rychle a efektivně určit stav infarktu, posoudit reprodukční potenciál těla, identifikovat alergie, jejich zdroj atd.

Imunoenzymová technika se používá k provádění klinických studií při vývoji nových léků a při hodnocení jejich účinku na lidský organismus.

Typy vzorků a metody jejich výběru pro výzkum

Nejčastěji je testovacím materiálem pro enzymovou imunoanalýzu krev, která se odebírá pacientovi z antekubitální žíly. Odběr vzorku se provádí nalačno, převážně ráno. Po odběru vzorků jsou ty vytvořené buňky, které interferují s výzkumem, odděleny a odstraněny z krve, přičemž zůstane pouze sérum.

Při diagnostice urogenitálních infekcí se materiálem často stávají stěry ze slizničních tkání pohlavních orgánů, hlen z močové trubice nebo děložního čípku, vzorky z konečníku, škrábance z erozí či vředů v oblasti třísel a z jiných částí těla. Výtěry lze odebírat z dutiny ústní, stejně jako z nosohltanu.

Někdy se enzymová imunoanalýza používá v porodnické a gynekologické praxi během těhotenství ke stanovení stavu plodové vody. V tomto případě se vzorkem stává plodová voda. K tomu se odebírá malé množství tekutiny propíchnutím plodového vaku dlouhou jehlou. Veškeré manipulace jsou prováděny sterilními nástroji, aby se minimalizovala možná rizika.

Často se materiál stává cerebrospinální nebo serózní tekutinou. K tomu dochází při lokální anestezii, která se podává injekčně.

Specialista vysílající do studie by měl objasnit, jaký typ materiálů je potřebný pro enzymovou imunoanalýzu. Často se odebírají vzorky několika typů nebo z různých míst najednou. Lékař, který vydává doporučení na tento typ vyšetření, by měl pacienta také informovat o přípravách na darování biomateriálu.

Příprava pro enzymovou imunoanalýzu

Aby se zvýšila přesnost údajů získaných po enzymatické imunoanalýze, příprava na výběr materiálu by měla být následující:

  • 10 dní před studií vyloučit antibiotika, antivirotika a antimykotika;
  • na jeden den je nutné vyloučit alkohol, kouření a užívání omamných látek;
  • ve stejném období je nutné se vyvarovat fyzického přetížení;
  • Upozorněte předepisujícího lékaře na všechny léky, které pacient užívá;
  • Informujte svého lékaře, pokud jste těhotná nebo máte podezření, že jste těhotná.

Nejlepší je, když se testovací materiály odebírají ráno na lačný žaludek.

Pokud je cílem diagnózy zjistit stav hormonálních hladin, pak je důležité zajistit, abyste byli den předem v klidném stavu a vyhýbali se nervovému vypětí. U žen je dárcovství krve na hormony jasně dáno obdobím měsíčního cyklu, které bude projednáno s lékařem při objednání.

2-3 dny před odběrem vzorků musíte z nabídky vyloučit smažená a tučná jídla a před testováním na hepatitidu nejezte citrusové plody ani jiné oranžové nebo žluté ovoce a zeleninu.

Interpretace výsledků enzymového imunotestu

Výsledek kvalitativní studie je obvykle označen znaménkem „+“ (detekováno) nebo „-“ (nenalezeno).

Na základě přítomnosti nebo nepřítomnosti určitých skupin imunoglobulinů lze vyvodit následující závěry:

  • JgM (-), JgG (-), JgA (-) - imunita vůči onemocnění zcela chybí (tělo se s tímto typem antigenu dříve nesetkal);
  • JgM (-), JgG (+), JgA (-) - došlo k předchozí kolizi s tímto antigenem nebo vakcínou;
  • JgM (+), JgG (-/+), JgA (-/+) - akutní patologický proces (s největší pravděpodobností primární);
  • JgM (-), JgG (+/-), JgA (+/-) - chronický proces;
  • JgM (+), JgG (+), JgA (+) - relaps;
  • JgM (-) - fáze obnovy.

Kvantitativní hodnoty nesou velkou informační zátěž, ale interpretovat je může pouze ošetřující lékař na základě předchozích indikací, věku pacienta a norem pro každé konkrétní onemocnění. Z tohoto důvodu nemůžete sami hodnotit výsledky.

Jak dlouho musíte čekat na výsledky?

Tato technika má mnoho odrůd, v závislosti na tom, které období pro získání dat v ruce je určeno. Průměrná doba trvání diagnostiky ELISA je 4-6 hodin, což umožňuje poskytnout výsledky hned následující den.

Nejdelší metody trvají až 10 dní, například v případě infekce HIV.

V případě naléhavé potřeby je možné využít expresní metody, při kterých je odpověď získána do 1-2 hodin.

Kde mohu získat test ELISA?

Vzhledem k tomu, že zařízení pro tento typ diagnostiky je poměrně drahé, ne všechny laboratoře jej mohou zakoupit. Navíc testy obsahující specifické antigeny mají omezenou dobu použitelnosti (obvykle asi 1 rok), a proto vyžadují neustálou aktualizaci.

Z těchto důvodů nemají veřejná zdravotnická zařízení vždy laboratoře ELISA. Nejčastěji je nutné kontaktovat velká soukromá lékařská nebo velká diagnostická centra.

K provedení testu ELISA musí mít laboratoř speciální licenci a personál a laboranti musí projít speciálním školením.

Nejčastěji konkrétní diagnostické centrum nebo laboratoř doporučí lékař, který pacienta k vyšetření posílá.

Náklady na enzymovou imunoanalýzu

Cena za toto studium závisí na regionu země a na úrovni kliniky poskytující službu. V Moskvě začíná minimální cena za stanovení jednoho antigenu od 700 rublů. Pokud je potřeba identifikovat více imunoglobulinů najednou, cena se sečte.

V případě naléhavé analýzy se náklady zvýší o 150–200 rublů. pro každý antigen.

I přes poměrně vysokou cenu umožňuje enzymatická imunoanalýza provést vyšetření pacienta co nejinformativnějším a nejrychlejším, což zkracuje dobu před zahájením léčby a umožňuje rychlejší stabilizaci stavu osoby.

Toto video představuje film „Základy enzymové imunoanalýzy“.

Čas od času lékaři předepisují testy ELISA; ne každý ví, co to je. ELISA má následující dekódování - enzymový imunotest krve. Takový krevní test pomáhá pochopit, jak tělo bojuje s infekčními nemocemi a prokazuje fázi onemocnění. Enzymová imunoanalýza pomáhá při hodnocení ochranné aktivity krve, identifikaci imunodeficience u patologií spojených s infekcemi, hormonálními problémy atd.

Krevní test ELISA pracuje s materiálem, který se odebírá ze žíly. Kromě toho je k vyšetření k dispozici obsah sklivce, tekutina z míchy a stěry z močové trubice nebo cervikálního kanálu. Pro enzymovou imunoanalýzu ELISA může být tekutina, která obklopuje plod, odebrána těhotným ženám.

V tomto případě může být krev přímo testována na ELISA pomocí různých technik. Existuje přímá, nepřímá, konkurence a blokování. Když je tělo infikováno nějakým patogenním agens, který se nazývá antigen, imunitní systém začne produkovat specifické protilátky, například proti hepatitidě. Tyto protilátky jsou zaměřeny na „vypořádání se“ s cizími agenty. Co jsou protilátky? Jedná se o speciální proteiny, které mohou interagovat s antigeny a vytvářet imunologické komplexy nazývané antigen-protilátka. Právě za detekci těchto komplexů je zodpovědná diagnostika ELISA. K detekci antigenu se do výsledného vzorku krve přidají protilátky nebo se provede opačný postup.

Pozitivní výsledek ELISA je založen na reakci imunitního systému a enzymů. Pod vlivem prvního se váží infekční agens a buněčné elementy, druhý pomáhá vizualizovat výsledek prvního. Imunitní reakce zahrnuje kombinaci protilátky a antigenu. V důsledku tohoto procesu se vytváří imunitní komplex. Všechny buňky mají na svém povrchu antigen. Imunitní buňka zachytí podezřelou a antigen, který je fixován na povrchu, podstoupí srovnávací proceduru s informací, která se „nahraje“ do paměti. Pokud je v popisu shoda, pak se buňka vrátí domů, ale pokud ne, pak dojde ke spojení, za jehož vytvoření je zodpovědná protilátka, která se přichytí na povrch.

Enzymatická reakce mezitím umožňuje přeměnu látek na nové. Materiál je vystaven působení enzymu. V tomto případě je enzymatický rozdíl zajištěn různými substráty. Produkt vzniklý z této reakce je odeslán ke stanovení množství patogenu, jehož stanovení je založeno na hustotě barvy roztoku.

Vlastnosti metody

V případě potřeby diagnostiky alergií a onemocnění virového původu je předepsán krevní test enzymové imunoanalýzy. Existuje také test ELISA na syfilis a řadu dalších infekcí, které se přenášejí nechráněným pohlavním stykem. Tato diagnóza je ve srovnání s PCR stále oblíbenější. Faktem je, že PCR zahrnuje práci s nátěry. Na rozdíl od PCR lze výsledky ELISA získat z krevních testů.

Krevní test metodou ELISA lze navíc předepsat, když je potřeba zjistit přítomnost imunodeficience, diagnostikovat onkologii, posoudit účinnost léčby, stanovit hormonální hladiny a celkově podstoupit předoperační vyšetření.

Pokud porovnáte studie ELISA například s PCR, můžete najít řadu výhod. Hlavní je možnost úplné diagnostiky i v nejranějších fázích vývoje. Výsledky ELISA navíc pomáhají určit konkrétní fázi onemocnění a úroveň jeho rozvoje.

Test ELISA má vyšší účinnost ve srovnání s PCR, navíc jej lze provádět během těhotenství k detekci STD. Každý, kdo absolvoval tento test, může zjistit koncentraci TSH v krevním séru. To je velmi důležité pro kontrolu toho, jaká je reakce štítné žlázy, zda v jejím fungování nejsou nějaké poruchy.

Další výhodou, kterou však polymerázová řetězová reakce také má, je rychlost studie, což znamená rychlé výsledky. Přesnost výsledků oceňují i ​​lékaři. Pokud se bavíme o STD, pak hladina dosahuje 98 procent, stejně jako je tomu u koncentrace TSH.

Samozřejmě existují určité nevýhody. V tomto případě však mluvíme o nepřímých vlastnostech testu. Zejména mluvíme o tom, že nelze vyloučit možné chyby při určování norem. Někdy může test provedený absolutně zdravou dívkou ukázat falešně pozitivní výsledek, nebo v opačném případě negativní výsledek. Klasifikace metod psychologického výzkumu však ve většině případů spojuje takové nedostatky s nesprávnou přípravou nebo porušením techniky, se kterou byl materiál shromážděn.

Funkce provedení

Pro analýzu ELISA se ve většině případů daruje krev. Před darováním krve je důležité držet půst alespoň osm hodin a vyvarovat se užívání řady léků, které ovlivňují výsledek testu. Mluvíme o antihistaminikách a hormonálních lécích, které ovlivňují činnost štítné žlázy. Kromě toho by měl být vyloučen alkohol po dobu nejméně 24 hodin. Ujistěte se, že alespoň hodinu před darováním krve nekouříte. Zkreslení výsledku je možné i při užívání omamných látek.

Než přejdeme k přepisu, je vhodné zmínit, jaké metody měření se pro takový test používají. Výsledek testu bude indikovat protilátky nebo imunoglobuliny Ig. Znamenají velmi specifické proteiny, které byly diskutovány dříve. Za jejich produkci jsou zodpovědné B-lymfocyty, jakmile se do těla dostanou viry, bakterie nebo plísně. Existuje pět typů imunoglobulinů, označených latinskou abecedou.

Jejich rozdíly jsou spojeny s různými molekulárními tvary a hmotnostmi. Mají různé poločasy rozpadu a různým způsobem se podílejí nebo neúčastní infekčních procesů. Časový rámec, ve kterém mohou být detekovány od okamžiku výskytu infekce, se také liší.

Pokud klasifikujete imunoglobuliny pomocí molekulové hmotnosti jako základu, pak IgM má nejvyšší ukazatele. Charakteristickým rysem tohoto typu imunoglobulinů je neschopnost projít placentární bariérou. Pokud je IgM v testu zjištěn u novorozeného dítěte, mluvíme o přítomnosti infekce u plodu.

Naprostá většina lidské krve obsahuje imunoglobuliny IgG, nejméně IgE. Pokud jde o práci v rámci infekčních procesů, zvláštní pozornost je třeba věnovat variantám A, M, G. IgE působí jako marker alergické reakce. IgD se nachází pouze v tkáních lymfatických uzlin a mandlí. To je důležité z hlediska vytváření lokální imunity.

Kromě toho analýza určuje antigeny. Jsou chápány jako látky s vysokou molekulovou hmotností, které jsou známé svým organickým původem. Zejména mluvíme o patogenech infekčních a jiných nemocí spektra. Kromě toho máme na mysli i látky, které signalizují různé buněčné změny, které jsou u řady onemocnění nevyhnutelné. Je také indikován imunitní komplex, který prokazuje komplex antigen-protilátka, který se účastní imunitního procesu.

Doba výroby obvykle závisí na konkrétní laboratoři, kterou jste kontaktovali. Některé laboratoře jsou schopny poskytnout výsledky během jednoho až dvou dnů, jiným to trvá týden. Zpoždění může být způsobeno potřebou nashromáždit určité množství séra.

Vliv na výsledky a interpretaci

Navzdory skutečnosti, že ELISA je považována za jednu z nejpřesnějších testovacích metod, stále dochází k chybám. Postup při odběru materiálu, nesprávná přeprava a skladování materiálu může ovlivnit správnost výsledků. Užívání léků, jak je uvedeno výše, přítomnost skrytých onemocnění. Metabolické poruchy nebo imunodeficience vám také neumožní získat správné indikátory. V období života do jednoho roku mohou mít novorozenci také nepřesné ukazatele. To je způsobeno skutečností, že v těle jsou přítomny mateřské protilátky.

Když už mluvíme o dekódování, analytické formuláře používají kladné nebo záporné znaménko k označení výsledků výpočtu pro každou z tříd imunoglobulinů. Následující jsou pravděpodobné možnosti.

Absence detekovaných IgG, IgA a IgM indikuje úplné uzdravení. Negativní výsledek pro složky jako IgM, IgA, IgG znamená nedostatek imunity vůči infekci.

Kombinace pozitivního a negativního výsledku na IgG, IgA v kombinaci s pozitivním IgM ukazuje na přítomnost akutní infekce v těle. Pozitivní výsledek IgG v kombinaci s negativními indikátory pro IgA a IgM odpovídá postvakcinačnímu období nebo získání imunity v důsledku infekce.

Kombinace pozitivního nebo negativního výsledku na IgG, IgA a negativního výsledku na IgM ukazuje na přítomnost infekce v jejím chronickém průběhu. Pozitivní výsledek pro tři složky: IgG, IgM, IgA ukazuje na exacerbaci infekce, která byla v chronické formě. Kromě přímého objasnění tříd protilátek dostává lékař v rámci dešifrování analýzy ELISA informace o jejich kvantitativních ukazatelích. Je důležité zdůraznit, že za dekódování by měl odpovídat ošetřující lékař. Faktem je, že kombinace některých složek jej může vést k zamyšlení nad získaným falešným výsledkem, což povede k opakování testu. Nezávislé dešifrování je v tomto případě zbytečné.

Analýza ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay) je moderní diagnostický postup zaměřený na identifikaci specifických protilátek v krvi proti patogenům řady onemocnění, stanovení stupně vývoje patologie a její etiologie. Používá se jako metoda sledování procesu léčby a její účinnosti. V průběhu výzkumného procesu jsou analyzovány kvalitativní a kvantitativní ukazatele.

Metoda ELISA je vysoce informativní, přesnost výsledků je více než 96 %. Diagnostika je dostupná téměř v každé laboratoři a lékařské instituci.

Hlavní indikace

K potvrzení přítomnosti pohlavně přenosných infekčních chorob je předepsán enzymový imunotest:

  • trichomoniáza;
  • chlamydie;
  • ureaplasmosis;
  • syfilis atd.

ELISA se také používá k diagnostice virových onemocnění:

  • opar;
  • herpes typu 4 (virus Epstein-Barrové);
  • virová hepatitida;
  • cytomegalovirová infekce.

Jak se připravit na výzkum

Biologickým materiálem pro výzkum je krev. Několik dní před testem byste neměli užívat léky. Antibiotika, anthelmintika a antivirotika jsou vysazena do 14 dnů.

Materiál se odebírá ráno na lačný žaludek. Hodinu před zákrokem je dovoleno vypít sklenici neperlivé vody, příjem potravy je vyloučen.

Vlastnosti analýzy

K provedení studie se odebere venózní krev v objemu nejméně 5 ml. V některých případech se jako biomateriál používá mozkomíšní mok, plodová voda nebo obsah sklivce.

Odběr krve se provádí injekční jehlou, přísně nalačno, aby se předešlo falešně pozitivním výsledkům. 12 hodin předem byste měli přestat kouřit a pít alkoholické nápoje. Při použití omamných látek jsou výsledky rozborů zkreslené.

Pokud závěr naznačuje negativní hodnoty imunoglobulinů G, A, M, znamená to počáteční fázi vývoje patologického procesu nebo jeho nepřítomnosti. Tento výsledek je zaznamenán po úplném zotavení po terapii.

Negativní výsledek IgM a IgA a pozitivní výsledek IgG svědčí o vytvoření imunity po infekčním onemocnění nebo očkování.

Pozitivní výsledek IgM a negativní nebo pozitivní výsledek IgG, IgA indikují přítomnost akutní infekční patologie.

Analýza ELISA se provádí poměrně rychle, výsledky jsou připraveny do jednoho dne po odběru materiálu.

Jak se provádí studie ELISA?

Mechanismus reakce

Enzymově vázaný imunosorbentní test je založen na imunitní reakci antigenu s protilátkou a připojení enzymové značky k protilátkám umožňuje, aby byl výsledek reakce antigen-protilátka zohledněn výskytem enzymatické aktivity nebo změna jeho úrovně. Ve zjednodušené formě lze reakční mechanismus představit takto:

K první reakci dochází mezi detekovaným Ig (Ab) a purifikovaným patogenním antigenem (Ag), fixovaným na povrchu jamek imunologické tablety.

K identifikaci vytvořených imunitních komplexů se provádí druhá imunologická reakce, při které navázaný specifický Ig působí jako antigen a konjugát představující Ig (Ab) na odpovídající lidský Ig, značený enzymem -peroxidázou (K). , se používá jako protilátky proti němu.

Dále dochází k enzymatické reakci katalyzované enzymatickou částí molekuly konjugátu, substrátem pro tuto reakci je bezbarvá látka - chromogen, který při reakci tvoří barevnou látku. Intenzita barvy v jamce závisí určitým způsobem na množství imunoglobulinů obsažených ve vzorku.

Výpočet výsledků

Provádění enzymového imunotestu

Pro sérodiagnostiku se používají 96jamkové polystyrenové destičky, na jejichž stěnách je antigen předem adsorbován. Testované sérum se přidá do buňky tablety. V tomto případě jsou na něj navázány protilátky homologní s antigenem. Nenavázané protilátky se odstraní promytím. Dále se k buňkám přidají protilátky proti lidským imunoglobulinům (protilátky) značené enzymem. Pokud byly v testovaném séru přítomny detekovatelné protilátky, pak v této fázi budou působit jako antigeny, se kterými budou značené protilátky reagovat. Přídavek chromogenní látky (barviva) po umytí nám umožní zohlednit reakci vyvíjející se barvy v buňkách. Intenzita zbarvení je úměrná množství enzymu, potažmo množství protilátek Při měření optické hustoty (OD) kapaliny v cele a jejím porovnání s kontrolním vzorkem se koncentrace protilátek počítá v jednotkách objemu. Nejčastěji se používá výpočet výsledků v jednotkách optické hustoty. Je třeba vzít v úvahu, že každý testovací systém má své vlastní indikátory pro záznam výsledků a indikátory normality a patologie, kterými by se měl řídit při interpretaci Výsledek.

Jaké infekce lze detekovat testem ELISA?

Především v moderní venerologii se používá pro diagnostiku syfilis (v kombinaci s dalšími reakcemi), HIV infekce, virové hepatitidy, má omezenou hodnotu pro diagnostiku chlamydiové infekce, cytomegalovirové infekce a dalších herpetických infekcí, používá se také metoda ELISA ke stanovení protilátek u různých infekčních onemocnění, hladin hormonů, autoprotilátek a různých markerů rakoviny.

Jak interpretovat výsledky ELISA

Studium přítomnosti a hladiny protilátek různých tříd v některých případech pomáhá určit fáze infekčního procesu

Fáze onemocnění

IgM

IgA

IgG

Primární fáze
(2 týdny od infekce)

Primární fáze
(2,5 - 3 týdny od infekce)

Primární fáze
(3-4 týdny od infekce)

Exacerbace chronické fáze
(2 týdny od začátku exacerbace)

Chronická fáze

Minulost (vyléčená infekce)

Zotavení

po úspěšné léčbě pokles titru 2-4krát

snížení titru o 4-8 krát 1-1,5 měsíce po úspěšné léčbě

Negativní výsledek

Bohužel tak důležitá výhoda ELISA, jako je kvantitativní stanovení protilátek, nemá v praktické práci velký význam - tzn. neumožňuje přesnou diagnózu a neovlivňuje dávkování a načasování léků.

Jaká je role metody ELISA v diagnostice syfilis

Metoda ELISA v diagnostice syfilis byla poprvé použita v roce 1975. V současné době je široce používána pro sérologickou diagnostiku syfilis v Rusku a používá se jako konfirmační test na syfilis, obvykle se provádí studie, která identifikuje tzv. celkové protilátky proti antigenům Treponema pallidum (IgM a IgG), i když v některých případech je možné stanovit pouze „časné“ protilátky třídy M. ELISA na syfilis je pozitivní po 3 týdnech od okamžiku infekce a zůstává pozitivní poměrně dlouho dlouhou dobu i po léčbě (někdy i doživotně).Proto se jako test potvrzující vyléčení syfilis nepoužívá ELISA.Ve většině případů se provádí pouze kvalitativní stanovení ELISA-t.j. pouze pozitivní nebo negativní výsledek, i když je možné i kvantitativní stanovení.