Методи виявлення ВІЛ інфекції. Скринінговий тест у діагностиці ВІЛ інфекції

Діагностика ВІЛ-інфекції необхідна для призначення ефективного лікування.Щоб діагностувати СНІД проводиться стандартна процедура обстеження пацієнта. Вона складається з 2 етапів:

здавання скринінгу;
імунний блот.

Для встановлення діагнозу додатково призначають ПЛР, експрес-тестування.

Проведення ІФА

Початкова діагностика СНІДу ґрунтується на застосуванні лабораторних білків ВІЛ, які вловлюють специфічні антитіла. Після контакту з ферментами тест-системи змінюється колір індикатора. Потім змінена кольорова гама обробляється за допомогою спеціальної апаратури, яка визначає результат тестування.

Подібна лабораторна діагностика ВІЛ-інфекції показує результат через 21 день після інфікування. За допомогою ІФА не можна визначити наявність вірусу. Даний метод діагностики сприяє виявленню вироблення антитіл до вірусу. Подібний процес може спостерігатись через 2-6 тижнів після зараження.

Фахівці розрізняють 4 покоління ІФА-систем із різною чутливістю. Медики частіше застосовують тести 3 та 4 покоління. Ці системи створені на основі рекомбінантних білків або пептидів синтетичного походження, які мають значну точність і специфічність. ІФА застосовується для виявлення, моніторингу поширення вірусу, що забезпечує безпеку під час перевірки донорської крові. Точність таких систем коливається не більше 93-99%. Найбільшу чутливість мають тести, випущені в Західній Європі. Щоб виконати діагностику, лаборант проводить забір венозної крові (5 мл). За 8 годин перед дослідженням рекомендується відмовитися від їди. Дослідження найчастіше проводиться вранці.

Розшифрування даних

Для отримання результатів тесту потрібно 10 днів. Якщо результат негативний, пацієнт не інфікований. У такому разі лікування не призначається. Хибнонегативний результат виявляється:

до 3 тижнів після інфікування;
на останній стадії СНІДу при низькій імунній системі;
при неправильній підготовці крові.

Якщо результат позитивний, пацієнт інфікований. У такому разі проводять ІБ. Неправдивий результат вказує на наявність супутніх захворювань та неправильно проведену підготовку крові. Якщо тестування показано вагітним, то у зібраному матеріалі лікар може виявити неспецифічні антитіла, вироблення яких не пов'язане з вірусом. Зібраний матеріал досліджується в референсі чи арбітражної лабораторії. Якщо результат повторного тестування негативний, тоді перший результат помилковий. У такому разі ІБ не проводиться.

Проведення імунного блоттингу

Лікування СНІДу призначається при отриманні позитивного результату імунного блотингу. Цей метод діагностики проводиться за допомогою нітроцелюлозної смужки, яку наносяться вірусні білки. Для ІБ використовують венозну кров, яка потім піддається обробці. Білки, що знаходяться в сироватці, поділяються на групи з урахуванням їхнього заряду та молекулярної маси. Для такого процесу використовується спеціальна апаратура.

За наявності в досліджуваному матеріалі антитіл до вірусу на смужці проявляються відповідні лінії. Позитивне ІХ вказує на ВІЛ-інфікування пацієнта. Сумнівний результат виявляється на початкових етапах зараження, при туберкульозі та онкології, у вагітних. У разі рекомендується повторне проведення ІБ.

Невизначений результат ІХ вказує на наявність в імуноблоті одного та більше білків до вірусу. Подібна картина спостерігається при недавньому зараженні, коли в крові є незначна кількість антитіл до інфекції. У такому випадку ІБ буде позитивним через деякий час. Невизначений результат цього дослідження може бути пов'язаний з відсутністю ВІЛ-інфекції при гепатитах, хронічних обмінних захворюваннях у період вагітності. У такому разі ІХ стане негативним або фахівці виявлять у пацієнта причину невизначеного результату.

ПЛР дослідження

Захисна система уражається і натомість застосування вірусу в людський організм. Для інкубаційного періоду характерний термін 3 місяці. Тому після статевого контакту з ВІЛ-інфікованим партнером рекомендується пройти ПЛР-діагностику. Вона дозволить визначити РНК вірусу. Період, протягом якого рекомендується пройти подібне дослідження, становить 8-24 місяці.

Для остаточного діагнозу показано регулярне здавання крові на ВІЛ (1 раз на 3 місяці). За рахунок високої чутливості це обстеження дозволяє виявити вірус через 10 днів після інфікування. Несправжній позитивний результат при ПЛР можна отримати і за наявності в організмі пацієнта іншої інфекції. ПЛР дослідження вважається дорогою процедурою, оскільки потребує наявності спеціального обладнання.

ПЛР призначається для виявлення вірусу у наступних осіб:

новонароджений, який народився від ВІЛ-інфікованої матері;
пацієнти із сумнівним ІБ.

Також дана методика показана для контролю концентрації вірусу в крові та дослідження донорської крові.

Швидкі методики дослідження

До сучасних методів діагностики СНІДу спеціалісти відносять експрес-тести. Для їх розшифровки потрібно 10-15 хв. Імунохроматографічні тести, що базуються на капілярному потоці, забезпечують точні результати. Такі системи тестування представлені у вигляді спеціальних смужок, куди наноситься кров чи слина. За наявності вірусу через 10 хв на тесті з'являються 2 смужки:

контрольна;
кольорова.

У разі результат тестування носить позитивний характер. На негативний результат вказує на появу однієї контрольної смужки. Для підтвердження отриманого результату проводиться ІБ. На основі загальних даних лікар ставить діагноз, призначає лікування.

Можна виявити вірус у домашніх умовах. Для цього використовують спеціальні експрес-набори. OraSure Technologies1 – система, розроблена у США. Якщо після тестування виявлено позитивний результат, пацієнту рекомендується пройти повне обстеження у медичному центрі.

Обстеження дитини

Новонароджені дітки, які народилися від інфікованих матерів, терміново піддаються обстеженню. За допомогою серологічних методик не можна точно виявити вірус у дітей віком 5-18 місяців. Але результат такого обстеження важливий під час проведення ІБ.

Виявити інфікування у дітей можна за допомогою ПЛР. ДНК вірусу виявляє фахівець у дітей першого місяця життя. Щоб встановити концентрацію РНК збудника, спеціалісти визначають провірус імунодефіциту. Для дослідження лікар використовує цільну кров або її суху пляму. Матеріал міститься в пробірку з консервантом ЕДТА (пропорція 1:20). Зразок необхідно зберігати за температури не вище 8°С (протягом 2 діб). Не допускається заморожування матеріалу.

Для отримання зразка сухої крові наносять цільну рідину на спеціальний папір. Зразок можна зберігати за температури нижче 8°С. Картки використовують протягом 8 місяців. Новонароджену дитину необхідно оглянути, взявши матеріал на дослідження, протягом наступних термінів:

через 48 годин після народження;
у віці 2 місяці після народження;
через 3-6 місяців після народження.

Якщо лікар виявив ген провірусу ВІЛ через кілька годин після появи немовляти на світ, то сталося внутрішньоутробне інфікування малюка. Заразитися вірусом можна і під час пологів або при грудному вигодовуванні. Результати, що вказують на наявність ДНК вірусу у 2 зразках, вказують на розвиток СНІДу у дитини. Диспансерне спостереження не потрібне, якщо результати ПЛР негативні через 4 місяці після народження малюка.

Якщо результат тестування негативний, але симптоматика СНІДу є, тоді рекомендується проконсультуватися з лікарем. Подібна клініка може бути спровокована іншими захворюваннями. Єдиним і 100% методом діагностики вірусу вважається тестування. Навіть кваліфіковані і досвідчені фахівці не можуть визначити вірус за симптоматикою.

Якщо через деякий час результати пацієнта негативні, ВІЛ в організмі відсутня.

У цьому не враховується симптоматика. Але подібна клінічна картина може бути пов'язана із СНІДофобією. У такому разі потрібна допомога психолога. За потреби дитині або дорослому призначають відповідне лікування.

Діагностика ВІЛ-інфекції – це важливий фактор на шляху до якнайшвидшого одужання, процес сприяє забезпеченню своєчасної терапії для хворого.

ВІЛ-інфекція викликається вірусом імунодефіциту людини, який активно вражає всю імунну систему хворого, через що остання пригнічується і без своєчасного втручання розвивається СНІД (відомий усім синдром набутого імунного дефіциту). Розуміння того, як протікає процес хвороби та як він впливає на весь організм, допомагає краще усвідомити, чому важлива рання та точна діагностика. Величезний ризик того, що виникнуть захворювання, які зазвичай не характерні для людей, які мають нормальну, міцну імунну систему. Без своєчасного втручання такий стан спричинить смерть.

Симптоми

Симптоми цієї інфекції, що часто зустрічається, і її перебіг повинен знати кожен. Небезпека полягає в тому, що ВІЛ - це захворювання, що повільно протікає, яке на ранніх стадіях має неспецифічні ознаки, в якійсь мірі схожі на прояви мононуклеозу. А потім зовсім деякий час хвороба протікає безсимптомно. З огляду на це потрібно знати додаткові клінічні показання для обстеження пацієнта на ВІЛ:

Діагностика

Лабораторна діагностика ВІЛ-інфекції, як правило, має 3 основні напрямки та цілі:

Безпосереднє встановлення наявності ВІЛ-інфекції в організмі.
Визначення, на якій із 8 стадій знаходиться хвороба, та виявлення супутніх захворювань в ослабленому організмі.
Прогноз можливої прогресії при клінічному перебігу хвороби та постійний контроль лікування за допомогою скринінгових досліджень на антитіла. Спостереження за можливими побічними ефектами від антиретровірусних препаратів.

У перші місяці, особливо за відсутності належного лікування, у зараженого ВІЛ спостерігатиметься швидке збільшення навантаження на весь організм (тобто підвищується вміст інфікованого РНК у плазмі). Завдяки тому, що йде швидке інфікування як клітин, а й крові з лімфатичними вузлами, стає можливим визначення провірусної ДНК.

Проблема з постановкою діагнозу полягає в тому, що антитіла до ВІЛ з'являються не відразу, але метод ІФА та імуноблотинг залишаються найнадійнішими.

В імунології це явище називають серологічним вікном - це той найважливіший період від початку інфікування до появи такої кількості антитіл, яку можна виявити за допомогою аналізів. Те, скільки триває зазначений момент, залежить стану імунної системи кожної людини окремо, але у середньому триває від 2 до 12 тижнів. У цей час аналізи показуватимуть, що людина здорова, а насправді вона вже заражена. Іноді може пройти до 3 років, при цьому антитіла ВІЛ, перебуваючи в організмі людини, не виявляють жодних ознак активності (таке відбувається у 10% заражених).

Діагностика ВІЛ-інфекції включає 3 етапи дослідження крові, що проводиться в спеціальній лабораторії. Перший називається скринінговим, з його допомогою визначають, чи є антитіла щодо білків ВІЛ.

Другий спосіб діагностування - референтний, за допомогою спеціальних методів уточнюють або підтверджують первинний скринінговий результат. Третій етап діагностичний, він експертний, потрібен для остаточної перевірки маркерів ВІЛ-інфекції, які були виявлені на попередніх стадіях лабораторної діагностики. Тобто він потрібен для того, щоб підтвердити і виключити можливу помилку. Всі ці тести досить дорогі та складні, а тому виконуються лише у лабораторіях з наявністю спеціального обладнання. При дослідженнях сироватки крові помічено, що іноді реакція або хибнопозитивна, або невизначена. Так буває у вагітних і у тих, хто має деякі аутоімунні захворювання, у такому разі аналізи здають ще раз через півтора місяці, за цей час концентрація специфічних антитіл в організмі досягне необхідного рівня (якщо вони є) і результат буде більш точним.

Якщо хоча б один із серологічних методів дослідження показав позитивний результат на ВІЛ, то подальше обстеження має бути динамічним і регулярним до відновлення функцій імунної системи.

Визначення стадії

Визначають захворювання наступним чином: приблизно через 2 тижні після передбачуваного зараження застосовують метод імуноблотингу, цей аналіз має найвищу чутливість, приблизно 97%. Якщо результат негативний, використовують інший, ще чутливіший метод - це полімеразна ланцюгова реакція (ПЛР) або ІФА. Теоретично цей надчутливий сналіз може виявити одну ДНК на 10 мг середовища. Буває, що імуноблотинг показує негативний результат, а ІФА позитивний. Це говорить про те, що на даному етапі йде початковий період сероконверсії, тобто концентрація специфічних антитіл в організмі підвищуватиметься і повторний аналіз за допомогою імуноблотингу через деякий час покаже позитивний результат.

Як це працює? Застосовуючи метод полімеразної ланцюгової реакції, роблять велику кількість копій нуклеїнової кислоти, тому що вірус знаходиться в білковій оболонці. Серед отриманих копій за характерною будовою та за допомогою мічених ферментів визначають уражені вірусом клітини. Проблема цього методу полягає в тому, що такий спосіб діагностики дуже дорогий і в плановому порядку його не використовують тільки якщо пацієнт сам готовий його оплатити в індивідуальному порядку або в приватній клініці.

Лабораторне діагностування ВІЛ-інфекції допомагає розрізнити 5 стадій розвитку патології. Проходять ці стадії однаково, різниця лише у часових рамках, оскільки залежить від стану імунної системи кожної окремої людини.

інкубаційна прихована стадія;
етап первинних очевидних ознак;
безсимптомне перебіг хвороби;
гостра ВІЛ-інфекція без вторинних захворювань;
гостра форма хвороби із вторинними патологіями;
клінічно латентна стадія (триває до 7 років);
етап вторинних захворювань;
термінальна стадія, коли практично системи та органи людини незворотно вражені хворобою.

За аналізами та кількістю уражених клітин у ньому, за загальним станом лікарі можуть досить точно визначити, на якій стадії хвороби перебуває людина.

Інкубаційний період. У цей час у крові ще не виявляються віруси та уражені ВІЛ-нуклеїнові кислоти, тому, потрапивши в період безсимптомного серологічного вікна, людина може і не дізнатися про свою хворобу.

Стадія первинних виявів. У цей час виникають характерні ознаки, що були перераховані вище, в організмі утворюються антитіла.

Безсимптомна стадія. Найнебезпечніша, в цей період хвороби згасають навіть ті ознаки, які виявлялися на другій стадії, хвороба минає без очевидних симптомів.

Гостра ВІЛ-інфекція без вторинних захворювань. При повторному дослідженні крові хворого виявляються широкоплазмові лейкоцити з паралельним зниженням кількості лімфоцитів. Підвищений вміст перших вказує на запалення, що протікає в організмі, у більшості хворих відзначається інфекція в гострій формі.

Гостра ВІЛ-інфекція із вторинними захворюваннями. Через стрімке зниження лімфоцитів в організмі розвивається стійкий імунодефіцит, на тлі цього проявляються інші різні захворювання. Наприклад, кандидози, пневмонія, алергії, всілякі інфекції, ангіни та інше.

Латентна стадія. Імунодефіцит прогресує, хвороба загострюється, а сама людина втрачає в середньому 10% своєї маси тіла.

Стадія вторинних хвороб. Цей передостанній період теж має 3 етапи, звані 4А, 4Б, 4В. За відсутності належного лікування сили та можливості організму сильно виснажуються.

Термінальна стадія. Критичне зниження CD-клітин менше 0,05-109 кл/л. Концентрація антитіл фактично визначається.

Аналізи крові на ВІЛ у дітей

Протягом тривалого часу після народження у крові дитини перебувають материнські антитіла до ВІЛ-інфекції. Аналіз крові, зроблений у перший місяць життя малюка, може і не підтвердити інфікованість, але відсутність антитіл до ВІЛ не означає, що вірус не проник через плаценту. Таких дітей слід спостерігати перші 3 роки, роблячи відповідні аналізи.

Щоб максимально виключити помилку, результати лабораторних відповідей слід розглядати лише разом із даними загального клінічного обстеження.

Сучасна діагностика ВІЛ-інфекцій практично повністю виключає можливу помилку, крім деяких моментів важливо цим скористатися якомога раніше.

Своєчасна діагностика ВІЛ-інфекції стає вкрай важливим заходом, тому що раніше початок лікування може багато в чому визначити подальший розвиток захворювання та продовжити життя хворого. В останні роки спостерігається вагомий прогрес у галузі виявлення цієї страшної хвороби: на зміну старим тест-системам приходять досконаліші, методи обстеження стають доступнішими, і їхня точність значно підвищується.

У цій статті розповімо про сучасні методи діагностики ВІЛ-інфекції, знати які корисно для своєчасного лікування цієї проблеми та підтримання нормальної якості життя хворого.

Методики діагностики ВІЛ

У Росії для діагностики ВІЛ-інфекції проводиться стандартна процедура, що включає два рівні:

ІФА тест-система (скринінговий аналіз);
імунний блот (ІБ).

Також для діагностики можуть застосовуватись інші методики:

експрес-тести.

ІФА тест-системи

На першому етапі діагностики для виявлення ВІЛ-інфекції застосовується скринінговий тест (ІФА), який заснований на створених у лабораторіях білках ВІЛ, що уловлюють специфічні антитіла, що виробляються в організмі у відповідь на інфікування. Після їхньої взаємодії з реагентами (ферментами) тест-системи змінюється забарвлення індикатора. Далі ці зміни кольору обробляються на спеціальній апаратурі, яка визначає результат виконаного аналізу.

Такі ІФА-тести здатні показувати результат уже за кілька тижнів після впровадження ВІЛ-інфекції. Цей аналіз визначає не наявність вірусу, а виявляє вироблення антитіл щодо нього. Іноді, в організмі людини вироблення антитіл до ВІЛ починається через 2 тижні поле зараження, але у більшості людей вони виробляються на пізніших термінах, через 3-6 тижнів.

Існує чотири покоління ІФА-тестів із різною чутливістю. В останні роки частіше застосовуються тест-системи III і IV покоління, які створені на основі синтетичних пептидів або рекомбінантних білків і мають більшу специфічність і точність. Вони можуть використовуватися для діагностики ВІЛ-інфекції, моніторингу поширеності ВІЛ та забезпечення безпеки під час перевірки донорської крові. Точність ІФА-тест-систем III та IV покоління складає 93-99% (більш чутливі тести, що випускаються у країнах західної Європи – 99%).

Для виконання ІФА-тесту проводиться забір 5 мл крові із вени пацієнта. Між останнім прийомом їжі та аналізом має пройти не менше 8 годин (як правило, він виконується вранці натще). Такий тест рекомендується складати не раніше, ніж через 3 тижні після передбачуваного зараження (наприклад, після незахищеного статевого акту з новим статевим партнером).

Результати ІФА-тесту виходять через 2-10 днів:

негативний результат: вказує на відсутність інфікування ВІЛ та не вимагає звернення до фахівця;
помилково-негативний результат: може спостерігатися на ранніх термінах інфікування (до 3 тижнів), при пізніх стадіях СНІДу при вираженому придушенні імунітету та при неправильно проведеній підготовці крові;
помилково позитивний результат: може спостерігатися при деяких захворюваннях та при неправильно проведеній підготовці крові;
позитивний результат: вказує на зараження ВІЛ інфекцією, вимагає проведення ІБ та звернення пацієнта до спеціаліста до центру СНІДу.

Чому ІФА-тест може давати хибно-позитивні результати?

Хибнопозитивні результати ІФА-тесту на ВІЛ можуть спостерігатися при неправильній обробці крові або у хворих з такими станами та захворюваннями:

множинна мієлома;
інфекційні захворювання, спровоковані вірусом Епштейна Барр;
стан після;
аутоімунні захворювання;
на фоні вагітності;
стан після вакцинації.

При вищеописаних причинах у крові можуть бути неспецифічні перехресно реагують антитіла, вироблення яких було спровоковано не ВІЛ-інфекцією.

В останні роки частота хибнопозитивних результатів суттєво знизилася завдяки застосуванню тест-систем III та IV покоління, які містять більш чутливі пептидні та рекомбінантні білки (вони синтезуються за допомогою генної інженерії in vitro). Після початку застосування таких ІФА-тестів частота хибнопозитивних результатів значно знизилася і становить близько 0,02-0,5%.

Виявлення хибнопозитивного результату не означає, що людина інфікована ВІЛ. У таких випадках ВООЗ рекомендує провести ще один ІФА-тест (обов'язково IV покоління).

Кров пацієнта відправляється в референс або арбітражну лабораторію з позначкою «повторити» та досліджується на ІФА тест-системі IV покоління. Якщо результат нового аналізу негативний, то перший результат визнається помилковим (хибнопозитивним) та ІБ не проводиться. При позитивному чи сумнівному результаті під час другого тесту хворому обов'язково призначається проведення ІБ через 4-6 тижнів на підтвердження чи спростування ВІЛ-інфікування.

Імунний блот

Остаточний діагноз інфікування ВІЛ може встановлюватись тільки після отримання позитивного результату імунного блотингу (ІХ). Для його проведення застосовується нітроцелюлозна смужка, на яку нанесені вірусні білки.

Забір крові для ІБ виконується з вени. Далі вона піддається спеціальної обробки і білки, що містяться в її сироватці, поділяють у спеціальному гелі за їх зарядом і молекулярною масою (маніпуляція проводиться на спеціальній апаратурі під впливом електричного поля). На гель із сироватки крові накладають нітроцелюлозну смужку та проводять блот («промокування») у спеціальній камері. Смужка обробляється і якщо в матеріалах є антитіла до ВІЛ, то вони зв'язуються з антигенними смугами на ІБ і виявляються у вигляді ліній.

ІБ вважається позитивним якщо:

за критеріями American CDC – на смужці є дві або три лінії gp41, p24, gp120/gp160;
за критеріями American FDA – на смужці є дві лінії р24, р31 та лінія gр41 або gр120/gр160.

У 99,9% випадків позитивний результат ІХ вказує на ВІЛ-інфікування.

За відсутності ліній – ІБ негативним.

При виявленні ліній з gр160, gр120 і gр41 ІБ є сумнівним. Такий результат може виявлятися при:

онкологічні захворювання;
вагітності;
частих трансфузіях крові.

У разі рекомендується виконання повторного дослідження з допомогою набору інший фірми. Якщо ж після додаткового ІБ результат залишається сумнівним, необхідно спостереження протягом півроку (через кожні 3 місяці проводяться ІБ).

Полімеразна ланцюгова реакція

Тест на ПЛР може визначати РНК вірусу. Його чутливість досить висока і дозволяє виявляти ВІЛ-інфікування вже через 10 днів після зараження. У деяких випадках ПЛР може давати хибно-позитивні результати, тому що його висока чутливість може реагувати і на антитіла до інших інфекцій.

Дана методика діагностики є дорогою, потребує спеціального обладнання та високої кваліфікації спеціалістів. Ці причини не дозволяють проводити її при масовому тестуванні населення.

ПЛР застосовується у таких випадках:

для виявлення ВІЛ у новонароджених, які народилися від ВІЛ-інфікованих матерів;
для виявлення ВІЛ у «періоді вікна» або за сумнівного ІБ;
для контролю концентрації ВІЛ у крові;
для дослідження донорської крові

Тільки за тестом ПЛР діагноз ВІЛ не ставиться, а проводиться як додатковий метод діагностики для вирішення спірних ситуацій.

Експрес-методи

Однією з інновацій у діагностиці ВІЛ стали експрес-тести, результати яких можуть оцінюватися вже за 10-15 хвилин. Найбільш ефективні та точні результати виходять за допомогою імунохроматографічних тестів, заснованих на принципі капілярного потоку. Вони являють собою спеціальні смужки, на які наноситься кров або інші рідини, що досліджуються (слина, сеча). За наявності антитіл до ВІЛ через 10-15 хвилин на тесті з'являються кольорова та контрольна смужка – позитивний результат. При негативному результаті з'являється лише контрольна смужка.

Як і після тестів ІФА, результати експрес-тестів мають підтверджуватись аналізом ІБ. Тільки після цього може встановлюватися діагноз про ВІЛ-інфікування.

Існують експрес-набори для домашнього тестування. Тест OraSure Technologies1 (США) схвалений FDA, продається без рецепта та може застосовуватись для виявлення ВІЛ. Після проведення тесту, у разі позитивного результату, хворому рекомендується пройти обстеження у спеціалізованому центрі для підтвердження діагнозу.

Інші тести для домашнього використання ще не були схвалені FDA і їхній результат може бути дуже сумнівним.

Незважаючи на те, що експрес-тести за своєю точністю поступаються ІФА-тестам IV покоління, вони широко застосовуються для додаткового тестування населення.

Здати аналізи на виявлення ВІЛ-інфекції можна в будь-якій поліклініці, ЦРЛ або спеціалізованих СНІД-центрах. На території Росії вони проводяться абсолютно конфіденційно або анонімно. Кожен пацієнт може розраховувати отримання медичної чи психологічної консультації до чи після проведення аналізу. Платити за тести на ВІЛ доведеться лише у комерційних лікувальних закладах, а у державних поліклініках та лікарнях вони виконуються безкоштовно.

Про те, якими шляхами можна заразитися ВІЛ-інфекцією та які міфи існують про можливості заразитися, читайте у

1. Серологічні методивиявлення антитіл (АТ) до ВІЛ - стандарт при діагностиці ВІЛ-інфекції (тест-системи ІФА на основі синтетичних пептидів - мають практично 100% чутливість і специфічність). ІФА дозволяє виявляти АГ ВІЛ, які можуть бути показниками раннього інфікування або навпаки пізнього – просунутого розвитку ВІЛ-інфекції (р24 АГ)

2. Підтверджуючі тести- імуноблотинг (ІХ), непряма імунофлюоресценція (НІФ) та радіоімунопреципітація (РІП).

а) ВООЗ рекомендує вважати позитивною сироватку, що має в ІБ антитіла до двох оболонкових білків і одного з внутрішніх білків ВІЛ. Пацієнти, позитивні в ІФА, але мають невизначені результати в ІХ, повинні бути обстежені клінічно та оцінені іншими способами, медичним обстеженням, імунологічно та через 3 - 6 місяців їх сироватку крові необхідно тестувати на антитіла до ВІЛ.

б) метод непрямої імунофлюоресценції (НІФ) - застосовують як підтверджуючий тест у багатьох лабораторіях або як скринінговий тест.

в) радіоімунопреципітація - високочутливий та специфічний метод, заснований на використанні мічених радіоактивними ізотопами амінокислот. Метод високо чутливий для виявлення антитіл до поверхневих білків і тому є високоспецифічним, оскільки ці компоненти вірусу присутні практично у всіх ВІЛ-інфікованих після сероконверсії.

3. Молекулярно-біологічні методи: метод молекулярної гібридизації нуклеїнових кислот, ПЛР

ПЛР використовують:

1) як альтернативний та додатковий підтверджуючий метод детекції наявності вірусу в організмі по відношенню до серологічних методів лабораторної діагностики;

2) як перший метод специфічного аналізу при діагностиці раннього ВІЛ-інфікування, коли ще відсутні специфічні противірусні антитіла;

3) для діагностики ВІЛ-інфікованості новонароджених від ВІЛ-інфікованих матерів;

4) для визначення вірусного навантаження та призначення специфічної антиретровірусної терапії та контролю за її проведенням;

5) як уточнюючий метод при неясних серологічних результатах та при розбіжності серологічних та культуральних аналізів;

6) для дослідження сексуальних партнерів ВІЛ-інфікованих осіб;

7) як метод диференціальної діагностики ВІЛ-1 та ВІЛ-2;

4. Вірусологічний метод.

Лікування ВІЛ-інфекції:

1. Принципи антиретровірусної терапії: лікування має починатися до розвитку суттєвого імунодефіциту; початкова терапія повинна включати комбінації не менше ніж із трьох препаратів; модифікація терапії повинна полягати у заміні або підключенні не менше двох нових препаратів; дуже важливо вимірювати рівень СД4+ клітин та вірусне навантаження; зниження вірусного навантаження рівня, що лежить нижче межі визначення чутливих методик, відбиває оптимальний ефект лікування.

2. Виділяють три групи сучасних антиретровірусних препаратів:

а) нуклеозидні інгібітори зворотної транскриптази (НДПТ):зидовудин (азидотімідин, ретровір); диданозин (ddI, відекс); зальцитабін (ddC, хівід); ставудин (зерит, d4Т); ламівудін (3ТС, епівір); абакавір; адефовір; комбівір (зидовудін + абакавір); тризивір (зидовудін + ламівудін + абакавір); адефовір (нуклеотидний інгібітори зворотної транскриптази).

б) ненуклеозидні інгібітори зворотної транскриптази (ННІОТ):справавердин (рескриптор); невірапін(вірамун); іфавіренц.

в) інгібітори протеази (ІП):саквінавір; ритонавір (норвір); індинавір (криксиван); нельфінавір (вірасепт); ампренавір (агенераза); лопінавір (алувіран); калетра (лопінавір + ритонавір).

3. Монотерапія будь-яким препаратом не може забезпечити достатньо вираженого та тривалого пригнічення реплікації ВІЛ. Більше того, при монотерапії підвищено ризик появи резистентних штамів та розвитку перехресної стійкості до препаратів тієї ж групи. Єдиним винятком є використання зидовудину як монотерапію для зниження ризику перинатальної передачі ВІЛ.

4. Найбільш важливим критерієм ефективності терапії є динаміка вірусного навантаження, яку слід визначати: без лікування – кожні 6-12 місяців, на фоні лікування – кожні 3-6 місяців, а також через 4-8 тижнів після початку противірусної терапії.

Крім антиретровірусної терапії необхідна терапія захворювань, що приєдналися вдруге.

34.3 СНІД (клінічні варіанти, опортуністичні захворювання).

Опутуністичні захворювання- тяжкі, прогресуючі хвороби, що розвиваються на тлі наростаючої імуносупресії та не зустрічаються у людини з нормально функціонуючої імунної системою (СНІД-індикаторні захворювання).

а) перша група- це захворювання, які властиві лише тяжкому імунодефіциту (рівень ЦД4+< 200 кл/мкл) и поэтому определяют клинический диагноз: 1. Кандидоз пищевода, трахеи, бронхов. 2. Внелегочный криптококкоз. 3. Криптоспоридиоз с диареей более 1 месяца. 4. Цитомегаловирусная инфекция с поражением различных органов, помимо печени, селезенки или лимфоузлов. 5. Инфекции, обусловленные вирусом простого герпеса, проявляющиеся язвами на коже и слизистых оболочках. 6. Саркома Капоши у лиц, моложе 60 лет. 7. Первичная лимфома мозга у лиц, моложе 60 лет. 8. Лимфоцитарная интерстициальная пневмония и/или легочная лимфоидная гиперплазия у детей в возрасте до 12 лет. 9. Диссеминированная инфекция, вызванная атипичными микобактериями с внелегочной локализацией. 10. Пневмоцистная пневмония. 11. Прогрессирующая многоочаговая лейкоэнцефалопатия. 12. Токсоплазмоз с поражением головного мозга, легких, глаз у больного старше 1 месяца.

б) друга група- захворювання, які можуть розвинутися як на тлі тяжкого імунодефіциту, так і в ряді випадків без нього: 1. Бактеріальні інфекції, поєднані або рецидивні у дітей до 13 років (більше двох випадків за 2 роки спостереження): септицемія, пневмонія, менінгіт, ураження кісток або суглобів, абсцеси, обумовлені гемофільною паличкою, стрептококами. 2. Кокцидіомікоз дисемінований (нелегкова локалізація). 3. ВІЛ-енцефалопатія 4. Гістоплазмоз, дисемінований із позалегеневою локалізацією. 5. Ізоспороз з діареєю, що персистує понад 1 місяць. 6. Саркома Капоші у людей будь-якого віку. 7. В-клітинні лімфоми (за винятком хвороби Ходжкіна) або лімфоми невідомого імунофенотипу. 8. Туберкульоз позалегеневий. 9. Сальмонельозна септицемія рецидивна. 10. ВІЛ-дистрофія.

Найчастіше зустрічаються пневмоцистна пневмонія, криптококовий менінгоенцефаліт, генералізована цитомегаловірусна інфекція (енцефаліт, ретиніт, езофагіт, гепатит, коліт), сепсис змішаної етіології, генералізована форма саркоми Капоші, туберкульоз.

Всі ці захворювання протікають з ураженням одного або декількох органів і систем: головного мозку, легенів, печінки, шлунково-кишкового тракту і мають важкий прогресуючий характер. СНІД-індикаторні хвороби з'являються в різних поєднаннях, і навіть адекватна терапія не дає очікуваного ефекту.

Клінічні варіанти СНІД: інфекто-, нейро-, онко-СНІД залежно від переважання різної клініки.